詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
心臟 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X8558 |
細胞簡介:
豬心臟微血管周分離自心臟組織;心臟是脊椎動物身體中重要的一個器官,主要功能是為血液流動提供壓力,把血液運行至身體各個部分。心臟由心肌構(gòu)成,左心房、左心室、右心房、右心室四個腔組成。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開,故互不相通,心房與心室之間有瓣膜(房室瓣),這些瓣膜使血液只能由心房流入心室,而不能倒流。心臟的作用是推動血液流動,向器官、組織提供充足的血流量,以供應氧和各種營養(yǎng)物質(zhì),并帶走代謝的終產(chǎn)物(如二氧化碳、無機鹽、尿素和尿酸等),使細胞維持正常的代謝和功能。心臟微血管內(nèi)皮細胞是組成心臟微血管腔面單層扁平上皮樣細胞,它所產(chǎn)生和分泌的生物活性物質(zhì)對維持血管張力、調(diào)節(jié)血壓、抗血栓形成等有重要作用,在心臟血管疾病的發(fā)病機制中有重要病理生理學意義。近年來大量研究表明,心肌微血管周細胞的功能和病理改變直接影響心肌細胞功能,也是諸多毒素、炎癥因子及病毒等重要靶位,其作為體外研究的細胞模型在心肌缺血 - 再灌注發(fā)病機制和細胞間旁分泌細胞生長因子研究中起著重要作用。
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
實驗室分離的豬心臟微血管周采用膠原酶消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實驗室分離的豬心臟微血管周經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件:PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基:基礎培養(yǎng)基,含FBS、EGF、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):成纖維細胞樣
傳代特性:可傳3-5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
豬心臟微血管周體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
豬Ⅲ型膠原試劑盒 豬Ⅲ型膠原試劑盒 豬Ⅲ型膠原試劑盒,,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:豬Ⅲ型膠原試劑盒、豬Ⅲ型膠原eisa試劑盒
植物B6試劑盒 植物B6試劑盒 植物B6試劑盒,,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:植物B6試劑盒、植物B6eisa試劑盒
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植物激素脫落酸試劑盒 植物激素脫落酸試劑盒 植物激素脫落酸試劑盒,,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:植物激素脫落酸試劑盒、植物激素脫落酸eisa試劑盒
Dab2相互作用蛋白抗體
干擾素誘導跨膜蛋白5抗體
CD226重組大鼠 CD226 / DNAM-1 蛋白 Protein
ECE1(Endothelin Converting Enzyme 1 0.5mgECE1(Endothelin Converting Enzyme 1) 內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶1抗原
CDC42BPB重組人 CDC42BPB 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
ALPI Protein Human 重組人 Alkaline Phosphatase / ALPI 蛋白
MSR1 Protein Mouse 重組小鼠 MSR1僀?僀
ECE1(Endothelin Converting Enzyme 1 0.5mgECE1(Endothelin Converting Enzyme 1) 內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶1抗原
ALPI Protein Human 重組人 Alkaline Phosphatase / ALPI 蛋白
CD226重組大鼠 CD226 / DNAM-1 蛋白 Protein
MSR1 Protein Mouse 重組小鼠 MSR1 / CD204 / SCARA1 蛋白 (His 標簽)
CDC42BPB重組人 CDC42BPB 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
豬促胃液素受體(GsaR)ELISA 試劑盒
Human alternative macrophage activation associated chemical factor 1 (AmAC-1) ELISA Kit 人巨噬細胞替代激活相關(guān)化學因子1(AmAC-1)試劑盒
PorcineD-Dimer,D2DELISAKit 豬D二聚體(D2D)試劑盒分裝
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血液0酸二酯酶3(PDE3)活性酶連續(xù)循環(huán)光譜法定量試劑盒10次
Mouseβmannosidase,βManaseELISAKit小鼠β甘露糖苷酶(βManase)試劑盒
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Rat adrenomedullin (ADM) ELISA Kit 大鼠腎上腺髓質(zhì)素(ADM)試劑盒
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HumanCaveolin-1,Cav-1試劑盒人窖蛋白(Cav-1)試劑盒
轉(zhuǎn)基因油菜(canola)T45品系試劑盒20次
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