詳細(xì)介紹
相對(duì)定量分析方法 :
2-ΔΔCt
前提:目標(biāo)序列和內(nèi)參序列的擴(kuò)增效率接近100%且偏差在5%以內(nèi)
1、用內(nèi)參基因的CT值歸一目標(biāo)基因的CT值:
ΔCT(test)= CT(target,test)-CT(ref,test)
ΔCT(calibrator)= CT(target,calibrator)-CT(ref, calibrator)
2、用校準(zhǔn)樣本的ΔCT值歸一試驗(yàn)樣本的ΔCT值:
ΔΔCT= ΔCT(test) - ΔCT(calibrator)
3、計(jì)算表達(dá)水平比率:
2 –ΔΔCT=表達(dá)量的比值
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:波薩達(dá)斯球孢子菌PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格
英文名稱:Coccidioides posadasiiPCR
貨號(hào):YS30598-R
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
使用方法:
一、稀釋 PCR 陽(yáng)性對(duì)照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的 DNA 段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
具有下列特點(diǎn):
1.根據(jù) 指標(biāo)的保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物,與相關(guān)病毒無(wú)交叉反應(yīng)。
2.靈敏度比常規(guī) PCR 高 2-3 個(gè)數(shù)量級(jí),可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
3.即開(kāi)即用,用戶只需要提供樣品模板,操作簡(jiǎn)單,定量準(zhǔn)確快速。
4.一管式熒光定量 PCR 檢測(cè),避免后續(xù)污染。
5.本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
6.本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
需要自備的器材:
1.儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水
處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。
HA tag antibody [4C12]原裝、分裝ATPNa2 三腺苷二鈉
Hsp27 antibody原裝、分裝ATPNa2 三腺苷二鈉
Hsc70 antibody原裝、分裝ABTS 2,2-二氮-雙(3-基苯并噻唑-6-磺)銨鹽
HSPA2 antibody原裝、分裝人血清(H培養(yǎng)基)
p53 (phospho S15) antibody原裝、分裝Albumin Human 人血清白蛋白
Bad (phospho S112) antibody原裝、分裝Albumin Human 人血清白蛋白
HDAC5 antibody原裝、分裝Albumin Egg 高純卵清蛋白≥90%
HDAC6 antibody原裝、分裝LIPOFECTAMINE2000(脂質(zhì)體2000)
HDAC7 antibody原裝、分裝LIPOFECTAMINE2000(脂質(zhì)體2000)Vitronectin/S-Protein antibody [EP873Y]原裝、分裝異(Standard for GC,≥99.5%(GC))
Vitronectin/S-Protein antibody [EP873Y]原裝、分裝異戊(Standard for GC,>99%(GC))
JAK3 antibody [EP909Y]原裝、分裝吲哚(standard for GC,>99.5%(GC))
JAK3 antibody [EP909Y]原裝、分裝異酯(Standard for GC)
JAK3 antibody [EP909Y]原裝、分裝庚酯(standard for GC,≥99.5%(GC))
SHIP-1 antibody [EP378Y]原裝、分裝辛酯(Standard for GC,>99%(GC))
SHIP-1 antibody [EP378Y]原裝、分裝異辛醇(standard for GC, ≥99.5% (GC))
SHIP-1 antibody [EP378Y]原裝、分裝酯(Standard for GC,≥99.5%(GC))
CD32B antibody [EP888Y]原裝、分裝基烯酯(standard for GC,≥99.5%(GC))
波薩達(dá)斯球孢子菌PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格Recombinant human TIMP2 protein原裝、分裝乳性蛋白(68-82),幾內(nèi)亞豬;
Recombinant Simian Virus 40 (SV40) SV40 Large T Antigen protein原裝、分裝乳性蛋白(74-85),荷蘭豬
Recombinant Human FRA1 protein原裝、分裝乳性蛋白(87-99),人,荷蘭豬
Recombinant Human Thyroid Hormone Receptor alpha 1 protein原裝、分裝乳性蛋白(90-106)
Recombinant human IL-33 protein原裝、分裝乳性蛋白(90-106)化
Recombinant human IL-33 protein原裝、分裝黑素濃集激素基疊加多肽-14,大鼠
Recombinant Human Retinoid X Receptor beta/RXRB protein原裝、分裝黑素濃集激素基疊加多肽-27,大鼠
Recombinant human LIGHT/TNFSF14 protein原裝、分裝mCRAMP,小鼠
Recombinant human LIGHT/TNFSF14 protein原裝、分裝黑色素聚集激素,人,大鼠,小鼠
注意事項(xiàng):
1. 建議使用新鮮采取的動(dòng)物組織,若為長(zhǎng)期冷凍組織,應(yīng)盡量避免反復(fù)凍融,否則會(huì)導(dǎo)致模板的降解,影響PCR效率。
2. 試劑Buffer AL若低溫保存,易產(chǎn)生沉淀。在使用前務(wù)必將其在室溫中放置一段時(shí)間,也可在37℃水浴中預(yù)熱10 min,以溶解沉淀,混勻后再使用。
3. 電泳檢測(cè)時(shí),切勿使用含有SDS的Loading Buffer。否則,電泳時(shí)會(huì)在泳道中出現(xiàn)一大團(tuán)拖尾亮帶,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
4. 建議擴(kuò)增片段長(zhǎng)度1 kb以內(nèi),以便擴(kuò)增效率佳。
5. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。