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產(chǎn)品簡介
詳細介紹
長期出售二手層析柱長期出售二手層析柱
層析柱是凝膠層析技術(shù)中的主體，一般用玻璃管或有機玻璃管。根據(jù)樣品混合物中各組分在固定相和流動相中分配系數(shù)不同，從而分離的一種層析法。
層析柱的直徑大小不影響分離度，樣品用量大，可加大柱的直徑，一般制備用凝膠柱，直徑大于2厘米，但在加樣時應將樣品均勻分布于凝膠柱床面上。此外， 直徑加大，洗脫液體體積增大，樣品稀釋度大。分離度取決于柱高，為分離不同組分，凝膠柱床必須有適宜的高度，分離度與柱高的平方根相關(guān)，但由于軟凝膠柱過高擠壓變形阻塞，一般不超過1米。分族分離時用短柱，一般凝膠柱長20-30厘米，柱高與直徑的比較5:1─10:1，凝膠床體積為樣品溶液體積的4-10倍。 分級分離時柱高與直徑之線為20:1─100:1，常用凝膠柱有50×25厘米，10×25厘米。層析柱濾板下的死體積應盡可能的小，如果支掌濾板下的死體積大，被分離組分之間重新混合的可能性就大，其結(jié)果是影響洗脫峰形，出現(xiàn)拖尾出象，降低分辯力。在精確分離時，死體積不能超過總床體積的1/1000
以中壓柱層析法提取分離冬凌草甲素為例：
1.吸附劑的處理及柱子裝填
將一定量薄層層析硅膠裝人搪瓷盤置于烘箱中，于105。C活化2H后，取出放置室溫即可裝柱。柱子采用干法填充，填滿整個柱體，不留死體積，密封后用柱塞式計量溶劑泵按丙酮一石油醚(5：95)比例泵人溶劑，至溶劑流出止。
2.上樣
將冬凌草的乙醇提取物400G用適量丙酮溶解，泵人中壓柱柱頭，然后泵人石油醚1000RID。
3.洗脫
以一定比例的石油醚一丙酮為洗脫液，60ML/MIN的流速進行梯度洗脫，柱的使用壓力為2～ 3KG/C 。按每份500ML收集，TLC檢識展開劑(2：8)，顯色劑5%香草醛濃硫酸乙醇液
至洗脫*，相同流份合并，回收溶劑。將冬凌草甲素流份合并蒸干。加人適量甲醇熱溶后自然放置，析出結(jié)晶，為冬凌草甲素。
4.層析柱再生、平衡
有效成分經(jīng)TLC檢識全部流出后，用純丙酮5000ML再生，丙酮一