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當(dāng)前位置:安諾倫(北京)生物科技有限公司>>免疫學(xué)>>原位顯影技術(shù)>> FISH服務(wù)
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所 在 地無錫市
更新時間:2020-05-14 15:41:46瀏覽次數(shù):1490次
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FISH(fluorescence in situ hybridization)技術(shù)是一種重要的非放射性原位雜交技術(shù)?;驹恚喝绻粰z測的染色體或DNA纖維切片上的靶DNA與所用的核酸探針是同源互補的,二者經(jīng)變性-退火-復(fù)性,即可形成靶DNA與核酸探針的雜交體。
熒光原位雜交(fluorescence in situ hybridization, FISH)是在20世紀(jì)80年代末在放射性原位雜交技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種非放射性分子細胞遺傳技術(shù),以熒光標(biāo)記取代同位素標(biāo)記而形成的一種新的原位雜交方法,探針首先與某種介導(dǎo)分子(reporter molecule)結(jié)合,雜交后再通過免疫細胞化學(xué)過程連接上熒光染料。FISH的基本原理是將DNA(或RNA)探針用特殊的核苷酸分子標(biāo)記,然后將探針直接雜交到染色體或DNA纖維切片上,再用與熒光素分子偶聯(lián)的單克隆抗體與探針分子特異性結(jié)合來檢測DNA序列在染色體或DNA纖維切片上的定性、定位、相對定量分析。
基本步驟:
1. 玻片的準(zhǔn)備和樣品固定
2. 細胞或組織的預(yù)滲透處理
3. 靶DNA變性(DNA原位雜交)
4. 探針制備
5. 原位雜交過程
6. 雜交后洗滌
7. 探針(顯色)檢測
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