詳細介紹
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:敗血梭狀芽胞桿菌PCR檢測試劑盒說明書
英文名稱:Clostridium septicumPCR
貨號:YS30593-R
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
需要自備的器材:
1.儀器:分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水
處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。
相對定量分析方法 :
2-ΔΔCt
前提:目標序列和內(nèi)參序列的擴增效率接近100%且偏差在5%以內(nèi)
1、用內(nèi)參基因的CT值歸一目標基因的CT值:
ΔCT(test)= CT(target,test)-CT(ref,test)
ΔCT(calibrator)= CT(target,calibrator)-CT(ref, calibrator)
2、用校準樣本的ΔCT值歸一試驗樣本的ΔCT值:
ΔΔCT= ΔCT(test) - ΔCT(calibrator)
3、計算表達水平比率:
2 –ΔΔCT=表達量的比值
具有下列特點:
1.根據(jù) 指標的保守序列設(shè)計的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
2.靈敏度比常規(guī) PCR 高 2-3 個數(shù)量級,可以達到幾百拷貝/反應(yīng)。
3.即開即用,用戶只需要提供樣品模板,操作簡單,定量準確快速。
4.一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續(xù)污染。
5.本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
6.本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
注意事項:
1. 建議使用新鮮采取的動物組織,若為長期冷凍組織,應(yīng)盡量避免反復凍融,否則會導致模板的降解,影響PCR效率。
2. 試劑Buffer AL若低溫保存,易產(chǎn)生沉淀。在使用前務(wù)必將其在室溫中放置一段時間,也可在37℃水浴中預熱10 min,以溶解沉淀,混勻后再使用。
3. 電泳檢測時,切勿使用含有SDS的Loading Buffer。否則,電泳時會在泳道中出現(xiàn)一大團拖尾亮帶,影響實驗結(jié)果。
4. 建議擴增片段長度1 kb以內(nèi),以便擴增效率佳。
5. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。
DDDDK tag (Binds to FLAG® tag sequence) antibody原裝、分裝多臂異官能團雙取代聚二醇衍生物
CD38 antibody [FS02]原裝、分裝單分散聚二醇衍生物
Myc tag antibody (HRP)原裝、分裝聚二醇標準品
Myc tag antibody (FITC)原裝、分裝聚二醇標準品
Mouse IgG1, monoclonal [HybIgG1] (FITC) - Isotype Control原裝、分裝核電泳
6X His tag® antibody (HRP)原裝、分裝Timentin 特美?。ㄐ滦透锾m氏陰性菌抗生素)
6X His tag® antibody (FITC)原裝、分裝槲皮素標準品(科研)
V5 tag antibody (FITC)原裝、分裝基氯化四氮唑藍(INT )
SMC1A (phospho S957) antibody原裝、分裝羥基 glycolic acidPlasma Cell antibody [LIV3G11]原裝、分裝二異胺(Standard for GC,≥99.5%(GC))
p15 INK4b antibody [DCS-114]原裝、分裝間二氯苯(Standard for GC,>99.5%)
Insulin Receptor antibody [83-14]原裝、分裝鄰苯二二正辛酯(standard for GC,≥99.0%(GC))
Tubulin antibody [DM1A +DM1B] - Loading Control原裝、分裝4,4'-二氨基二苯(Standard for GC,≥99.0%(GC))
Laminin beta 1 antibody [LT3]原裝、分裝鄰苯二二壬酯(standard for GC,≥99.5%(GC))
Nck antibody [NC-20 (same as 20B-1H9)]原裝、分裝1,3-二氯(standard for GC,≥99.5%(GC))
Blood Group Lewis b antibody [LWB01 (same as 2-25LE)]原裝、分裝正癸(Standard for GC,>99%(GC))
CD105 antibody [105C02]原裝、分裝己二二酯(standard for GC,≥99.5%(GC))
GRIP1 antibody [GRP01]原裝、分裝馬來二酯(standard for GC,≥99.5%(GC))
敗血梭狀芽胞桿菌PCR檢測試劑盒說明書CD20 antibody [B-Ly1] (PE/Cy7 ®)原裝、分裝潛伏膜蛋白2(419-427),TYG
CD8 alpha antibody [53-6.7] (Allophycocyanin/Cy5.5 ® )原裝、分裝Locustachykinin I
CD3 antibody [UCHT1] (Allophycocyanin/Cy7 ®)原裝、分裝Locustachykinin II
CD20 antibody [B-Ly1] (Allophycocyanin/Cy7 ®)原裝、分裝黃體生成素釋放激素,游離,人
Recombinant Human TNF alpha protein原裝、分裝淋巴細胞激活五肽
Recombinant Human SF2 protein原裝、分裝Lys-(Ala3)-緩激肽
Recombinant Human Retinoic Acid Receptor gamma protein原裝、分裝Lys-(Des-Arg9)-緩激肽
Recombinant Human PXR protein原裝、分裝Lys-(Des-Arg9,Leu8)-緩激肽
Recombinant Human PC4 (mutated F77) protein原裝、分裝Lys-(Hyp3)-緩激肽
使用方法:
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。