詳細(xì)介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
膀胱組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細(xì)胞樣 | YS-01X7229 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
大鼠膀胱上皮分離自膀胱組織;膀胱是一個(gè)儲(chǔ)尿器官,在哺乳類動(dòng)物,它是由平滑肌組成的一個(gè)囊形結(jié)構(gòu),位于骨盆內(nèi),其后端開口與尿道相通。膀胱與尿道的交界處有括約肌,可以控制尿液的排出。膀胱壁由三層組織組成,由內(nèi)向外為黏膜層、肌層和外膜。肌層由平滑肌纖維構(gòu)成,稱為逼尿肌,逼尿肌收縮,可使膀胱內(nèi)壓升高,壓迫尿液由尿道排出。在膀胱與尿道交界處有較厚的環(huán)形肌,形成尿道內(nèi)括約肌。在括約肌收縮能關(guān)閉尿道內(nèi)口,防止尿液自膀胱漏出。膀胱壁分為三層:即漿膜層(蜂窩脂肪組織)、肌肉層(逼尿肌、膀胱三角區(qū)?。┖宛つ樱O薄的一層移行上皮組織)。其主要作用有:①組成過濾屏障內(nèi)壁的重要部分;②在炎癥和致血栓物質(zhì)的刺激合成必要的生物活性分子;③受損后影響系膜細(xì)胞和上皮細(xì)胞,進(jìn)而影響腎臟病變。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠膀胱移行上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠膀胱移行上皮經(jīng)Cytokeratin-AE1/AE3免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
中文名稱 方法 規(guī)格
人多聚ADP核糖聚合酶(PARP)ELISAKit ELISA.
人葡萄糖激酶(GCK)ELISAKit ELISA.
人單胺氧化酶(MAO)ELISAKit ELISA.
豬白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA 試劑盒
Human ai Ku aibody (ai-Ku-Ab) ELISA Kit 人抗Ku抗體(ai-Ku-Ab)試劑盒
PorcineCollageypeⅢ,ColⅢELISAKit 豬Ⅲ型膠原(ColⅢ)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforAlb白蛋白(夾心法一步法)
血液型纖維蛋白溶酶原激活劑(uPA)活性比色法定量試劑盒20次
MouseVascularEndothelialcellGrowthFactor,VEGFELISAKit小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)試劑盒
Pacific Blue標(biāo)記小鼠NK1.1單克隆抗體
跨膜蛋白109抗體
IL13RA1重組小鼠 IL-13Ra1 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
CFTR(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator 0.5mgCFTR(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator) 囊性纖維化跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)調(diào)節(jié)因子抗原
CAT重組人 CAT / Catalase 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
AKR1A1 Protein Human 重組人 AKR1A1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
GHR Protein Mouse 重組小鼠 Growth Hormone Receptor / GHR / P 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
CFTR(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator 0.5mgCFTR(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator) 囊性纖維化跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)調(diào)節(jié)因子抗原
AKR1A1 Protein Human 重組人 AKR1A1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
IL13RA1重組小鼠 IL-13Ra1 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
GHR Protein Mouse 重組小鼠 Growth Hormone Receptor / GHR / P 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
CAT重組人 CAT / Catalase 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
大鼠膀胱移行上皮細(xì)胞兔子血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA 試劑盒
Rat angiopoietin 4 (ANG-4) ELISA Kit 大鼠血管生成素4(ANG-4)試劑盒
Humahyroglobulin,TGELISAKit 人甲狀腺球蛋白(TG)試劑盒 進(jìn)口分裝
HumanCytotoxin-associatedprotein,CagA試劑盒人細(xì)胞毒素相關(guān)蛋白A(CagA)試劑盒
組織IKKβ激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
Humanplasminogenactivatorinhibitor,PAIELISAKit人纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)試劑盒
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng);
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。