詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療!
產(chǎn)品名稱:小鼠髖臼軟骨細胞
組織來源:軟骨
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每3-4天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):梭形、多角形
傳代特性:可傳2-3代左右
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
小鼠髖臼軟骨體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞簡介:
小鼠髖臼軟骨分離自髖關(guān)節(jié)軟骨組織,髖關(guān)節(jié)是人體大、穩(wěn)定的關(guān)節(jié)之一,是典型的球臼關(guān)節(jié)。髖關(guān)節(jié)既具有良好的內(nèi)在穩(wěn)定性,也具有靈活的活動性。髖臼位于髖骨外側(cè)面中央,呈半球形深凹,直徑約30-50mm,表面覆蓋厚約2mm的透明關(guān)節(jié)軟骨,呈半月形分布。中央是髖臼窩,無軟骨覆蓋,由哈佛腺充填,可以隨關(guān)節(jié)內(nèi)壓力的增減擠出或者吸入關(guān)節(jié)液,以維持關(guān)節(jié)內(nèi)壓力的平衡。髖臼邊緣的環(huán)形關(guān)節(jié)盂唇可以加深、加寬髖臼,使髖臼容納股骨頭的大部并處于穩(wěn)定的位置,加強了髖關(guān)節(jié)的穩(wěn)定性。幼稚的關(guān)節(jié)軟骨細胞位于關(guān)節(jié)軟骨組織的表層,單個分布、體積較小、呈橢圓形,長軸與關(guān)節(jié)軟骨表面平行,越向深層的關(guān)節(jié)軟骨細胞體積之間增大呈圓形,細胞核圓形或卵圓形、染色淺,細胞質(zhì)弱嗜堿性,常見數(shù)量不一的脂滴。成熟的關(guān)節(jié)軟骨細胞多2-8個成群分布于關(guān)節(jié)軟骨陷窩內(nèi),這些關(guān)節(jié)軟骨細胞由同一個母細胞分裂增殖而成,稱為同源細胞群。電鏡下,關(guān)節(jié)軟骨細胞有突起和皺褶,細胞質(zhì)內(nèi)有大量的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和發(fā)達的高爾基復(fù)合體及少量的線粒體。在組織切片中,關(guān)節(jié)軟骨細胞收縮為不規(guī)則形,在軟骨囊和細胞之間出現(xiàn)較大的腔隙。體外培養(yǎng)的關(guān)節(jié)軟骨細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
方法簡介:
實驗室分離的小鼠髖臼軟骨采用膠原酶聯(lián)合消化制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實驗室分離的小鼠髖臼軟骨經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?cm皿中),培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
二、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
a)、對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,將細胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b)、對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
收到細胞如何處理?
1、首先,觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。⒓毎螒B(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至5ml;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品:
兔內(nèi)皮型合成酶(eNOS)ELISAKit ELISA
兔型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)ELISAKit ELISA
兔型纖溶酶原激活物(uPA)ELISAKit ELISA
兔超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISAKit ELISA
AF647標記的網(wǎng)格蛋白重鏈抗體
端粒結(jié)合蛋白2抗體
CD5L重組小鼠 CD5L / CD5 antigen-like 蛋白 Protein
Claudin-11 peptide 少突膠質(zhì)細胞跨膜蛋白抗原 0.5mgClaudin-11 peptide 少突膠質(zhì)細胞跨膜蛋白抗原
RELA重組人 RELA / Transcription factor p65 / NFkB p65 蛋白 (aa 1-306, GST 標簽) Protein
HIST3H2A Protein Human 重組人 HIST3H2A / Histone H2A 蛋白
VCAM1 Pr僀?僀
Claudin-11 peptide 少突膠質(zhì)細胞跨膜蛋白抗原 0.5mgClaudin-11 peptide 少突膠質(zhì)細胞跨膜蛋白抗原
HIST3H2A Protein Human 重組人 HIST3H2A / Histone H2A 蛋白
CD5L重組小鼠 CD5L / CD5 antigen-like 蛋白 Protein
VCAM1 Protein Mouse 重組小鼠 VCAM1 / CD106 蛋白 (His & Fc 標簽)
RELA重組人 RELA / Transcription factor p65 / NFkB p65 蛋白 (aa 1-306, GST 標簽) Protein
小鼠N端前腦素(-proBNP)ELISA pcr檢測試劑盒
Rat homocysteic acid (Hcy) ELISA Kit 大鼠同型半胱(Hcy)試劑盒
HumanEsadiol,E2ELISAKit 人雌二醇(E2)pcr檢測試劑盒分裝
humancolicin試劑盒人大腸菌素(colicin)試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織3-羥-3-甲戊二酰(HMG-COA)合成酶活性比色法定量試劑盒20次
HumaegeneratinggeneⅣ,REG-4ELISAKit人再生基因蛋白IV(REG-4)試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠髖臼軟骨細胞大鼠乳過氧化物酶(LPO)試劑盒 ,英文名: LPO ELISA Kit
Mouse angiotensin II (ANG- II) ELISA Kit 小鼠血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)試劑盒
RatInhibin,INH-AELISAKit 大鼠抑制素A(INH-A)pcr檢測試劑盒分裝
CLIAKitforGzms-BELISAKit大鼠顆粒酶B
細胞型肝病毒蛋白酶(HCVPROTEASE)活性熒光淬滅法定量試劑盒20次
Raturokinase,UKELISAKit大鼠(UK)試劑盒規(guī)格:96T/48T