小鼠心臟干細胞

商品屬性：

細胞簡介：

小鼠心臟干分離自心臟組織；心臟是脊椎動物身體中最重要的一個器官，主要功能是為血液流動提供壓力，把血液運行至身體各個部分。心臟由心肌構成，左心房、左心室、右心房、右心室四個腔組成。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開，故互不相通，心房與心室之間有瓣膜（房室瓣），這些瓣膜使血液只能由心房流入心室，而不能倒流。心臟的作用是推動血液流動，向器官、組織提供充足的血流量，以供應氧和各種營養(yǎng)物質，并帶走代謝的終產(chǎn)物（如二氧化碳、無機鹽、尿素和尿酸等），使細胞維持正常的代謝和功能。研究發(fā)現(xiàn)，心臟干細胞是一種多潛能細胞，具有再生和克隆能力，并可分化為心肌細胞、平滑肌細胞和血管內皮細胞。體內研究顯示，從心臟中分離出的心臟干細胞，經(jīng)體外簡單培養(yǎng)、增殖和標記后，移植到心肌梗死邊緣區(qū)域，心梗血流動力學和心室壁厚度較對照組明顯改善，心肌梗死邊緣區(qū)域發(fā)現(xiàn)有標記的心肌細胞、平滑肌細胞和內皮細胞。盡管其新生心肌細胞較小，但表達一些特殊肌蛋白如心臟肌球蛋白重鏈、α-肌動蛋白、α-輔肌動蛋白、連接蛋白等，證實了心臟干細胞對心肌梗死的修復作用。干細胞移植治療是目前心肌梗死和缺血性心臟病細胞重建的主要方法，成體干細胞中的c-kit陽性心臟干細胞因其來源于心臟，有定向心臟細胞系分化的趨勢，體內外可以分化成心肌細胞、血管內皮細胞和平滑肌細胞，同時自體移植不存在免疫排斥反應及倫理問題已經(jīng)成為目前研究的熱點。短期內獲得治療量的自體心臟干細胞是這一治療應用于臨床的關鍵所在。因此，研究一種新的分離培養(yǎng)方法可在短時期內獲得大量純度較高的自體c-kit陽性心臟干細胞成為目前干細胞領域研究的熱點問題之一。

原代細胞的培養(yǎng)條件：

　　一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

　　1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；

　　2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；

　　3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；

　　4、 胎牛血清濃度為10%-80%

　　5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

　　6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落，漂浮；

　　7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應將原代細胞換液；

　　8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時，應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

　　二、懸浮細胞培養(yǎng)

　　1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞；

　　2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行；

　　3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內，進行分瓶試驗；

　　4、長期培養(yǎng)時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；

　　5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；

　　6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠心臟干采用機械剪碎組織、膠原酶分次消化法結合差速貼壁、心臟干細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的小鼠心臟干經(jīng)c-kit免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 長梭形

傳代特性 可傳2-3代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

細胞傳代及凍存：

原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠髓過氧化物酶(MPO)試劑盒   96T/48T

小鼠酸性成纖維細胞生長因子1(aFGF-1)試劑盒   96T/48T

小鼠絲酸/蘇酸蛋酸酶（STK）試劑盒   96T/48T

小鼠水通道蛋白5(AQP-5)試劑盒   96T/48T

小鼠糖化白蛋白(GA)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat cyclic adenosine monophosphate (cAMP) ELISA Kit 大鼠環(huán)0酸腺苷(cAMP)試劑盒

Humahymus-leukemiaaigen,TLaELISAKit 人白血病抗原(TLa)試劑盒 96T/48T 進口分裝

ChikenPullorumDiseaes,PD試劑盒雞白痢抗體檢測(PD)試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細胞蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒-LEPTIN10/20次

Mouseeosinophilchemotacticfactor,ECFELISAKit小鼠嗜酸粒細胞趨化因子(ECF)試劑盒規(guī)格：96T/48T

alpha 1腎上腺素能受體A抗體

胞吞再循環(huán)相關銜接蛋白CENTB1抗體

BACE1重組人 BACE1 / ASP2 蛋白 (Fc 標簽) Protein

角蛋白2(KRT2)重組蛋白 Recombinant Keratin 2 (KRT2)

GAL重組人 Galanin / GAL 蛋白 (Fc 標簽) Protein

CHL1 Protein Human 重組人 CHL-1 蛋白

HA Protein H5N8 重組甲型流感 H5N8 (A/turkey/Ireland/1378/1983) 血凝素 (Hemagglutinin) 蛋白 His 標簽)

角蛋白2(KRT2)重組蛋白 Recombinant Keratin 2 (KRT2)

CHL1 Protein Human 重組人 CHL-1 蛋白

BACE1重組人 BACE1 / ASP2 蛋白 (Fc 標簽) Protein

HA Protein H5N8 重組甲型流感 H5N8 (A/turkey/Ireland/1378/1983) 血凝素 (Hemagglutinin) 蛋白 His 標簽)

GAL重組人 Galanin / GAL 蛋白 (Fc 標簽) Protein

小鼠心臟干細胞大鼠蛋白激酶Cγ(PKCγ)試劑盒 ，英文名： PKCγ ELISA Kit

N- acetyl - seryl - aspayl -- lysyl - proline (AcSDKP 人N-乙?；?span>-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯(AcSDKP

RatIerleukin15,IL-15ELISAKIT 大鼠白介素15(IL-15)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforCXCR1(HumanCXC-chemokinereceptor1)ELISAKit人CXC趨化因子受體1

細胞色素P450亞酶CYP3A1(BROD)活性熒光定量試劑盒20次

RatFactor-relatedApoptosisligand,FASLELISAKit大鼠凋亡相關因子配體(FASL)試劑盒規(guī)格：96T/48T