詳細(xì)介紹
?ELISA 試驗(yàn)時(shí),注意事項(xiàng)如下:
1. 正式試驗(yàn)時(shí),應(yīng)分別以陽(yáng)性對(duì)照與陰性對(duì)照控制試驗(yàn)條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時(shí)本底較高,說明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 在ELISA中,進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它試驗(yàn)條件相同時(shí),觀察陽(yáng)性標(biāo)本的OD值。選擇OD值i大而蛋白量少的濃度。對(duì)于多數(shù)蛋白質(zhì)來(lái)說通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對(duì)供氫體的選擇要求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無(wú)色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入 。
人視黃酸)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:Human Retinoic Acid ELISA Kit產(chǎn)品別名:人人視黃酸elisa試劑盒用于測(cè)定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Human Retinoic Acid ELISA Kit |
貨號(hào) | CS-E4006 |
標(biāo)本的采集與保存:
1、血清:將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2 小時(shí)或4oC 過夜,然后1000×g 離心20 分鐘,取上清即
可,或?qū)⑸锨逯糜?20oC 或-80oC 保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2、血漿:用EDTA 或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本,并將標(biāo)本在采集后的30 分鐘內(nèi)于2-8oC 1000×g 離心15 分鐘,
取上清即可檢測(cè),或?qū)⑸锨逯糜?20oC 或-80oC 保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3、組織勻漿:
1) 取適量組織塊,于預(yù)冷PBS(0.01mol/L, pH 7.0-7.2)中清洗去除血液,稱重后備用(組織塊較大需先剪碎后再勻漿);
2) 可同時(shí)選用多種勻漿方法達(dá)到較好的破碎效果:首先將組織塊移入玻璃勻漿器,加入5-10mL 預(yù)冷PBS 進(jìn)行充分研磨,該過程需在冰上進(jìn)行(有條件實(shí)驗(yàn)室可選用機(jī)器勻漿);得到的勻漿液可再利用超聲破碎或反復(fù)凍融進(jìn)一步處理(超聲破碎過程中注意冰浴降溫;反復(fù)凍融法可重復(fù)2 次)。
3) 將制備好的勻漿液于5000×g 離心5 分鐘,留取上清即可檢測(cè)。
4、其它生物標(biāo)本:請(qǐng)1000×g 離心20 分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)⑸锨逯糜?20oC 或-80oC 保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
試劑和樣本的控制方法:
一、試劑
1.試劑的選擇:國(guó)家明確要求要采用批批檢定的形式對(duì)ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān),我司嚴(yán)格按照進(jìn)行生產(chǎn),已獲得國(guó)家承認(rèn)的“三證”,每一個(gè)產(chǎn)品都有對(duì)應(yīng)的生產(chǎn)批號(hào),只要客戶提前下單,我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品,不必?fù)?dān)心會(huì)有過期的試劑。我司的試劑,值得您選擇。
2.試劑的準(zhǔn)備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來(lái),在室溫下放置20-30 min后,再進(jìn)行測(cè)定,使試劑盒在使用前與室溫平衡,這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所需的溫度,以滿足后面的測(cè)定需求。
二、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素:包括類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等;
類風(fēng)濕因子的控制方法:
①用F(ab)2替代完整的IgG;
②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理;
③檢測(cè)抗原時(shí),可用加入到標(biāo)本稀釋液中使RF降解;
補(bǔ)體的控制方法:
①用EDTA稀釋標(biāo)本;
②56℃ 30 min加熱血清使C1q滅活;
2.外源性干擾因素:包括標(biāo)本溶血、細(xì)菌污染、保存時(shí)間過長(zhǎng)或凝固不全等;
控制方法:采血時(shí)規(guī)范操作,采集的血液勿用力震蕩,以防溶血;收集標(biāo)本時(shí)采用無(wú)菌試管,經(jīng)檢測(cè)后再低溫凍存;保存時(shí)間不宜過久,檢測(cè)時(shí)盡量采用新鮮標(biāo)本;對(duì)于凝固不全的血標(biāo)本可適當(dāng)加入抗凝劑,并放入37℃水中1 h,待充分凝固后再離心分離血清。
