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產品名稱：HeLa細胞專用培養(yǎng)基

產品貨號：TCH-G193

培養(yǎng)體系：MEM+10%FBS+1%P/S

產品規(guī)格：500mL / 200mL / 125mL

產品形態(tài)：液體

生物安全檢測：細菌、真菌、支原體檢測陰性

內毒素含量：＜10 EU/mL

儲存條件：2-8℃，避光儲存

運輸條件：冰袋冷藏運輸

有效期：3 months

這種培養(yǎng)基 TCH-G193 由Cas9X海星生物技術團隊精心優(yōu)化，可保持HeLa細胞理想的生長狀態(tài)。本產品已包含HeLa細胞生長的各種成分，無需額外添加，可直接用于HeLa細胞的體外培養(yǎng)。

注意事項

(1) 本產品含有血清和雙抗，如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗，可以直接使用。

(2) 使用前請將產品提前置于室溫或37°C充分預熱。

(3) 使用產品時應注意無菌操作，避免污染。

(4) 使用產品時請做好個人防護。

(5) 為保持本產品的最佳使用效果，不宜將其長時間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。

(6) 所有產品請于保質期內使用，超出保質期，請放棄使用。

HeLa細胞復蘇及傳代培養(yǎng)簡要實驗步驟如下：

細胞培養(yǎng)試劑：DMEM培養(yǎng)基，胎牛血清，青霉素，鏈霉素，0.25%胰蛋白酶（含0.02%的EDTA），PBS等

細胞培養(yǎng)耗材：T25細胞培養(yǎng)瓶、移液槍吸頭、50ml離心管、15ml離心管、細胞計數板。

實驗室儀器設備:二氧化碳振蕩培養(yǎng)箱、 光學顯微鏡、瑞寧移液器、 超凈臺、 恒溫水浴鍋、酒精燈，-80冰箱，液氮罐，低溫冷凍存儲箱。

HeLa細胞復蘇步驟：

凍存液： 含10%血清的培養(yǎng)基和5％-10% DMSO

取對數生長期細胞， 精胰酶消化后加入適量凍存液，用吸管吹打制成 細胞懸液（1×106 ~5×106細胞/ml），加入1ml細胞于凍存管中，密封后標記細胞名稱和冷凍日期。

復蘇細胞是從零下80℃冰箱或液氮罐中取出凍存管，迅速投入37℃水浴中，使其融化（1分鐘左右），用培養(yǎng)集緩慢稀釋至原體積的10倍以上，大部分細胞貼壁后（4~6小時），吸取含有凍存液的培養(yǎng)基，并換成完培。

HeLa細胞復蘇實驗步驟：

1. 從零下80℃冰箱或者液氮罐中取出冷凍管，迅速投入37℃水浴中，使其融化（1分鐘左右）。

2．培養(yǎng)基緩慢稀釋至原體積的10倍以上。

3.低速離心10分鐘，吸去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基培養(yǎng)剛復蘇的細胞。

HeLa細胞傳代實驗步驟：

取密度80％左右的Hela細胞，吸去舊的培養(yǎng)基，用PBS或者Trypsin消化液潤洗細胞以減少殘留的血清對Trypsin的抑制作用。

吸去PBS或者Trypsin，加入Trypsin消化液，于37℃消化2～4分鐘，于倒置顯微鏡下觀察，當細胞之間出現間時或者變圓時，吸掉Trypsin消化液。   加入適量HeLa細胞培養(yǎng)基 ，用移液器上下吹打數次打散細胞團塊以盡可能形成單細胞懸液，吹打均勻后，按照稀釋比例轉移至新的培養(yǎng)瓶中，補充完培并以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。