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詳細(xì)介紹
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
外周血 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 圓形 | YS-01X7573 |
細(xì)胞簡介：
小鼠外周血單個核分離自外周血；外周血是除骨髓之外的血液，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中，再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞，我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞，在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。外周血單個核細(xì)胞（PBMC）即外周血中具有單個核的細(xì)胞，包括淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞。目前，主要的分離方法是密度梯度離心法，因為血液中各有形成分的比重存在差異，因此得以分離出不同的細(xì)胞。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂?。?/p>
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進行分瓶試驗；
4、長期培養(yǎng)時，淋巴細(xì)胞中要加入生長因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進行。
方法簡介：
公司實驗室分離的小鼠外周血單個核采用取外周血、通過密度梯度離心法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實驗室分離的小鼠外周血單個核經(jīng)過檢測，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 懸浮
細(xì)胞形態(tài) 圓形
傳代特性 不增殖；不傳代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
血管內(nèi)皮生長因子 A(VEGF-A) 作用： ELISA 規(guī)格： 96T 奧地利 Bender
血管內(nèi)皮生長因子 C(VEGF-C) 作用： ELISA 規(guī)格： 96T 奧地利 Bender
血管內(nèi)皮生長因子 D(VEGF-D) 作用： ELISA 規(guī)格： 96T 美國 R&D
血管內(nèi)皮生長因子受體 1(VEGF-R1) 作用： ELISA 規(guī)格： 96T 奧地利 Bender
小鼠抑制素B(INH-B)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human soluble Endoglin (ENG/sCD105) ELISA Kit 人可溶性Endoglin(ENG/sCD105)試劑盒
Humanα-Synuclein,α-SYNELISAKit 人α突觸核蛋白(α-SYN)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitfor6-K-PG(Human6-keto-prostaglandin)ELISAKit人6同前列腺素
飲類異檸檬酸比色法定量試劑盒20次
Mousemaixmetalloproteinase2/GelatinaseA,MMP-2ELISAKit小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/GelatinaseA)試劑盒規(guī)格：96T/48T
補體C3b抗體
SAPS結(jié)構(gòu)域家族3抗體
HA重組甲型流感 H15N8 (A/duck/AUS/341/1983) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
rHBsAg 重組乙肝病毒表面抗原 100ugrHBsAg 重組乙肝病毒表面抗原
ICOS重組人 ICOS / AILIM / CD278 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
CCL4 Protein Human 重組人 CCL4 / MIP1B 蛋白
HGFA Protein Human 重組人 HGFA 蛋白
rHBsAg 重組乙肝病毒表面抗原 100ugrHBsAg 重組乙肝病毒表面抗原
CCL4 Protein Human 重組人 CCL4 / MIP1B 蛋白
HA重組甲型流感 H15N8 (A/duck/AUS/341/1983) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
HGFA Protein Human 重組人 HGFA 蛋白
ICOS重組人 ICOS / AILIM / CD278 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
小鼠外周血單個核細(xì)胞大鼠淀粉樣前體蛋白(βAPP)試劑盒 ，英文名： βAPP ELISA Kit
Porcine myelin basic protein (MBP) ELISA Kit 豬髓0脂堿性蛋白(MBP)試劑盒
馬鈴薯特定基因序列(PATA)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforLTA(HumanlymphotoxinAlpha,LTA)ELISAKit人淋巴毒素α
通用96孔1塊
ELISAKitIrna雞免疫核糖核酸
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