公司采用全是進(jìn)口原材料研,發(fā)靈敏性高,高效性,*抗體,吸附均勻、吸附性好,回收利用率高、可靠性強(qiáng),無(wú)效包退包換,公司提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),各種種屬ELISA試劑盒產(chǎn)品齊全,質(zhì)量可靠。
以下是人視黃酸elisa檢測(cè)試劑盒的相關(guān)產(chǎn)品:
細(xì)胞半胱酸蛋白酶-7(CASPASE-7)活性熒光定量檢測(cè)試盒CDl4(Human cluster Of differentiation) ELISA Kit 人CD14分子
組織半胱酸蛋白酶-7(CASPASE-7)活性熒光定量檢測(cè)試盒AIF(Human apoptosis inducing factor) ELISA Kit 人凋亡誘導(dǎo)因子
細(xì)胞半胱酸蛋白酶-8(CASPASE-8)活性比色法定量檢測(cè)試盒LCA/CD45(Human leukocyte common antigen) ELISA Kit 人白細(xì)胞共同抗原
組織半胱酸蛋白酶-8(CASPASE-8)活性比色法定量檢測(cè)試盒CD4(Human cluster Of differentiation) ELISA Kit 人CD4分子
細(xì)胞半胱酸蛋白酶-8(CASPASE-8)活性熒光定量檢測(cè)試盒P-cad(Human Placenta Cadherin) ELISA Kit 人P鈣黏蛋白/胎盤鈣黏蛋白
組織半胱酸蛋白酶-8(CASPASE-8)活性熒光定量檢測(cè)試盒KGF(Human Keratinocyte Growth Factor) ELISA Kit 人角化細(xì)胞生長(zhǎng)因子
細(xì)胞半胱酸蛋白酶-9(CASPASE-9)活性比色法定量檢測(cè)試盒PDGF-BB(Human Platelet-Derived Growth Factor-BB) ELISA kit 人血小板衍生生長(zhǎng)因子BB
人視黃酸elisa檢測(cè)試劑盒組織半胱酸蛋白酶-9(CASPASE-9)活性比色法定量檢測(cè)試盒CXCL16(Human CXC-chemokine ligand 16) ELISA Kit 人CXC趨化因子配體16
細(xì)胞半胱酸蛋白酶-9(CASPASE-9)活性熒光定量檢測(cè)試盒CXCR3(Human CXC-chemokine receptor 3) ELISA Kit 人CXC趨化因子受體3
組織半胱酸蛋白酶-9(CASPASE-9)活性熒光定量檢測(cè)試盒IFI16/p16(Human interferon-inducible protein 16) ELISA Kit 人γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16
細(xì)胞半胱酸蛋白酶-10(CASPASE-10)活性比色法定量檢測(cè)試盒SDF-1a/CXCL12(Human Stromal cell derived factor 1a) ELISA Kit 人基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a
組織半胱酸蛋白酶-10(CASPASE-10)活性比色法定量檢測(cè)試盒Lptn/LTN/XCL1(Human lymphotactin) ELISA Kit 人淋巴細(xì)胞趨化因子
細(xì)胞半胱酸蛋白酶-10(CASPASE-10)活性熒光定量檢測(cè)試盒IFN- Alpha(Human Interferon Alpha) ELISA Kit 人α干擾素
組織半胱酸蛋白酶-10(CASPASE-10)活性熒光定量檢測(cè)試盒B7-2/sCD86(Human soluble Cluster of differentiation 86) ELISA Kit 人可溶性CD86
細(xì)胞半胱酸蛋白酶-12(CASPASE-12)活性比色法定量檢測(cè)試盒IL-27(human Interleukin 27) ELISA Kit 人白介素27Bovine ALD(Aldosterone) ELISA Kit
牦牛源性成分LAMP試劑盒
牦牛源性成分PCR檢測(cè)試劑盒
牦牛源性成分染料法熒光定量PCR試劑盒
牦牛源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒
綿羊源性成分LAMP試劑盒
綿羊源性成分PCR檢測(cè)試劑盒
綿羊源性成分染料法熒光定量PCR試劑盒
綿羊源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒
鳥源性成分LAMP試劑盒
鳥源性成分PCR檢測(cè)試劑盒
鳥源性成分染料法熒光定量PCR試劑盒
鳥源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒
牛源性成分LAMP試劑盒
牛源性成分PCR檢測(cè)試劑盒
牛源性成分染料法熒光定量PCR試劑盒
牛源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒
蕎麥源性成分LAMP試劑盒
蕎麥源性成分PCR試劑盒
蕎麥源性成分染料法熒光定量PCR試劑盒
蕎麥源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒
芹菜源性成分LAMP試劑盒
芹菜源性成分PCR檢測(cè)試劑盒
芹菜源性成分染料法熒光定量PCR試劑盒
芹菜源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒
人參源性成分LAMP試劑盒
人參源性成分PCR檢測(cè)試劑盒
人參源性成分染料法熒光定量PCR試劑盒
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山羊源性成分LAMP試劑盒
山羊源性成分PCR檢測(cè)試劑盒
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蛇源性成分LAMP試劑盒
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