化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
肺動(dòng)脈 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 內(nèi)皮細(xì)胞樣 | YS-01X7844 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
兔肺動(dòng)脈內(nèi)皮分離自肺動(dòng)脈組織；肺動(dòng)脈亦稱肺動(dòng)脈干。在呼吸空氣的脊椎動(dòng)物中，把靜脈血由心臟導(dǎo)向肺臟的動(dòng)脈。肺動(dòng)脈起于右心室，在主動(dòng)脈之前向左上后方斜行。細(xì)胞呈單層多角形鋪路石狀分布；該細(xì)胞在維持血管內(nèi)外的動(dòng)態(tài)平衡、合成和分泌細(xì)胞因子和介質(zhì)、維持凝血和纖溶的動(dòng)態(tài)平衡中起重要作用。肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞呈單層多角形鋪路石狀分布，該細(xì)胞在維持血管內(nèi)外的動(dòng)態(tài)平衡、合成和分泌細(xì)胞因子和介質(zhì)、維持凝血和纖溶的動(dòng)態(tài)平衡中起重要作用。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂浮；
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí)，淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長(zhǎng)；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
方法簡(jiǎn)介：
實(shí)驗(yàn)室分離的兔肺動(dòng)脈內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
實(shí)驗(yàn)室分離的兔肺動(dòng)脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
包被條件：PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基：含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性：可傳2-3代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔肺動(dòng)脈內(nèi)體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠核因子κB受體活化因子配基試劑盒 小鼠核因子κB受體活化因子配基試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 小鼠核因子κB受體活化因子配基試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠核因子κB受體活化因子配基試劑盒、小鼠核因子κB受體活化因子配基eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。
小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體試劑盒 小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體試劑盒、小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。
小鼠過氧化物酶體增殖物激活受體試劑盒 小鼠過氧化物酶體增殖物激活受體試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 小鼠過氧化物酶體增殖物激活受體試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠過氧化物酶體增殖物激活受體試劑盒、小鼠過氧化物酶體增殖物激活受體eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。
小鼠甲種胎兒球蛋白試劑盒 小鼠甲種胎兒球蛋白試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 小鼠甲種胎兒球蛋白試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠甲種胎兒球蛋白試劑盒、小鼠甲種胎兒球蛋白eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。
小鼠抗中性粒/中心體抗體(ACA)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat ai thyroid stimulating hormone receptor aibody (Ab) ELISA Kit 大鼠抗促甲狀腺素受體抗體(Ab)試劑盒
Humancytokeratinfragmeaigen21-1,CYFRA21-1ELISAKit 人細(xì)胞角蛋白21-1片段(CYFRA21-1)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanAlternativemacrophageactivation-associatedCCchemokine1,AmAC-1試劑盒人巨噬細(xì)胞替代激活相關(guān)化學(xué)因子1(AmAC-1)試劑盒規(guī)格：96T/48T
植物超氧化物歧化酶(SOD)亞型制備試劑盒50次
MonkeyIerleukin6,IL-6ELISAKit猴白介素6(IL-6)試劑盒規(guī)格：96T/48T
G蛋白偶聯(lián)受體GPR89A蛋白抗體
肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白Girdin抗體
IL17RA重組小鼠 IL17RA / IL17R / CD217 蛋白 Protein
AGEs control article(advanced glycosylation end products control article 50mgAGEs control article(advanced glycosylation end products control article) 晚期糖基化終末產(chǎn)物蛋白對(duì)照品
NT5C3A重組人 NT5C3 蛋白 Protein
DMP1 Protein Human 重組人 DMP1 蛋白
TNFRSF11A Protein Rat 重組大鼠 TNFRSF11A 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
AGEs control article(advanced glycosylation end products control article 50mgAGEs control article(advanced glycosylation end products control article) 晚期糖基化終末產(chǎn)物蛋白對(duì)照品
DMP1 Protein Human 重組人 DMP1 蛋白
IL17RA重組小鼠 IL17RA / IL17R / CD217 蛋白 Protein
TNFRSF11A Protein Rat 重組大鼠 TNFRSF11A 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
NT5C3A重組人 NT5C3 蛋白 Protein
兔肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞大鼠內(nèi)皮素1(EDN1)試劑盒 ，英文名： EDN1 ELISA Kit
Mouse nicotinamide adenine dinucleotide phosphate (NADPH) ELISA Kit 小鼠腺嘌呤二核苷酸0酸(NADPH)試劑盒
RatGlycogenphosphorylaseII,GP-IIELISAKit 大鼠糖原0酸化酶同工酶II(GP-II)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforGIPELISAKit大鼠葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽
細(xì)胞脯氨酰肽酶(prolinase)比色法定量試劑盒20次
RatsolubleP-selectin,sP-selectinELISAKit大鼠可溶性P選擇素(sP-selectin)試劑盒規(guī)格：96T/48T
化工儀器網(wǎng)