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          兔肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞

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          • 兔肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞

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          更新時(shí)間:2024-10-31 12:58:53瀏覽次數(shù):71

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          產(chǎn)品簡(jiǎn)介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
          貨號(hào) YS-01X7754 主要用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
          兔肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:脊柱側(cè)后凸畸形肽酶抗體 線粒體外膜蛋白TOM5抗體 SAMSN1蛋白抗體 兔睪丸間質(zhì)細(xì)胞 人乳腺癌血管周細(xì)胞 OVMANA人卵巢癌細(xì)胞 WISH (人羊膜細(xì)胞) (Hela污染細(xì)胞系)

          詳細(xì)介紹

          兔肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞

          兔肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞

          商品屬性:

          組織來(lái)源

          產(chǎn)品規(guī)格

          細(xì)胞形態(tài)

          貨號(hào)

          肺動(dòng)脈

          5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

          成纖維細(xì)胞樣

          YS-01X7754

          細(xì)胞簡(jiǎn)介:

          兔肺動(dòng)脈平滑肌分離自肺動(dòng)脈組織;肺動(dòng)脈亦稱(chēng)肺動(dòng)脈干。在呼吸空氣的脊椎動(dòng)物中,把靜脈血由心臟導(dǎo)向肺臟的動(dòng)脈。肺動(dòng)脈起于右心室,在主動(dòng)脈之前向左上后方斜行,在主動(dòng)脈弓下方分為左、右肺動(dòng)脈,經(jīng)肺門(mén)入肺。肺動(dòng)脈干位于心包內(nèi),為一粗短的動(dòng)脈干。起自右心室,在升主動(dòng)脈前方向左后上方斜行,至主動(dòng)脈弓下方分為左、右肺動(dòng)脈。左肺動(dòng)脈較短,在左主支氣管前方橫行,分二支進(jìn)入左肺上、下葉。右肺動(dòng)脈較長(zhǎng)而粗,經(jīng)升主動(dòng)脈和上腔靜脈后方向右橫行,至右肺門(mén)處分為三支進(jìn)入右肺上、中、下葉。肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞是肺血管的重要結(jié)構(gòu)細(xì)胞之一,在調(diào)控肺血管的收縮和舒張功能中有重要作用。肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見(jiàn)細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng),高低起伏;細(xì)胞密度低時(shí),常交織成網(wǎng)狀;密度高時(shí),則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn)。肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的異常是肺動(dòng)脈高壓發(fā)生發(fā)展的重要病理學(xué)特征,其凋亡和增殖失衡是肺血管重塑的關(guān)鍵。研究表明,急性和慢性缺氧均可導(dǎo)致肺動(dòng)脈高壓,即缺氧性肺動(dòng)脈高壓,推斷缺氧可能是通過(guò)促進(jìn)肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的增殖而參與缺氧性肺動(dòng)脈高壓的發(fā)生發(fā)展。肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞主要功能:①細(xì)胞表面表達(dá)介質(zhì)(ICAM-1VCAM-1)參與血管壁炎癥反應(yīng);②是多數(shù)重要?jiǎng)用}疾病的靶細(xì)胞。肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞與主要病生理變化:①平滑肌增生易致肺動(dòng)脈高壓;②先天性肺動(dòng)脈狹窄;③肺動(dòng)脈栓塞。

          方法簡(jiǎn)介:

          實(shí)驗(yàn)室分離的兔肺動(dòng)脈平滑肌采用 - 膠原酶聯(lián)合消化法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

          質(zhì)量檢測(cè):

          實(shí)驗(yàn)室分離的兔肺動(dòng)脈平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

          培養(yǎng)信息:

          培養(yǎng)基:含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin

          換液頻率:每2-3天換液一次

          生長(zhǎng)特性:貼壁

          細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣

          傳代特性:可傳3代左右

          消化液:0.25%

          培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO25%

          兔肺動(dòng)脈平滑肌體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專(zhuān)用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。

          兔肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞

          細(xì)胞傳代及凍存:

          細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
          如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

          原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

            ① 組織塊培養(yǎng)法

            組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

           ?、?消化培養(yǎng)法

            ③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

            對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

           ?、芷鞴倥囵B(yǎng)

            器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

          兔肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞


          公司正在出售的產(chǎn)品:

          酸性酯酶染液   Eosinstain

          中性酯酶染液   H-E dye

          堿性酯酶染液   Wright'dye

          雙重酯酶染液   Wright - Giemsa dye composite

          豚鼠組胺(HIS)ELISA 試劑盒 96T/48T

          Human gasic mucin (GM) ELISA Kit 人胃粘液素(GM)試劑盒

          Humaotalprostatespecificaigen,tPSAELISAKit 人總前列腺特異抗原(tPSA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

          HumanCreatineKinase,CK試劑盒人肌酸激酶(CK)試劑盒規(guī)格:96T/48T

          組織DNA損傷彗星熒光試劑盒20

          Humanprostatespecificaigen,PSAELISAKit人前列腺特異性抗原(PSA)試劑盒規(guī)格:96T/48T

          G蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子7抗體

          肌切蛋白抗體

          IL10RB重組小鼠 IL10RB / IL10R2 蛋白 Protein

          EGF樣域蛋白7(EGFL7)重組蛋白 Recombinant EGF Like Domain Protein, Multiple 7 (EGFL7)

          MSLN重組人 MSLN / Mesothelin 蛋白 Protein

          IFNL3 Protein Human 重組人 IFNL3 / IL28B / Interleukin-28B 蛋白

          IL6ST Protein Rat 重組大鼠 gp130 / IL6ST / CD130 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

          EGF樣域蛋白7(EGFL7)重組蛋白 Recombinant EGF Like Domain Protein, Multiple 7 (EGFL7)

          IFNL3 Protein Human 重組人 IFNL3 / IL28B / Interleukin-28B 蛋白

          IL10RB重組小鼠 IL10RB / IL10R2 蛋白 Protein

          IL6ST Protein Rat 重組大鼠 gp130 / IL6ST / CD130 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

          MSLN重組人 MSLN / Mesothelin 蛋白 Protein

          兔肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞大鼠內(nèi)凝集蛋白1(ITLN1)試劑盒 ,英文名: ITLN1 ELISA Kit

          Monkey soluble vascular cell adhesion molecule 1 (sVCAM-1) ELISA Kit 猴可溶性血管細(xì)胞粘附分子1(sVCAM-1)試劑盒

          RatGlucose-dependeinsulin-releasingpolypeptide,GIPELISAKit 大鼠葡萄糖依賴(lài)性胰島素釋放多肽(GIP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

          CLIAKitforGHRP-Ghrelin(Mousegrowthhormonereleasingpeptide-Ghrelin)ELISAKit小鼠生長(zhǎng)激素釋放肽ghrelin

          細(xì)胞含量比色法定量試劑盒20

          RatSolubleprotein-100B,S-100BELISAKit大鼠S100B蛋白(S-100B)試劑盒規(guī)格:96T/48T

          原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

            一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

            1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

            2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;

            3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

            4、 胎牛血清濃度為10%-80%

            5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

            6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;

            7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;

            8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

            二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

            1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;

            2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;

            3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);

            4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng);

            5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

            6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。



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