化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
睪丸組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7494 |
細胞簡介：
大鼠睪丸支持分離自睪丸；睪丸支持細胞又稱Sertoli細胞，在體內(nèi)呈不規(guī)則的高錐體形，細胞基部附著在基膜上，頂部伸至曲精小管腔面。它是生精細胞的支架，為其提供必需的營養(yǎng)物質(zhì)，能合成與分泌雄激素結合蛋白，為其提供高濃度的雄激素環(huán)境等，還具有構成血-睪屏障，形成睪丸內(nèi)微環(huán)境，調(diào)節(jié)發(fā)生等功能。睪丸支持細胞是睪丸的主要組成細胞，能分泌多種生長因子和免疫抑制因子，不僅可為提供營養(yǎng)支持和免疫保護，也能對其他細胞，如胰島和神經(jīng)細胞提供營養(yǎng)支持，而且當其與胰島或神經(jīng)細胞共移植時，也能夠為這些細胞提供免疫保護，提高植活率。因此，睪丸支持細胞在細胞移植中具有廣泛的應用前景。制備高活率的Sertoli不僅對Sertoli的基礎研究有重要價值，而且在發(fā)生等領域有重要意義。
原代細胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落，漂?。?/p>
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時，應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進行分瓶試驗；
4、長期培養(yǎng)時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介：
公司實驗室分離的大鼠睪丸支持采用膠原酶消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實驗室分離的大鼠睪丸支持經(jīng)Fas-L免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
植物血球凝集素M 10mg
PHA-M 25mg
吩嗪甲酯 1g
PhenMethosulfate 5g
豬B細胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA 試劑盒
Human ai monocyte aibody (AMA) ELISA Kit 人抗單核細胞抗體(AMA)試劑盒
Porcinetelomerase,TEELISAKit 豬端粒酶(TE)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforAGPA/PCA(Humanai-gasicparietalcellaibody)ELISAKit人抗胃壁細胞抗體
血液人類巨細胞病毒蛋白酶(HCMVPROTEASE)活性熒光淬滅法定量試劑盒20次
Mouseansforminggrowthfactorβ2,TGFβ2ELISAKit小鼠轉化生長因子β2(TGFβ2)試劑盒
1號染色體開放閱讀框130抗體
單羧酸轉運蛋白5抗體
IL13RA1重組大鼠 IL13RA1 蛋白 Protein
Ghrelin 28 腦腸肽28 0.5mgGhrelin 28 腦腸肽28
FCGR2B重組人 CD32b / FCGR2B 蛋白 (His & AVI 標簽), Biotinylated Protein
AGER Protein Human 重組人 AGER / RAGE 蛋白 (His 標簽)
CXADR Protein Mouse 重組小鼠 CXADR 蛋白 (His 標簽)
Ghrelin 28 腦腸肽28 0.5mgGhrelin 28 腦腸肽28
AGER Protein Human 重組人 AGER / RAGE 蛋白 (His 標簽)
IL13RA1重組大鼠 IL13RA1 蛋白 Protein
CXADR Protein Mouse 重組小鼠 CXADR 蛋白 (His 標簽)
FCGR2B重組人 CD32b / FCGR2B 蛋白 (His & AVI 標簽), Biotinylated Protein
大鼠睪丸支持細胞小鼠可溶性Endoglin(ENG/sCD105)ELISA 試劑盒
Rat ai IgE receptor aibody ELISA Kit 大鼠抗IgE受體抗體試劑盒
Humanfetalhemoglobin,HBFELISAKit 人胎兒血紅蛋白(HBF)試劑盒 進口分裝
Humanalpha-fetoproteinLensculinarisaggliin2,AFP-L2試劑盒人小扁結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體2(AFP-L2)試劑盒
植物氨含量熒光定量試劑盒20次
Mouse16-αHydroxyesogen1,16-αOHE-1ELISAKit小鼠16α羥基雌同1(16-αOHE-1)試劑盒
化工儀器網(wǎng)