兔肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：致死因子惡性腦瘤樣蛋白1抗體 突觸融合蛋白結(jié)合蛋白5抗體 SAPS結(jié)構(gòu)域家族2抗體 兔骨骼肌成纖維細(xì)胞 人乳腺癌成纖維細(xì)胞 OVK18人卵巢癌細(xì)胞 VCaP (人前列腺癌細(xì)胞)

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產(chǎn)品名稱：兔肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞

組織來源：肺組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

細(xì)胞簡介：

兔肺微血管內(nèi)皮分離自肺組織；肺是機(jī)體的呼吸器官，位于胸腔，左右各一，覆蓋于心之上。肺有分葉，左二右三，共五葉。肺經(jīng)肺系（指氣管、支氣管等）與喉、鼻相連，故稱喉為肺之門戶，鼻為肺之外竅。微血管內(nèi)皮細(xì)胞密切參與包括再生、發(fā)育、傷口愈合等一系列生理及炎癥反應(yīng)。細(xì)胞呈梭形或多角形，形成單層后呈鵝卵石樣或鋪路石樣排列。肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞構(gòu)成半選擇性屏障，該屏障對于肺氣體交換，調(diào)節(jié)液體和可溶物在血液與肺間質(zhì)之間的流動具有重要意義。

方法簡介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔肺微血管內(nèi)皮采用組織貼塊法并結(jié)合內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔肺微血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)步驟：

一、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

二、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

a）、對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。

3.輕輕吹打細(xì)胞，脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。

b）、對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。

收到細(xì)胞如何處理？

1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。

2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。

4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。

5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。

6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細(xì)胞密度超過80%，可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作

公司正在出售的產(chǎn)品：

鼠疫桿菌(YP)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

鼠疫桿菌(YP)核酸試劑盒   48T

腦膜奈瑟菌通用型(NM-U)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

腦膜奈瑟菌通用型(NM-U)核酸試劑盒   48T

豚鼠(NO)試劑盒 ，英文名： NO ELISA Kit

Human protein phosphatase (PP) ELISA Kit 人蛋酸酶(PP)試劑盒

Monkeyendotoxin,ETELISAKit內(nèi)毒素(ET)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforBMP-2(MouseBonemorphogeneticprotein2)ELISAKit小鼠骨成型蛋白2

細(xì)菌膜性囊泡(RSOV和IOV)制備試劑盒20次

Rabbitmaixmetalloproteinase3,MMP-3ELISAKit兔子基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)試劑盒規(guī)格：96T/48T

HRASLS5蛋白抗體

肌細(xì)胞增強(qiáng)因子2B抗體

ERBB3重組大鼠 HER3 / ErbB3 蛋白 Protein

GDF8/MSTN(growth differntiation factor 8 0.1mgGDF8/MSTN(growth differntiation factor 8) 重組生長分化因子8/肌肉抑制素

MUC1重組人 Mucin-1 / MUC-1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)(Fc 標(biāo)簽) Protein

IgG3 Protein Human 重組人 IgG3-Fc / IGHG3 蛋白

SERPINA10 Protein Mouse 重組小鼠 SerpinA10 / ZPI 蛋白

GDF8/MSTN(growth differntiation factor 8 0.1mgGDF8/MSTN(growth differntiation factor 8) 重組生長分化因子8/肌肉抑制素

IgG3 Protein Human 重組人 IgG3-Fc / IGHG3 蛋白

ERBB3重組大鼠 HER3 / ErbB3 蛋白 Protein

SERPINA10 Protein Mouse 重組小鼠 SerpinA10 / ZPI 蛋白

MUC1重組人 Mucin-1 / MUC-1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)(Fc 標(biāo)簽) Protein

兔肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞大鼠腦啡肽酶(NEP)試劑盒 ，英文名： NEP ELISA Kit

Monkey insulin (INS) ELISA Kit 猴胰島素(INS)試劑盒

Ratlipoproteinlipase,LPLELISAKit 大鼠脂蛋白脂酶(LPL)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforGHRP-GhrelinELISAKit大鼠生長激素釋放肽ghrelin

細(xì)胞輔脂酶(COLIPASE)活性比色法定量試劑盒20次

Ratsolubleplateletendothelialcelladhesionmolecule1,sPECAM-1ELISAKit大鼠可溶性血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)試劑盒規(guī)格：96T/48T