詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用,不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療!
產(chǎn)品名稱:豬骨骼肌衛(wèi)星細胞
組織來源:骨骼肌
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
包被條件:PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基:含FBS、馬血清、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):成纖維細胞樣
傳代特性:可傳3-5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
豬骨骼肌衛(wèi)星體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞簡介:
豬骨骼肌衛(wèi)星分離自四肢肌肉組織;骨骼肌又稱橫紋肌,肌肉中的一種,約占全身重量的40%。骨骼肌纖維為長柱形的多核細胞,肌膜的外面有基膜緊密貼附。屬于橫紋肌,橫紋肌還包括心肌與內(nèi)臟橫紋肌,其中骨骼肌主要分布于四肢。每塊肌肉都是具有一定形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能的器官,有豐富的血管、淋巴分布,在軀體神經(jīng)支配下收縮或舒張,進行隨意運動。肌肉可根據(jù)共形狀、大小、位置、起止點、纖維方向和作用等命名。依形態(tài)命名的如斜方肌、菱形肌、三角肌、梨狀肌等。骨骼肌細胞呈纖維狀,不分支,有明顯橫紋,核很多,且都位于細胞膜下方。肌細胞內(nèi)有許多沿細胞長軸平行排列的細絲狀肌原纖維。每一肌原纖維都有相間排列的明帶(Ⅰ帶)及暗帶(A帶)。明帶染色較淺,而暗帶染色較深。暗帶中間有一條較明亮的線稱H線。H線的中部有一M線。明帶中間,有一條較暗的線稱為Z線。兩個Z線之間的區(qū)段,叫做一個肌節(jié)。肌衛(wèi)星細胞指骨骼肌中除骨骼肌纖維(肌細胞)外的一種扁平、有突起的細胞。著于肌纖維(肌細胞)表面;當肌纖維(肌細胞)受損后,肌衛(wèi)星細胞可增殖分化,參與肌纖維(肌細胞)的修復,因此具有干細胞性質(zhì)。
方法簡介:
實驗室分離的豬骨骼肌衛(wèi)星采用-膠原酶混合消化法結(jié)合多次差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實驗室分離的豬骨骼肌衛(wèi)星經(jīng)Desmin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?cm皿中),培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
二、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
a)、對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,將細胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b)、對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
收到細胞如何處理?
1、首先,觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時與技術支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。⒓毎螒B(tài)、所用基礎培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù));建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至5ml;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠抗單核細胞抗體試劑盒 小鼠抗單核細胞抗體試劑盒 小鼠抗單核細胞抗體試劑盒,,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠抗單核細胞抗體試劑盒、小鼠抗單核細胞抗體eisa試劑盒
小鼠釋放激素試劑盒 小鼠釋放激素試劑盒 小鼠釋放激素試劑盒,,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠釋放激素試劑盒、小鼠釋放激素eisa試劑盒
小鼠促上腺皮質(zhì)激素試劑盒 小鼠促上腺皮質(zhì)激素試劑盒 小鼠促上腺皮質(zhì)激素試劑盒,,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠促上腺皮質(zhì)激素試劑盒、小鼠促上腺皮質(zhì)激素eisa試劑盒
小鼠促上皮質(zhì)激素釋放激素試劑盒 小鼠促上皮質(zhì)激素釋放激素試劑盒 小鼠促上皮質(zhì)激素釋放激素試劑盒,,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠促上皮質(zhì)激素釋放激素試劑盒、小鼠促上皮質(zhì)激素釋放激素eisa試劑盒
GATA2/GATA3抗體
富含亮重復蛋白8D抗體
CLEC4A3重組大鼠 CLEC4A3 蛋白 (Fc 標簽) Protein
DRD5 receptor(dopamine D5 receptor 0.5mgDRD5 receptor(dopamine D5 receptor) 多巴胺受體-D5抗原
VAPB重組人 VAPB / VAMP-associated protein B/C 蛋白 Protein
CTSZ Protein Human 重組人 CTSZ 蛋白
THY1 Protein Mouse 重組小鼠 CD90 / THY-1 蛋白
DRD5 receptor(dopamine D5 receptor 0.5mgDRD5 receptor(dopamine D5 receptor) 多巴胺受體-D5抗原
CTSZ Protein Human 重組人 CTSZ 蛋白
CLEC4A3重組大鼠 CLEC4A3 蛋白 (Fc 標簽) Protein
THY1 Protein Mouse 重組小鼠 CD90 / THY-1 蛋白
VAPB重組人 VAPB / VAMP-associated protein B/C 蛋白 Protein
小鼠免疫球蛋白G(IgG)ELISA pcr檢測試劑盒
Rat calcitonin gene related peptide (CGRP) ELISA Kit 大鼠降鈣素基因相關肽(CGRP)試劑盒
Humaneyemuscleaibody,EMAbELISAKit 人抗眼肌抗體(EMAb)pcr檢測試劑盒分裝
Humanacidsphingomyelinase,ASM試劑盒人酸性神經(jīng)鞘0脂酶(ASM)試劑盒規(guī)格:96T/48T
脂蛋白脂酶活性比色法定量試劑盒20次
Mouseai-alpha-FodrinIgG/IgA,α-FodrinIgG/IgAELISAKit小鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-FodrinIgG/IgA)試劑盒規(guī)格:96T/48T
豬骨骼肌衛(wèi)星細胞大鼠促黃體激素(LH)試劑盒 ,英文名: LH ELISA Kit
Mouse procollagen I carboxy terminal peptide (P I CP) ELISA Kit 小鼠Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)試劑盒
ELISA 小鼠環(huán)氧化酶-2 (mouse COX-2) 分裝
CLIAKitforLHPoulyELISAKitLH禽類酶聯(lián)免疫試劑盒
通用型HHV6-A(HUMANHERPESVIRUS6-A)病毒定量PCR擴增試劑盒20次
ELISAKitVEGFR-3血管內(nèi)皮細胞生長因子受體-3