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詳細(xì)介紹
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
子宮 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細(xì)胞樣 | YS-01X8549 |
細(xì)胞簡介：
小鼠子宮韌帶成纖維分離自子宮韌帶組織，子宮韌帶是子宮附件的一部分，其主要功能是固定子宮，子宮韌帶共包括4條韌帶，分別是：子宮主韌帶、子宮闊韌帶、子宮圓韌帶、和骶子宮韌帶。子宮主韌帶為子宮闊韌帶下部兩層腹膜之間的一些纖維結(jié)締組織束和平滑肌纖維，較強(qiáng)韌，將子宮頸陰道上部連于骨盆側(cè) 壁，它是維持子宮頸正常位置，防止其向下脫垂的主要結(jié)構(gòu)。骶子宮韌帶由平滑肌和結(jié)締組織構(gòu)成，起自子宮頸陰道上部后面，向后繞過直腸的兩側(cè)，止于骶骨前面。此韌帶表面蓋以腹膜，形成弧形皺襞為直腸子宮襞。此韌帶向后上牽引子宮頸，并與子宮圓韌帶共同維持子宮的前傾前屈位。子宮闊韌帶位于子宮兩側(cè)的雙層腹膜皺襞，呈翼狀，由覆蓋子宮前后壁的腹膜自子宮側(cè)緣向兩側(cè)延伸達(dá)盆壁而成，可限制子宮向兩側(cè)傾倒。闊韌帶分為前后兩葉，其上緣游離，內(nèi)2/3部包 裹輸卵管(傘部無腹膜遮蓋)，外l/3部移行為骨盆漏斗韌帶(infundibulopelvic ligament)或稱卵巢懸韌帶(suspensory ligament of ovary)，卵巢動靜脈由此穿行。在輸卵管以下、卵巢附著處以上的闊韌帶稱輸卵管系膜，其中有結(jié)締組織及中腎管遺跡。卵巢與闊韌帶后葉相接處稱卵巢系膜。卵巢內(nèi)側(cè)與宮角之間的闊韌帶稍增厚稱卵巢固有韌帶或卵巢韌帶。在宮體兩側(cè)的闊韌帶中有豐富的血管、神經(jīng)、淋巴管及大量疏松結(jié)締組織稱宮旁組織。子宮動靜脈和輸尿管均從闊韌帶 基底部穿過。子宮圓韌帶為一對長條狀圓索，由平滑肌和結(jié)締組織構(gòu)成。起于子宮外側(cè)緣，輸卵管子宮口的前下方。在子 宮闊韌帶前層覆蓋下，走向前外側(cè)，經(jīng)過腹股溝管，終止于陰阜及大上部之中。為維持子宮前傾位的主要結(jié)構(gòu)。
方法簡介：
實驗室分離的小鼠子宮韌帶成纖維采用 - 膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
實驗室分離的小鼠子宮韌帶成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：基礎(chǔ)培養(yǎng)基，含FBS、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣
傳代特性：可傳2-3代左右
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
小鼠子宮韌帶成纖維體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
腮腺病毒(MuV)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
麻風(fēng)桿菌(ML)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
普氏立克次體(RP)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
莫氏立克次體(RM)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
著絲粒蛋白L抗體
tinagl1抗體
NT5E重組大鼠 CD73 / NT5E 蛋白 Protein
DR5/TNFRSF10B/CD262 (Death receptor 5 0.5mgDR5/TNFRSF10B/CD262 (Death receptor 5) 細(xì)胞調(diào)亡素/死亡受體5抗原
PRDX6重組人 Peroxiredoxin 6 / PRDX6 蛋白 Protein
IL17RC Protein Human 重組人 IL17RC 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
GHR Protein Mouse 重組小鼠 Growth Hormone Re僀?僀
DR5/TNFRSF10B/CD262 (Death receptor 5 0.5mgDR5/TNFRSF10B/CD262 (Death receptor 5) 細(xì)胞調(diào)亡素/死亡受體5抗原
IL17RC Protein Human 重組人 IL17RC 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
NT5E重組大鼠 CD73 / NT5E 蛋白 Protein
GHR Protein Mouse 重組小鼠 Growth Hormone Receptor / GHR / P 蛋白
PRDX6重組人 Peroxiredoxin 6 / PRDX6 蛋白 Protein
豚鼠免疫球蛋白A(IgA)試劑盒 ，英文名： IgA ELISA Kit
Human hypoxia inducible factor 1 alpha (HIF-1 alpha) ELISA Kit 人低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)試劑盒
Monkeysolublevasccularcelladhesionmolecule1,sVCAM-1ELISAKit 猴可溶性血管細(xì)胞粘附分子1(sVCAM-1)pcr檢測試劑盒分裝
CLIAKitforBidELISAKit大鼠BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白
細(xì)菌檸檬酸利用試劑盒20次
rabbitLeptin,LEPELISAKit兔子瘦素(LEP)試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠子宮韌帶成纖維細(xì)胞小鼠銅藍(lán)蛋白(CP/CER)ELISA 試劑盒
Kappa B subunit p65 factor - nucleus of rat affinity peptide (NF- kappa B p65) ELISA Kit 大鼠核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)試劑盒
Humanserineprotease,PRSSELISAKit 人絲蛋白酶(PRSS)pcr檢測試劑盒分裝
ChickenSolubleIercellularAdhesionMolecule-1,sICAM-1試劑盒雞可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)試劑盒規(guī)格：96T/48T
載玻片細(xì)胞PI-3KINASEP110BETA蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MouseFcoagulationfactorⅨ,FⅨELISAKit小鼠Ⅸ(FⅨ)試劑盒規(guī)格：96T/48T
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂??；
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗；
4、長期培養(yǎng)時，淋巴細(xì)胞中要加入生長因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行
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