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          人氣管成纖維細(xì)胞

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            上海市

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          更新時間:2024-11-05 11:16:35瀏覽次數(shù):561

          聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
          貨號 YS-01X8302 主要用途 僅供科研研究實驗
          人氣管成纖維細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:EOMA小鼠血管內(nèi)皮瘤細(xì)胞 U266B1人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞 應(yīng)激誘導(dǎo)分泌蛋白1抗體 KiMA (人胚腎上皮細(xì)胞) TGFB1誘導(dǎo)抗凋亡因子1抗體 CHO-K1 (倉鼠卵巢細(xì)胞亞株) RNA聚合酶II結(jié)合蛋白3抗體 ZSWIM5蛋白抗體

          詳細(xì)介紹

          人氣管成纖維細(xì)胞

          人氣管成纖維細(xì)胞

          商品屬性:

          組織來源

          產(chǎn)品規(guī)格

          細(xì)胞形態(tài)

          貨號

          氣管

          5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

          成纖維細(xì)胞樣

          YS-01X8302

          細(xì)胞簡介:

          人氣管成纖維分離自氣管組織;氣管(Trachea),呼吸器官的一部分;為后壁略平的圓筒型管狀。上端平第六頸椎下緣,與環(huán)狀軟骨相連;向下至第四、五胸椎體(相當(dāng)胸骨角平面)交界處,分左、右主支氣管,分叉處稱為氣管杈。氣管主要由14-16個半環(huán)狀軟骨構(gòu)成,有彈性,軟骨為“C"字形的軟骨環(huán),缺口向后,各軟骨環(huán)以韌帶連接起來,環(huán)后方缺口處由平滑肌和致密結(jié)締組織連接,保持了持續(xù)張開狀態(tài)。管腔襯以粘膜,表面覆蓋纖毛上皮,粘膜分泌的粘液可粘附吸入空氣中的灰塵顆粒,纖毛不斷向咽部擺動將粘液與灰塵排出,以凈化吸入的氣體。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的支氣管成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。氣管成纖維細(xì)胞在生理條件下的主要功能包括:構(gòu)造和維持組織的正常形態(tài),合成和釋放細(xì)胞外基質(zhì)以及組織損傷后及時大量聚集修復(fù)損傷組織。

          方法簡介:

          實驗室分離的人氣管成纖維采用膠原酶 - 聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

          質(zhì)量檢測:

          實驗室分離的人氣管成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

          培養(yǎng)信息:

          培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

          換液頻率:每2-3天換液一次

          生長特性:貼壁

          細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣

          傳代特性:可傳3-5代左右

          消化液:0.25%

          培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%CO2,5%

          人氣管成纖維體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

          人氣管成纖維細(xì)胞

          細(xì)胞傳代及凍存:

          細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
          如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

          原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

            ① 組織塊培養(yǎng)法

            組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

           ?、?消化培養(yǎng)法

           ?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

            對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

            ④器官培養(yǎng)

            器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

          人氣管成纖維細(xì)胞


          公司正在出售的產(chǎn)品:

          兔組織因子   英文名稱:   Rabbit Tissue Factor   規(guī)格:      英文縮寫:   TF

          兔組織金屬蛋白酶抑制因子1   英文名稱:   Rabbit Tissue Inhibitor of Metalloproteinases 1   規(guī)格:      英文縮寫:   TIMP-1

          兔合酶   英文名稱:   Rabbit Total Niic Oxide Syhase   規(guī)格:      英文縮寫:   T-NOS

          γ干擾素   英文名稱:   Rabbit γ Ierferon   規(guī)格:      英文縮寫:   IFN-γ

          小鼠補(bǔ)體因子H(CFH)ELISA 試劑盒 96T/48T

          Human glycogen syhase kinase (GSK) ELISA Kit 人糖原合成酶激酶(GSK)試劑盒

          HumanAialNaiureticPeptide,ANPELISAKit 人心肽(ANP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

          HumanB-LymphocyteChemoatacta1,BLC-1試劑盒人B-淋巴細(xì)胞趨化因子1(BLC-1/CXCL13)試劑盒規(guī)格:96T/48T

          植物總淀粉化學(xué)比色法定量試劑盒20

          HumanSomelysin-2,ST2ELISAKit人基質(zhì)裂解素(ST2)試劑盒規(guī)格:96T/48T

          LIM結(jié)構(gòu)域結(jié)合蛋白3抗體

          /蘇蛋白激酶ATR抗體

          LAYN重組大鼠 Layilin / LAYN 蛋白 Protein

          CTGF (connective tissue growth factor 0.5mgCTGF (connective tissue growth factor) 結(jié)締組織生長因子(多肽抗原)

          CIB2重組人 CIB2 / KIP-2 蛋白 Protein

          FTL Protein Human 重組人 FTL / ferritin, light polypeptide 蛋白

          IL11RA Protein Mouse 重組小鼠 IL11RA / IL11Rα 蛋白

          CTGF (connective tissue growth factor 0.5mgCTGF (connective tissue growth factor) 結(jié)締組織生長因子(多肽抗原)

          FTL Protein Human 重組人 FTL / ferritin, light polypeptide 蛋白

          LAYN重組大鼠 Layilin / LAYN 蛋白 Protein

          IL11RA Protein Mouse 重組小鼠 IL11RA / IL11Rα 蛋白

          CIB2重組人 CIB2 / KIP-2 蛋白 Protein

          人氣管成纖維細(xì)胞大鼠艾杜糖酯酶(IDS)試劑盒 ,英文名: IDS ELISA Kit

          Mouse compleme fragme 3A (C3a) ELISA Kit 小鼠補(bǔ)體片斷3a(C3a)試劑盒

          ELISA 小鼠M-能受體結(jié)合力(mouse MCBC)  進(jìn)口分裝

          CLIAKitforIL-2(HumanIerleukin2)ELISAkit人白介素2

          通用型科薩基病毒A(CoxsackievirusA)定性試劑盒20

          ELISAKitTSP-1大鼠血小板反應(yīng)蛋白/敏感蛋白1

          原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

            一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

            1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

            2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;

            3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

            4、 胎牛血清濃度為10%-80%

            5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

            6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;

            7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;

            8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

            二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

            1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞;

            2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;

            3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗;

            4、長期培養(yǎng)時,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長;

            5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

            6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行


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