詳細(xì)介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
皮膚組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 不規(guī)則細(xì)胞 | YS-01X7311 |
細(xì)胞簡介:
大鼠皮膚肥大分離自皮膚組織;皮膚肥大細(xì)胞廣泛分布于皮膚微血管周圍,分泌多種細(xì)胞因子,參與免疫調(diào)節(jié)(T細(xì)胞、B細(xì)胞、APC細(xì)胞活化)。皮膚肥大細(xì)胞表達MHC分子、B7分子,具有APC功能。表達大量的IgE-Fc受體,釋放過敏介質(zhì)。具有弱吞噬功能,和血液的嗜堿粒細(xì)胞同樣,具有強嗜堿性顆粒的組織細(xì)胞。存在于血液中的這類顆粒,含有肝素、組織胺、5-羥色胺,由細(xì)胞崩解釋放出顆粒以及顆粒中的物質(zhì),可在組織內(nèi)引起速發(fā)型過敏反應(yīng)(炎癥)。由于在肥大細(xì)胞上結(jié)合的IgE抗體和抗原的接觸,使細(xì)胞多陷于崩壞。肥大細(xì)胞呈圓形或卵圓形,細(xì)胞核小,呈圓形或橢圓形,染色淺,位于細(xì)胞中央。細(xì)胞常成堆或單個分布于血管附近。細(xì)胞呈圓形或卵圓形,細(xì)胞質(zhì)中充滿大小一致、染成藍(lán)紫色的顆粒,均勻分布在核周圍。
方法簡介:
見說明
質(zhì)量檢測:
本公司生產(chǎn)的大鼠皮膚肥大采用膠原酶-混合消化法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10^5cells/瓶;經(jīng)MCG-35免疫熒光鑒定,純度可達85%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
DMEM[H]、FBS、Penicillin、Streptomycin等
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
人真核翻譯起始因子3a檢測試劑盒 人真核翻譯起始因子3a試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人真核翻譯起始因子3a試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:檢測試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:人真核翻譯起始因子3a試劑盒、人真核翻譯起始因子3a 檢測試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
人長效甲狀腺刺激素檢測試劑盒 人長效甲狀腺刺激素試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人長效甲狀腺刺激素試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:檢測試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:人長效甲狀腺刺激素試劑盒、人長效甲狀腺刺激素檢測試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
人粘膜相關(guān)上皮趨化因子檢測試劑盒 人粘膜相關(guān)上皮趨化因子試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人粘膜相關(guān)上皮趨化因子試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:檢測試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:人粘膜相關(guān)上皮趨化因子試劑盒、人粘膜相關(guān)上皮趨化因子檢測試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
人早老素2檢測試劑盒 人早老素2試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人早老素2試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:檢測試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:人早老素2試劑盒、人早老素2 檢測試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
豚鼠白介素5(IL5)檢測試劑盒 ,英文名: IL5 ELISA Kit
Human stem cell factor / mast cell growth factor (SCF/MGF) ELISA Kit 人干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長因子(SCF/MGF)檢測試劑盒
rabbitNeuron-specificenolase,NSEELISAKit 兔子神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforaZP(Humanai-zonapellucidaaibody,aZP)ELISAKit人抗透明帶抗體
線粒體超氧化物歧化酶(Mn/FeSOD)分離試劑盒50次
RabbitAi-SmoothMuscleAibody,ASMAELISAKit兔抗平滑肌抗體(ASMA)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T
亞鐵氧化酶抗體
PE標(biāo)記人/小鼠CD45R單克隆抗體
NA重組甲型流感 H3N2 神經(jīng)酶 (Neuraminidase / NA) (高活性) Protein
Proinsulin 胰島素原 0.5mgProinsulin 胰島素原
BAMBI重組人 BAMBI / NMA 蛋白 Protein
INSL4 Protein Human 重組人 INSL4 / EPIL 蛋白
TNFRSF21 Protein Human 重組人 DR6 / TNFRSF21 蛋白
Proinsulin 胰島素原 0.5mgProinsulin 胰島素原
INSL4 Protein Human 重組人 INSL4 / EPIL 蛋白
NA重組甲型流感 H3N2 神經(jīng)酶 (Neuraminidase / NA) (高活性) Protein
TNFRSF21 Protein Human 重組人 DR6 / TNFRSF21 蛋白
BAMBI重組人 BAMBI / NMA 蛋白 Protein
大鼠皮膚肥大細(xì)胞豬高鐵血紅蛋白(MHB)ELISA 試劑盒
Human tuberculosis aibody IgG (TB-Ab IgG) ELISA Kit 人結(jié)核菌桿抗體IgG(TB-Ab IgG)檢測試劑盒
PorcineHeatShockProtein90,HSP-90ELISAKit 豬熱休克蛋白90(HSP-90)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforAlpha-EP(HumanAlpha-Endomorphin)ELISAKit人α-內(nèi)肽
血液精(arginine)含量酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法定量檢測試劑盒20次
Phaseolusvulgarisagglinin,PHAELISAKit菜豆凝集素(PHA)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂浮;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長;
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進行。