詳細(xì)介紹
需要自備的器材:
1.儀器:分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水
處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:鸚鵡熱嗜衣原體PCR檢測試劑盒說明書
英文名稱:Chlamydophila psittaciPCR
貨號:YS30569-R
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
相對定量分析方法 :
2-ΔΔCt
前提:目標(biāo)序列和內(nèi)參序列的擴增效率接近100%且偏差在5%以內(nèi)
1、用內(nèi)參基因的CT值歸一目標(biāo)基因的CT值:
ΔCT(test)= CT(target,test)-CT(ref,test)
ΔCT(calibrator)= CT(target,calibrator)-CT(ref, calibrator)
2、用校準(zhǔn)樣本的ΔCT值歸一試驗樣本的ΔCT值:
ΔΔCT= ΔCT(test) - ΔCT(calibrator)
3、計算表達(dá)水平比率:
2 –ΔΔCT=表達(dá)量的比值
使用方法:
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
具有下列特點:
1.根據(jù) 指標(biāo)的保守序列設(shè)計的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
2.靈敏度比常規(guī) PCR 高 2-3 個數(shù)量級,可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
3.即開即用,用戶只需要提供樣品模板,操作簡單,定量準(zhǔn)確快速。
4.一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續(xù)污染。
5.本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
6.本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
注意事項:
1. 建議使用新鮮采取的動物組織,若為長期冷凍組織,應(yīng)盡量避免反復(fù)凍融,否則會導(dǎo)致模板的降解,影響PCR效率。
2. 試劑Buffer AL若低溫保存,易產(chǎn)生沉淀。在使用前務(wù)必將其在室溫中放置一段時間,也可在37℃水浴中預(yù)熱10 min,以溶解沉淀,混勻后再使用。
3. 電泳檢測時,切勿使用含有SDS的Loading Buffer。否則,電泳時會在泳道中出現(xiàn)一大團(tuán)拖尾亮帶,影響實驗結(jié)果。
4. 建議擴增片段長度1 kb以內(nèi),以便擴增效率佳。
?5. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。
Estrogen Receptor beta antibody [14C8]原裝、分裝N ,N-雙(2-羥基)甘氨
GFP antibody - ChIP Grade原裝、分裝溴酚藍(lán)
GFP antibody [LGB-1]原裝、分裝環(huán)酰胺
Fibronectin antibody原裝、分裝Cutosineβ-D- 阿糖胞苷
Sodium Potassium ATPase antibody原裝、分裝羧芐青鈉
Alkaline Phosphatase antibody原裝、分裝藍(lán)色葡聚糖2000
bacterial Luciferase antibody (HRP)原裝、分裝過氧化物酶標(biāo)記試盒
Lysozyme antibody原裝、分裝麥草畏 .畏.草快.
hCG antibody [HCG1]原裝、分裝抑制和誘導(dǎo)TRAIL antibody原裝、分裝二醇醚(光譜純,>99.7%(GC))
Deoxynevalenol antibody原裝、分裝基環(huán)己(光譜級,≥99%)
Zearalenone antibody [11C9]原裝、分裝酯(99%,光譜純)
Fumonisin antibody [2A2]原裝、分裝酯(99%,光譜純)
RIP140 antibody原裝、分裝酯(99%,光譜純)
RIP140 antibody原裝、分裝異醇(ACS 光譜級,≥99.5%)
USH2A antibody原裝、分裝異醇(ACS 光譜級,≥99.5%)
COMP/Cartilage oligomeric matrix protein antibody原裝、分裝浸鏡油(顯微鏡用)
VEGF Receptor 2 antibody [mV1001.3m-h]原裝、分裝浸鏡油(顯微鏡用)
鸚鵡熱嗜衣原體PCR檢測試劑盒說明書delta 1 Catenin/CAS (phospho T310) antibody [EPR2382]原裝、分裝生長激素釋放子,GRF(1-40)酰胺,人
delta 1 Catenin/CAS (phospho T310) antibody [EPR2382]原裝、分裝生長激素釋放子,GRF(1-40),人
c-Jun (phospho T93) antibody [EPR2237]原裝、分裝生長激素釋放子,GRF(1-44)酰胺,牛
c-Jun (phospho T93) antibody [EPR2237]原裝、分裝生長激素釋放子(1-16),豬
c-Jun (phospho T93) antibody [EPR2237]原裝、分裝生長激素釋放子(14-27),人,豬,犬
Neuropilin 1 antibody [EPR3113]原裝、分裝3型糖原合成酶激酶肽段底物
Neuropilin 1 antibody [EPR3113]原裝、分裝鳥苷蛋白,人
Neuropilin 1 antibody [EPR3113]原裝、分裝鳥苷蛋白,大鼠,小鼠
Inhibin alpha antibody [EPY2782]原裝、分裝融合肽