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          大鼠肝動脈平滑肌細胞

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          更新時間:2024-10-29 10:01:07瀏覽次數(shù):122

          聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
          貨號 YS-01X7143 主要用途 僅供科研研究實驗
          大鼠肝動脈平滑肌細胞公司正在出售的產(chǎn)品:G蛋白偶聯(lián)受體183抗體 eIF5A2蛋白抗體 NDUFB4蛋白抗體 大鼠睪丸間質(zhì)細胞 小鼠胰島細胞 C166;小鼠血管內(nèi)皮細胞 MDA-kb2(人乳腺癌細胞)

          詳細介紹

          大鼠肝動脈平滑肌細胞

          大鼠肝動脈平滑肌細胞

          商品屬性:

          組織來源

          產(chǎn)品規(guī)格

          細胞形態(tài)

          貨號

          肝動脈組織

          5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

          成纖維細胞樣

          YS-01X7143

          細胞簡介:

          大鼠肝動脈平滑肌分離自肝動脈組織;在胚胎期,肝臟有3條動脈供血,分別來源于胃左動脈、腹腔動脈和腸系膜上動脈,這3條動脈分別的不同部位。出生后,一般保留一條動脈,大部分為起源于腹腔動脈的動脈,由其分出左、右肝動脈供應(yīng)左、右半肝。偶爾也可見起源于胃左動脈的動脈或起源于腸系膜上動脈的動脈。但也有2條動脈并存的情況,如起源于腹腔動脈和起源于胃左動脈(25%),起源于腹腔動脈和起源于腸系臘上動脈(10%),而起源于胃左動脈和起源于腸系膜上動脈的2條動脈同時存在的情況比較少見。此外,還有5%像胚胎期一樣,3條動脈同時存在。這種起源于腹腔動脈以外的肝動脈稱為迷走肝動脈,如果肝臟沒有起源于腹腔動脈的動脈供血時,此種異位起源的肝動脈稱替代動脈,如果在常見肝動脈類型外,還有一支這種異位起始的動脈的一部分血流,這種肝動脈稱副肝動脈。肝動脈平滑肌細胞是肝動脈的重要結(jié)構(gòu)細胞之一,在機體的正常生理過程中發(fā)揮著重要作用。肝動脈平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數(shù)細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網(wǎng)狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點。血管平滑肌細胞的加速生長潛能是血管疾病進展的關(guān)鍵因素,最新研究表明血管平滑肌細胞表達的ICAM-1VCAM-1能促進血管壁的炎癥反應(yīng),并且與血管疾病的發(fā)展及穩(wěn)定性有關(guān)。

          方法簡介:

          公司實驗室分離的大鼠肝動脈平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

          質(zhì)量檢測:

          公司實驗室分離的大鼠肝動脈平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

          培養(yǎng)信息:

          培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

          換液頻率 每2-3天換液一次

          生長特性 貼壁

          細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

          傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

          消化液 0.25%

          培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO25%

          大鼠肝動脈平滑肌細胞

          細胞傳代及凍存:

          細胞傳代步驟細胞凍存步驟
          如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

          原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

            ① 組織塊培養(yǎng)法

            組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

            ② 消化培養(yǎng)法

           ?、?懸浮細胞培養(yǎng)法

            對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

           ?、芷鞴倥囵B(yǎng)

            器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

          大鼠肝動脈平滑肌細胞


          公司正在出售的產(chǎn)品:

          小鼠細胞凋亡因子 (mouse Fas)   作用:   ELISA   規(guī)格:   96T   美國 R&D

          小鼠細胞凋亡因子配體 (mouse Fas-Ligand)   作用:   ELISA   規(guī)格:   96T   美國 R&D

          mouse Flt3 Ligand   作用:   ELISA   規(guī)格:   96T   美國 R&D

          小鼠粒細胞集落刺激因子 (mouse G-CSF)   作用:   ELISA   規(guī)格:   96T   美國 R&D

          小鼠B6(VB6)ELISA 試劑盒 96T/48T

          Rat bone morphogenetic protein 6 (BMP-6) ELISA Kit 大鼠骨形成蛋白6(BMP-6)試劑盒

          HumanCCAAT/enhancerbindingproteinbeta,C/EBPβELISAKit CCAAT增強子結(jié)合蛋白β(C/EBPβ)試劑盒 96T/48T 進口分裝

          ChickenLipopolysaccharides,LPS試劑盒雞脂多糖/內(nèi)毒素(LPS)試劑盒規(guī)格:96T/48T

          載玻片細胞MAPK蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20

          MouseGasoiestinalcancerMarker-CA199ELISAKit小鼠胃腸癌標志物CA199試劑盒規(guī)格:96T/48T

          自然殺傷激活受體相關(guān)蛋白DAP12重組兔單克隆

          補體因子H相關(guān)蛋白4抗體

          EGFR重組小鼠 EGFR / HER1 / ErbB1 蛋白 (Fc 標簽) Protein

          半乳糖凝集素9(GAL9)重組蛋白 Recombinant Galectin 9 (GAL9)

          LYZL2重組人 Lysozyme 2 / LYZL2 蛋白 Protein

          CDON Protein Human 重組人 CDON / CDO 蛋白

          IL2RA Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL2RA 蛋白

          Alpha-Synuclein 核突觸蛋白(抗原 0.5mgAlpha-Synuclein 核突觸蛋白(抗原)

          CDON Protein Human 重組人 CDON / CDO 蛋白

          LYPD3重組小鼠 C4.4A / LYPD3 蛋白 Protein

          ENPEP Protein Rat 重組大鼠 ENPEP / Aminopeptidase A 蛋白 (aa 41-945, His 標簽)

          NLK重組人 nemo-like kinase / NLK 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

          大鼠肝動脈平滑肌細胞小鼠內(nèi)毒素(ET)ELISA 試劑盒

          P Nixonn Ron (Prednisolone) ELISA Kit 人龍(Prednisolone)試劑盒

          Human26Sproteasome,26SPSMELISAKit 26S蛋白酶體(26SPSM)試劑盒 96T/48T 進口分裝

          HumanAbnormalprothrombin,APT試劑盒人異常原(APT)試劑盒規(guī)格:96T/48T

          正常女性人體肝組織微粒體組分(5毫克/毫升)500微升

          Mouseaidiuretichormone/vasopressin/argininevasopressin,ADH/VP/AVPELISAKit小鼠抗利尿激素/血管加壓素/精加壓素(ADH/VP/AVP)試劑盒規(guī)格:96T/48T

          原代細胞的培養(yǎng)條件:

            一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

            1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

            2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;

            3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

            4、 胎牛血清濃度為10%-80%

            5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

            6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂浮;

            7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細胞換液;

            8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

            二、懸浮細胞培養(yǎng)

            1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;

            2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;

            3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;

            4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;

            5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

            6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。


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