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本網(wǎng)站銷(xiāo)售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療！
產(chǎn)品名稱(chēng)：小鼠椎間盤(pán)髓核細(xì)胞
組織來(lái)源：椎間盤(pán)組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每3-4天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳3-5代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
小鼠椎間盤(pán)髓核分離椎間盤(pán)組織；椎間盤(pán)是位于脊柱兩椎體之間，分為中央部的髓核，富于彈性的膠狀物質(zhì)；周?chē)康睦w維環(huán)，由多層纖維軟骨環(huán)按同心圓排列。上下有軟骨板，是透明軟骨復(fù)蓋于椎體上，下面骺環(huán)中間的骨面。上下的軟骨板與纖維環(huán)一起將髓核密封起來(lái)。纖維環(huán)由膠原纖維束的纖維軟骨構(gòu)成，位于髓核的四周。纖維環(huán)的纖維束相互斜行交叉重疊，使纖維環(huán)成為堅(jiān)實(shí)的組織，能承受較大的彎曲和扭轉(zhuǎn)負(fù)荷。髓核，是乳白色半透明膠狀體，富于彈性，為椎間盤(pán)結(jié)構(gòu)的一部分，位于兩軟骨板與纖維環(huán)之間。由縱橫交錯(cuò)的纖維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)即軟骨細(xì)胞和蛋白多糖黏液樣基質(zhì)構(gòu)成的彈性膠凍物質(zhì)。嬰幼兒時(shí)期的髓核含水量為80%-90%，即使到了老年，其含水量也在70%上下。髓核在出生時(shí)體積大而松散，位于椎間盤(pán)的中央，至成年時(shí)位置移至椎間盤(pán)的中后部；在成年以前構(gòu)成髓核的主要物質(zhì)是大量蛋白多糖復(fù)合體、膠原纖維和纖維軟骨，隨著年齡的增長(zhǎng)，髓核中的蛋白多糖解聚增多，水分逐漸減少，膠原增粗并逐漸被纖維軟骨所替代。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠椎間盤(pán)髓核采用膠原酶-混合消化法并結(jié)合軟骨細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠椎間盤(pán)髓核經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟：
一、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a）、對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞，脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b）、對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的產(chǎn)品：
土壤堿性蛋白酶 可見(jiàn)分光光度法 50管/24樣
FDA水解酶試劑盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/24樣
土壤酸性蛋白酶試劑盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/24樣
土壤漆酶測(cè)試盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/48樣
小鼠17-酮類(lèi)固醇(17-KS)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human gasin (Gasin) ELISA Kit 人胃泌素(Gasin)試劑盒
Humanandrogeeceptor,ARELISAKit 人雄激素受體(AR)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humancoicoopin-releasingfactor,CRF人促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子(CRF)試劑盒規(guī)格：96T/48T
組織CK2α激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
HumanproteinkinaseC，PKCELISAKit人蛋白激酶C(PKC)試劑盒規(guī)格：96T/48T
Intersectin 2抗體
高遷移率族蛋白2重組兔單克隆抗體
PVR重組小鼠 CD155 / PVR 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
CK7(Cytokeratin 7 0.5mgCK7(Cytokeratin 7)human 細(xì)胞角蛋白7抗原
TSC22D1重組人 TSC22D1 蛋白 Protein
IFNA7 Protein Human 重組人 Interferon alpha 7 / IFNA7 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
SCARB1 Protein Mouse 重組小鼠 SCARB1 / CD36L1 / CLA-1 蛋白
CK7(Cytokeratin 7 0.5mgCK7(Cytokeratin 7)human 細(xì)胞角蛋白7抗原
IFNA7 Protein Human 重組人 Interferon alpha 7 / IFNA7 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
PVR重組小鼠 CD155 / PVR 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
SCARB1 Protein Mouse 重組小鼠 SCARB1 / CD36L1 / CLA-1 蛋白
TSC22D1重組人 TSC22D1 蛋白 Protein
小鼠椎間盤(pán)髓核細(xì)胞大鼠垂草扁桃酸(VMA)試劑盒 ，英文名： VMA ELISA Kit
Mouse 6 keto prostaglandin (6-K-PG) ELISA Kit 小鼠6酮前列腺素(6-K-PG)試劑盒
ELISA 小鼠環(huán)0酸鳥(niǎo)苷(mouse cGMP) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforLF/LTFAb-Ig(HumanLactoferrinaibodyIgG)ELISAkit人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白抗體IgG
通用型HRP-AEC底物顯色試劑盒10次
ELISAKitCollagenaseI膠原酶I
收到細(xì)胞如何處理？
1、首先，觀(guān)察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請(qǐng)拍照，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落；先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸浮）、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%，可正常傳代；若未超過(guò)80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過(guò)80%，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過(guò)80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
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