詳細介紹
操作步驟:
1)使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
2)根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。
3)加入稀釋好后的標準品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
4)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
5)每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
6)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
7)每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
8)取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。
9)在450nm波長處測定各孔的OD值。
產(chǎn)品名稱 | HLE elisa試劑盒 |
英文名稱 | Human leukocyte exastase, HLE Elisa Kit |
規(guī)格 | 48T/96T |
試劑和樣本的控制方法:
一、試劑
1.試劑的選擇:國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴格把關(guān),我司嚴格按照進行,已獲得國家承認的“三證”,每一個產(chǎn)品都有對應(yīng)的批號,只要客戶提前下單,我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品,不必擔心會有過期的試劑。我司的試劑,值得您選擇。
2.試劑的準備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來,在室溫下放置20-30 min后,再進行測定,使試劑盒在使用前與室溫平衡,這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達到所需的溫度,以滿足后面的測定需求。
二、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素:包括類風濕因子、補體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等;
類風濕因子的控制方法:
①用F(ab)2替代完整的IgG;
②標本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理;
③檢測抗原時,可用加入到標本稀釋液中使RF降解;
補體的控制方法:
①用EDTA稀釋標本;
②56℃ 30 min加熱血清使C1q滅活;
2.外源性干擾因素:包括標本溶血、細菌污染、保存時間過長或凝固不全等;
控制方法:采血時規(guī)范操作,采集的血液勿用力震蕩,以防溶血;收集標本時采用無菌試管,經(jīng)檢測后再低溫凍存;保存時間不宜過久,檢測時盡量采用新鮮標本;對于凝固不全的血標本可適當加入抗凝劑,并放入37℃水中1 h,待充分凝固后再離心分離血清。
具有如下優(yōu)點:
一、高效、靈敏、特異的抗體;
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型;
五、性價比非常好,節(jié)省實驗經(jīng)費。
N-(酰氨基)亞氨基二二鈉鹽質(zhì)量規(guī)格:>98%ADAdisodiumsalt香菇Lentinulaedodes密蘇里游動放線菌Actinoplanesmissourieneis
人參皂苷Rb2(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品GinsenosideRb2松木正青霉EupenicilliumPinetorumHeLa全細胞裂解液
漆黃素訂購|咨詢規(guī)格:20mg艾滋病病毒p55抗體AROELISAKit芳香酶(ARO)ELISA試盒
*(標準品)質(zhì)量規(guī)格:>98%,標準品*大鼠直腸平滑肌細胞*培養(yǎng)基100mL
頭孢泊肟酯訂購|咨詢規(guī)格:100mg基質(zhì)金屬蛋白酶-16抗體
仙人掌訂購|咨詢規(guī)格:10g凋亡加強結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體FGF1ELISAKit性成纖維細胞生長因子(FGF1)ELISA試盒
香酚;Eugenol規(guī)格:0.5ml訂購|咨詢高鹽察氏瓊脂/高鹽察氏培養(yǎng)基/SaltCzapekDoxAgar用于霉菌和酵母菌的計數(shù)250克國產(chǎn)/進口
腺苷3’-單鈉鹽質(zhì)量規(guī)格:國進口Adenosine3'-monophosphatesodiumsaltNCI-H460(人肺細胞)5×106cells/瓶×2
頭孢氨芐質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR,一水合物CephalexinSK-N-MC(人神經(jīng)上皮瘤細胞)5×106cells/瓶×2
1-十三磺鈉[離子對色譜級]質(zhì)量規(guī)格:離子對色譜用試IPC-ALKS-13萬古霉素(改良月桂基鹽胰蛋白胨肉湯凍干配套試)規(guī)格:10支/盒用途:每支添加于100ml(022212)中配成MLST
3A分子篩(60-80目,氣相、液相色譜柱)質(zhì)量規(guī)格:60-80目,氣相、液相色譜柱Molecularsieves,3Å小鼠食管上皮細胞*培養(yǎng)基100mL
杠柳苷訂購|咨詢規(guī)格:20mg人ATP敏感的內(nèi)向整流通道10(KCNJ10)ELISA試盒人96T0.156-10ng/mL小鼠5-羥基吲哚(5-HIAA)ELISA試盒,英文名:5-HIAAELISAKit
魚藤素訂購|咨詢規(guī)格:HPLC≥98%;20mgGEM相互作用蛋白抗體CR1ELISAKit紅細胞補體受體1(CR1)ELISA試盒
卷柏(墊狀卷柏)訂購|咨詢規(guī)格:2g骨形態(tài)發(fā)生蛋白9抗體Pro-ANPELISAKit前心鈉肽(Pro-ANP)ELISA試盒
HLE elisa試劑盒WSTFFHOD3肽基脯異構(gòu)酶酶FKBP25抗體
Wnt8AHGFA Inhibitor 2肽基脯異構(gòu)酶酶FKBP8抗體
WNT2SECTM1化叉頭蛋白L2抗體
WNT4SPAG6叉頭蛋白N2抗體
Chitinase 3 like protein 3ARL4山羊β內(nèi)肽(β-EP)免疫試盒
CMTM2ARP2山羊α1性糖蛋白(α1-AGP)免疫試盒
CKLFSF2 isoform 1ARPC2山羊toll樣受體2(TLR2)免疫試盒
C18orf1ARPC4山羊M型肌激酶(CKM)免疫試盒
COX7A2ARSI山羊C型鈉尿肽(CNP)免疫試盒
CACNA1FART1山羊C反應(yīng)蛋白(CRP)免疫試盒
測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當時,即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實驗成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結(jié)果,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質(zhì) 量和軟件的算法。