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詳細(xì)介紹
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
脾臟 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 巨噬細(xì)胞樣 | YS-01X8521 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
小鼠脾臟單核分離自脾臟組織；脾臟是機(jī)體大的免疫器官，占全身淋巴組織總量的25%，含有大量的淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞，是機(jī)體細(xì)胞免疫和體液免疫的中心。位于左季肋區(qū)后外方肋弓深處，與9－11肋相對(duì)，長(zhǎng)軸與第10肋一致。膈面與膈肌和左肋膈竇相鄰，前方有胃，后方與左腎、左腎上腺毗鄰，下端與結(jié)腸脾溝相鄰，地柔軟的網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞器官。單核細(xì)胞（monocytes）是體積大的白細(xì)胞。其細(xì)胞核常偏位，呈多形性，如卵圓形、腎形(a)、馬蹄形(b)、不規(guī)則形（c）等，常有折疊感(c)；染色質(zhì)呈疏松網(wǎng)狀，著色較淺。胞質(zhì)較多，嗜堿性，但因含大量細(xì)小的嗜天青顆粒而染成灰藍(lán)色，顆粒含過氧化物酶。單核細(xì)胞是血液中大的血細(xì)胞。目前認(rèn)為它是巨噬細(xì)胞的前身，具有明顯的變形運(yùn)動(dòng)，能吞噬、清除受傷、衰老的細(xì)胞及其碎片。單核細(xì)胞還參與免疫反應(yīng)，在吞噬抗原后將所攜帶的抗原決定簇轉(zhuǎn)交給淋巴細(xì)胞，誘導(dǎo)淋巴細(xì)胞的特異性免性反應(yīng)。單核細(xì)胞也是對(duì)付細(xì)胞內(nèi)致病細(xì)菌和寄生蟲的主要細(xì)胞防衛(wèi)系統(tǒng)，還具有識(shí)別和殺傷腫瘤細(xì)胞的能力。淋巴細(xì)胞則為具有特異性免疫功能的細(xì)胞。T淋巴細(xì)胞主要參與細(xì)胞免疫反應(yīng)而B淋巴細(xì)胞參與體液免疫反應(yīng)。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂?。?/p>
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí)，淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長(zhǎng)；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
方法簡(jiǎn)介：
實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠脾臟單核采用密度梯度離心法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠脾臟單核經(jīng)CD14免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS、M-CSF、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性：半貼壁半懸浮
細(xì)胞形態(tài)：巨噬細(xì)胞樣
傳代特性：不增殖；不傳代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
小鼠脾臟單核體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
人周期素依賴性激酶5試劑盒 人周期素依賴性激酶5試劑盒 人周期素依賴性激酶5試劑盒，，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人周期素依賴性激酶5試劑盒、人周期素依賴性激酶5 試劑盒
人周期素依賴性激酶4試劑盒 人周期素依賴性激酶4試劑盒 人周期素依賴性激酶4試劑盒，，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人周期素依賴性激酶4試劑盒、人周期素依賴性激酶4 試劑盒
人周期素依賴性激酶2試劑盒 人周期素依賴性激酶2試劑盒 人周期素依賴性激酶2試劑盒，，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人周期素依賴性激酶2試劑盒、人周期素依賴性激酶2 試劑盒
人周期素依賴性激酶1試劑盒 人周期素依賴性激酶1試劑盒 人周期素依賴性激酶1試劑盒，，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人周期素依賴性激酶1試劑盒、人周期素依賴性激酶1 試劑盒
腫瘤血管內(nèi)皮標(biāo)志物/G蛋白偶聯(lián)受體124抗體
γ2肌動(dòng)蛋白抗體
IL23重組大鼠 IL-23 (IL23A & IL12B Heterodimer) 蛋白 Protein
CR (Calretinin 0.5mgCR (Calretinin) 鈣結(jié)合蛋白(抗原)
MME重組人 CD10 / Neprilysin / MME 蛋白 Protein
IL36G Protein Human 重組人 IL36G / IL1F9 蛋白
RTN4R Protein Mouse 重組小鼠 Nogo Receptor / NOGOR / RTN4R 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
CR (Calretinin 0.5mgCR (Calretinin) 鈣結(jié)合蛋白(抗原)
IL36G Protein Human 重組人 IL36G / IL1F9 蛋白
IL23重組大鼠 IL-23 (IL23A & IL12B Heterodimer) 蛋白 Protein
RTN4R Protein Mouse 重組小鼠 Nogo Receptor / NOGOR / RTN4R 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
MME重組人 CD10 / Neprilysin / MME 蛋白 Protein
豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)試劑盒 ，英文名： MCP-4/CCL13 ELISA Kit
Human dopamine decarboxylase (DDC) ELISA Kit 人多巴胺脫羧酶(DDC)試劑盒
rabbitC-ReactiveProtein,CRPELISAKit 兔子C反應(yīng)蛋白(CRP)pcr檢測(cè)試劑盒分裝
CLIAKitforBetaOHBELISAKit大鼠β
細(xì)菌脫氧膽酸鹽瓊脂平板50個(gè)
Rabbitinducibleniicoxidesyhase,iNOSELISAKit兔誘導(dǎo)型合成酶(iNOS)試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠脾臟單核細(xì)胞小鼠缺血修飾白蛋白(IMA)ELISA 試劑盒
Human urokinase (UK) ELISA Kit 人(UK)試劑盒
HumanoligomericproteinELISAKit 人寡聚蛋白(oligomeric)pcr檢測(cè)試劑盒分裝
GuineaPiglipidperoxlde,LPO試劑盒豚鼠過氧化脂質(zhì)/乳過氧化物酶(LPO)試劑盒規(guī)格：96T/48T
真菌/酵母細(xì)胞高質(zhì)化線粒體分離試劑盒10次
MouseBromodeoxyuridine,BrdUELISAKit小鼠溴脫氧核苷尿(BrdU)試劑盒規(guī)格：96T/48T
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