藥物代謝·營(yíng)養(yǎng)吸收·腸道通透性評(píng)價(jià)系統(tǒng)
——KingTech系列尤斯灌流系統(tǒng)（Ussing Chamber System）
【方法簡(jiǎn)介】
20世紀(jì)50年代，丹麥學(xué)者Hans Ussing 將Ussing chamber（尤斯室或尤斯灌流室）介紹于世，該裝置模擬上皮組織在體內(nèi)的環(huán)境，并能長(zhǎng)時(shí)間維持其活性；通過(guò)微電極檢測(cè)跨上皮電信號(hào)及其在藥物和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)條件下的變化，來(lái)反映腸道藥物代謝、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)吸收及通透性等的變化。伴隨著Ussing Chamber設(shè)計(jì)的不斷改進(jìn)，其應(yīng)用也越來(lái)越廣泛。目前，幾乎所有的上皮都有利用Ussing Chamber研究的報(bào)道，包括消化道、呼吸道、生殖道、眼角膜、培養(yǎng)的單層上皮細(xì)胞等等。 研究的方向主要集中藥物吸收、營(yíng)養(yǎng)吸收、腸道通透性、以及離子通道機(jī)制等。
【系統(tǒng)配置】
KingTech尤斯灌流系統(tǒng)主要由三個(gè)單元組成：
（1） 尤斯室（Ussing chamber）：固定上皮組織并維持活性
（2） 電壓電流鉗：測(cè)量上皮組織電生理信號(hào)
（3） 數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)：采集并記錄數(shù)據(jù)
由于實(shí)驗(yàn)過(guò)程時(shí)間較長(zhǎng)，而且一般要做模型組與對(duì)照組的比較，所以多通道系統(tǒng)是比較好的選擇。通道越多，一次獲得的數(shù)據(jù)越多，實(shí)驗(yàn)成本也越低。而的系統(tǒng)為六通道。
KingTech（金泰公司）是專業(yè)和的尤斯系統(tǒng)制造商，其尤斯室品種涵蓋了所有可能的應(yīng)用，從zui初的電極前插式尤斯室（P2300），到可自動(dòng)灌流和停留循環(huán)的雙模式尤斯室（C3300），再到式的電極豎插式尤斯室（C4300）。另外還有適合于低轉(zhuǎn)運(yùn)量的P2400尤斯室、用于分泌物滴定的P2300B尤斯室、以及于牛羊瘤胃上皮的C500尤斯室。其中的C4300電極豎插式尤斯室成為目前和的尤斯室。
【C4300電極豎插式尤斯室】
尤斯室是用來(lái)固定上皮組織并維持活性的裝置。它由兩個(gè)半室組成，中間插入固定組織的樣本夾。兩側(cè)半室裝有等量的、對(duì)稱的Ringer溶液，用于消除上皮兩側(cè)化學(xué)、機(jī)械及電性的驅(qū)動(dòng)力。的C4300電極豎插式尤斯室是設(shè)計(jì)的產(chǎn)品，采用高透明亞克力材質(zhì)制作而成，電極豎插在小室中。
不同于老式的U型玻璃管尤斯室，也不同于普通的電極水平安裝的尤斯室，C4300具有以下優(yōu)點(diǎn)：
? 體積小巧，結(jié)構(gòu)緊湊，大大節(jié)省實(shí)驗(yàn)空間；
? 容積2-8ml，節(jié)省藥物用量；
? 電極在小室上方，電極填充液不會(huì)滲漏，電極中不會(huì)進(jìn)氣，鹽水也腐蝕不到電極接插件；
? 更換電極不需要先排空小室溶液。這種設(shè)計(jì)的好處是，既免除了繁瑣的操作，同時(shí)又避免組織長(zhǎng)時(shí)間暴露在空氣中而降低存活時(shí)間；
【VCC MC6 Plus電壓電流鉗】
VCC MC6 Plus是六通道的電壓電流鉗，它包括六個(gè)獨(dú)立的電壓電流鉗模塊、一個(gè)內(nèi)置的脈沖發(fā)生器、以及一套中控開(kāi)關(guān)，并且附帶一個(gè)多檔位的標(biāo)準(zhǔn)信號(hào)模擬器。通過(guò)電極電纜與多通道尤斯室連接，可連續(xù)監(jiān)測(cè)組織的電壓、電流、電阻和電導(dǎo)；而中控開(kāi)關(guān)可以同時(shí)控制六個(gè)通道的操作。
VCC MC6 Plus是在原VCC MC6的基礎(chǔ)上優(yōu)化改進(jìn)的，每個(gè)通道都有流阻補(bǔ)償?shù)牧砍绦o，對(duì)于不同面積的組織，不需要像VCC MC6那樣需要打開(kāi)機(jī)箱調(diào)節(jié)量程。
【UCRS2.0數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)】
UCRS2.0數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)是專門設(shè)計(jì)用于多通道尤斯系統(tǒng)的數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)，包括DA1008采集器、UCRS2.0軟件以及數(shù)據(jù)電纜。DA1008采集器提供16位的分辨率和200K/s的采樣速率，通過(guò)USB線與計(jì)算機(jī)連接。UCRS2.0軟件提供譜圖曲線和原始數(shù)據(jù)表的實(shí)時(shí)記錄顯示，可通過(guò)DA1008采集器控制多通道電壓電流鉗的按鍵，并有脈沖開(kāi)關(guān)功能。
UCRS2.0數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)與VCC MC6 Plus電壓電流鉗連接，可同時(shí)采集多達(dá)八個(gè)通道的尤斯室組織信號(hào)。
【應(yīng)用領(lǐng)域】
1、藥物代謝的研究：例如，藥物經(jīng)腸道的吸收和轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制、藥物經(jīng)皮膚的吸收及轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制。
2、胃腸道異常功能的研究，例如，正常的胃腸道黏膜組織、非正常的胃腸道黏膜組織，如缺血缺氧、炎癥反應(yīng)、營(yíng)養(yǎng)障礙等微生態(tài)環(huán)境改變時(shí)導(dǎo)致的胃腸道屏障功能的變化。
3、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)理研究：葡萄糖、小肽、游離脂肪酸、氨基酸和礦物質(zhì)元素等物質(zhì)吸收轉(zhuǎn)運(yùn)效率的研究。
4、用于其他上皮組織的吸收：
? 腎小管內(nèi)皮細(xì)胞對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)或藥物的排泌功能研究。
? 皮膚上皮細(xì)胞對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)或藥物的吸收機(jī)能的研究。
? 其他上皮組織，如大鼠結(jié)腸、小鼠回腸、青蛙皮膚、氣道上皮、視網(wǎng)膜上皮、膀胱壁、支氣管粘膜等。
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