詳細(xì)介紹
需要自備的器材:
1.儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水
處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:長鼻分咽線蟲PCR檢測(cè)試劑盒說明書
英文名稱:Dispharynx nasutaPCR
貨號(hào):YS30665-R
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
相對(duì)定量分析方法 :
2-ΔΔCt
前提:目標(biāo)序列和內(nèi)參序列的擴(kuò)增效率接近100%且偏差在5%以內(nèi)
1、用內(nèi)參基因的CT值歸一目標(biāo)基因的CT值:
ΔCT(test)= CT(target,test)-CT(ref,test)
ΔCT(calibrator)= CT(target,calibrator)-CT(ref, calibrator)
2、用校準(zhǔn)樣本的ΔCT值歸一試驗(yàn)樣本的ΔCT值:
ΔΔCT= ΔCT(test) - ΔCT(calibrator)
3、計(jì)算表達(dá)水平比率:
2 –ΔΔCT=表達(dá)量的比值
使用方法:
一、稀釋 PCR 陽性對(duì)照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照,只提供可以直接使用的 DNA 段作為陽性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對(duì)照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。
具有下列特點(diǎn):
1.根據(jù) 指標(biāo)的保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
2.靈敏度比常規(guī) PCR 高 2-3 個(gè)數(shù)量級(jí),可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
3.即開即用,用戶只需要提供樣品模板,操作簡單,定量準(zhǔn)確快速。
4.一管式熒光定量 PCR 檢測(cè),避免后續(xù)污染。
5.本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
6.本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
注意事項(xiàng):
1. 建議使用新鮮采取的動(dòng)物組織,若為長期冷凍組織,應(yīng)盡量避免反復(fù)凍融,否則會(huì)導(dǎo)致模板的降解,影響PCR效率。
2. 試劑Buffer AL若低溫保存,易產(chǎn)生沉淀。在使用前務(wù)必將其在室溫中放置一段時(shí)間,也可在37℃水浴中預(yù)熱10 min,以溶解沉淀,混勻后再使用。
3. 電泳檢測(cè)時(shí),切勿使用含有SDS的Loading Buffer。否則,電泳時(shí)會(huì)在泳道中出現(xiàn)一大團(tuán)拖尾亮帶,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
4. 建議擴(kuò)增片段長度1 kb以內(nèi),以便擴(kuò)增效率佳。
?5. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。
MCM10 antibody原裝、分裝CAS:2586-96-1,蓮心標(biāo)準(zhǔn)品
SDS3 antibody原裝、分裝CAS:70674-90-7,長春質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品
Sumo 2 + Sumo 3 antibody原裝、分裝CAS:50-55-5,利血平標(biāo)準(zhǔn)品
KIF14 antibody原裝、分裝CAS:1063-77-0,諾米林標(biāo)準(zhǔn)品
KIF14 antibody原裝、分裝輔酶Q10 (泛醌)氧化型輔酶Q10
SNF2H antibody - ChIP Grade原裝、分裝鹽小檗(生化研究)
AMPK alpha 1 antibody原裝、分裝磺酰羅丹明B(激光級(jí))
AMPK alpha 2 antibody原裝、分裝鳥苷-5'-單二鈉(≥98% HPLC)
PRMT1 antibody - ChIP Grade原裝、分裝蒽(98%)DOK1 (phospho Y362) antibody原裝、分裝n-石蠟的標(biāo)準(zhǔn)混合物(包括C15, C16, C17, C18和C19)[GC用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)]
NF2 / Merlin (phospho S518) antibody原裝、分裝n-石蠟的標(biāo)準(zhǔn)混合物(包括C7, C8, C9, C10和C11)[GC用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)]
S6K1 (phospho S424) antibody原裝、分裝n-石蠟的標(biāo)準(zhǔn)混合物(包括C12, C13, C14, C15和C16)[GC用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)]
PDX1 antibody原裝、分裝n-石蠟的標(biāo)準(zhǔn)混合物 (包括C17, C18, C19和C20) [GC用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)]
Stathmin 1 (phospho S37) antibody原裝、分裝n-石蠟的標(biāo)準(zhǔn)混合物(包括C21, C22, C23, C24和C25)[GC用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)]
Cdc25A antibody原裝、分裝脂肪酯的標(biāo)準(zhǔn)混合物(包括酯,酯,酯,酯和戊酯)[標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)]
Met (c-Met) (phospho Y1234) antibody原裝、分裝脂肪酯的標(biāo)準(zhǔn)混合物(包括己酯,庚酯,辛酯,壬酯和癸酯)[標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)]
IRS1 (phospho S639) antibody原裝、分裝脂肪酯的標(biāo)準(zhǔn)混合物(包括癸酯,十二酯,十四酯,十六酯和十八酯)[標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)]
Src antibody原裝、分裝4-溴苯酰溴(>99.0%(T),用于高效液相色譜標(biāo)記)
長鼻分咽線蟲PCR檢測(cè)試劑盒說明書Recombinant human GCSF Receptor protein (Fc Chimera)原裝、分裝石英基底少層石墨烯
Recombinant human Flt3 / CD135 protein (Fc Chimera Active)原裝、分裝石英基底單層石墨烯
Recombinant Human FGFR4 protein (Fc Chimera)原裝、分裝PET基底少層石墨烯
Recombinant Human FGFR1 alpha protein (Fc Chimera)原裝、分裝PET基底單層石墨烯
Recombinant human EPO-R protein (Fc Chimera)原裝、分裝氧化硅基底少層石墨烯
Recombinant human EGFR protein (Fc Chimera)原裝、分裝氧化硅基底單層石墨烯
SFRP1 antibody原裝、分裝鎳泡沫基底石墨烯
SLC36A2 antibody原裝、分裝銅基底少層石墨烯
hypothetical protein FLJ30058 antibody原裝、分裝銅基單層石墨烯膜