詳細(xì)介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
牙髓 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細(xì)胞樣 | YS-01X8039 |
細(xì)胞簡介:
小鼠牙髓干分離自牙髓組織;牙髓組織位于牙齒內(nèi)部的牙髓腔內(nèi)。牙髓腔的外形與牙體形態(tài)大致相似,牙冠部髓腔較大,稱髓室,牙根部髓腔較細(xì)小,稱根管,根尖部有小孔,稱根尖孔。牙髓組織主要包含神經(jīng)、血管,淋巴和結(jié)締組織,還有排列在牙髓外周的造牙本質(zhì)細(xì)胞,其作用是造牙本質(zhì)。牙髓因受到病源刺激物的作用不同以及機(jī)體抵抗力的差異,出現(xiàn)不同的病理變化,在臨床上會(huì)表現(xiàn)為一系列不同的癥狀和體征。牙髓充血狀況持續(xù)時(shí)間較長后,轉(zhuǎn)化為急性牙髓炎癥。間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells,MSCs)來源于胚胎時(shí)期的中胚層組織,具有很強(qiáng)的自我復(fù)制和多向分化潛能,具有向脂肪細(xì)胞、成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞及肌細(xì)胞等多種終末細(xì)胞定向分化的能力,運(yùn)用 MSCs來修復(fù)軟骨損傷具有很好的應(yīng)用前景,目前已能夠從骨髓、脂肪、滑膜、骨骼、肌肉等組織以及羊水、臍帶、臍帶血中分離和制備間充質(zhì)干細(xì)胞。
方法簡介:
實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠牙髓干采用膠原酶消化法、低密度稀釋克隆制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠牙髓干經(jīng)CD90免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:基礎(chǔ)培養(yǎng)基,含FBS、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣
傳代特性:可傳3-5代左右
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
小鼠牙髓體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠(NO)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠β酚(β-Nph)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠補(bǔ)體蛋白3(C3)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠(AZT)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體2(VEGFR-2)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human mucin (ORM) ELISA Kit 人類粘蛋白(ORM)試劑盒
Humaibonuclease,RNASEELISAKit 人核糖核酸酶(RNASE)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Bacillusthuringiensis,BT試劑盒蘇云金芽孢桿菌蛋白(BT)試劑盒規(guī)格:96T/48T
A高效液相色譜法定量試劑盒20次
MouseInsulin-likegrowthfactorbindingprotein2,IGFBP-2ELISAKit小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2(IGFBP-2)試劑盒規(guī)格:96T/48T
CTDSPL蛋白抗體
蛋白激酶C相關(guān)激酶1抗體
FOLR1重組小鼠 FOLR1 / FR-alpha 蛋白 Protein
AMPK Beta1 (AMP-activated Protein Kinase beta-1 0.5mgAMPK Beta1 (AMP-activated Protein Kinase beta-1) 腺苷單0酸活化蛋白激酶β1抗原
FCGR2A重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 Arg, His 標(biāo)簽) Protein
CD44 Protein Human 重組人 CD44 蛋白
LILRA5 Protein Rat 重組大鼠 LILRA5 蛋白
半乳糖凝集素3(GAL3)重組蛋白 Recombinant Galectin 3 (GAL3)
CD44 Protein Human 重組人 CD44 蛋白
MFI2重組小鼠 MFI2 / CD228 / melanotransferrin 蛋白 Protein
SIRPG Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 SIRPG / SIRP gamma / CD172g 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
IL11重組人 IL11 / Interleukin 11 / IL-11 蛋白 Protein
小鼠牙髓干細(xì)胞大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)試劑盒 ,英文名: MCP-3/CCL7 ELISA Kit
Porcine acetylcholine (ACh) ELISA Kit 豬乙酰(ACh)試劑盒
ELISA 小鼠血管生成素-2(mouse Angiopoietin-2) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforLPAg(HumanLegionellapneumophilaaigen)ELISAKit人軍團(tuán)菌抗原
通用型CMV(CYTOMEGALOVIRUS)病毒定量PCR擴(kuò)增試劑盒20次
ELISAKitIL-1β雞白介素1β
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4、長期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長;
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行