人外周血巨噬細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：腫瘤/睪丸抗原65抗體 跨膜γ羧基酸蛋白2抗體 LS 174T [LS174T] (人結(jié)腸腺癌細(xì)胞) 大鼠胚胎成纖維細(xì)胞 HEC-1-B人子宮膜腺癌細(xì)胞 大鼠陰道上皮細(xì)胞 HFF-1 (人包皮成纖維細(xì)胞) 小鼠子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞

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產(chǎn)品名稱：人外周血巨噬細(xì)胞

組織來源：外周血

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基：含FBS、M-CSF、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：巨噬細(xì)胞樣

傳代特性：屬于終末分化細(xì)胞；屬于不增殖細(xì)胞群

消化液：（12mM）

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

人外周血巨噬體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

細(xì)胞簡介：

人外周血巨噬分離自外周血；外周血是除骨髓之外的血液，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中，再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞，我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞，在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。巨噬細(xì)胞屬免疫細(xì)胞，有多種功能，是研究細(xì)胞吞噬、細(xì)胞免疫和分子免疫學(xué)的重要對象。巨噬細(xì)胞較易獲得，便于培養(yǎng)，并可進(jìn)行純化。巨噬細(xì)胞屬不繁殖細(xì)胞群，在條件適宜下可生活2-3周，多用做原代培養(yǎng)，難以長期生存。巨噬細(xì)胞（Macrophages）是一種位于組織內(nèi)的白血球，源自單核細(xì)胞，而單核細(xì)胞又來源于骨髓中的前體細(xì)胞。巨噬細(xì)胞和單核細(xì)胞皆為吞噬細(xì)胞，在脊椎動物體內(nèi)參與非特異性防衛(wèi)（先天性免疫）和特異性防衛(wèi)（細(xì)胞免疫）。它們的主要功能是以固定細(xì)胞或游離細(xì)胞的形式對細(xì)胞殘片及病原體進(jìn)行噬菌作用（即吞噬以及消化），并激活淋巴球或其他免疫細(xì)胞，令其對病原體作出反應(yīng)。

方法簡介：

實驗室分離的人外周血巨噬采用取外周血、通過密度梯度離心法、差速貼壁、細(xì)胞因子誘導(dǎo)法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

實驗室分離的人外周血巨噬經(jīng)CD68免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)步驟：

一、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

二、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

a）、對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。

3.輕輕吹打細(xì)胞，脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。

b）、對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。

收到細(xì)胞如何處理？

1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。

2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。

4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。

5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。

6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細(xì)胞密度超過80%，可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作

公司正在出售的產(chǎn)品：

兔子組織多肽抗原(TPA)ELISAKit   ELISA. 

兔子組胺(HIS)ELISAKit   ELISA. 

兔子轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)ELISAKit   ELISA. 

兔子壞死因子α(TNF-α)ELISAKit   ELISA.

小鼠補體片斷5a(C5a)ELISA 試劑盒

Rat prostaglandin F2 alpha (PGF2 alpha) ELISA Kit 大鼠前列腺素F2α(PGF2α)試劑盒

HumanFMS-liketyrosinekinase3ligand,Flt-3LELISAKit 人FMS樣酪激酶3配體(Flt-3L)試劑盒 進(jìn)口分裝

Humanbonealkalinephosphatase,BALP試劑盒人骨堿性0酸酶(BALP)試劑盒

植物總淀粉生物酶比色法定量試劑盒20次

HumanSomelysin-1,ST1ELISAKit人基質(zhì)裂解素(ST1)試劑盒

MS4A15蛋白抗體

死亡效應(yīng)結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體

HFE2重組食蟹猴 Hemojuvelin / HFE2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

IL-15(Interleukin-15 0.5mgIL-15(Interleukin-15) 白細(xì)胞介素-15抗原

BLMH重組人 BLMH / BLM hydrolase 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

FUCA1 Protein Human 重組人 FUCA1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

PARP1 Protein Mouse 重組小鼠 PARP-1 / PARP 蛋白 (His 標(biāo)簽)

IL-15(Interleukin-15 0.5mgIL-15(Interleukin-15) 白細(xì)胞介素-15抗原

FUCA1 Protein Human 重組人 FUCA1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

HFE2重組食蟹猴 Hemojuvelin / HFE2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

PARP1 Protein Mouse 重組小鼠 PARP-1 / PARP 蛋白 (His 標(biāo)簽)

BLMH重組人 BLMH / BLM hydrolase 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

人外周血巨噬細(xì)胞大鼠阿黑皮素原(POMC)試劑盒 ，英文名： POMC ELISA Kit

Mouse compleme factor H (CFH) ELISA Kit 小鼠補體因子H(CFH)試劑盒

ELISA 小鼠肌肉生成抑制素(mouse Myostatin)  進(jìn)口分裝

CLIAKitforIL-1sRIELISAKit大鼠白介素1可溶性受體Ⅰ

通用型蠟質(zhì)芽孢桿菌(Bacilluscereus)試劑盒20次

ELISAKitTpP大鼠血栓前體蛋白