詳細(xì)介紹
需要自備的器材:
1.儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水
處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:牛肺線蟲PCR檢測試劑盒
英文名稱:Dictyocaulus viviparusPCR
貨號:YS30663-R
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
相對定量分析方法 :
2-ΔΔCt
前提:目標(biāo)序列和內(nèi)參序列的擴(kuò)增效率接近100%且偏差在5%以內(nèi)
1、用內(nèi)參基因的CT值歸一目標(biāo)基因的CT值:
ΔCT(test)= CT(target,test)-CT(ref,test)
ΔCT(calibrator)= CT(target,calibrator)-CT(ref, calibrator)
2、用校準(zhǔn)樣本的ΔCT值歸一試驗樣本的ΔCT值:
ΔΔCT= ΔCT(test) - ΔCT(calibrator)
3、計算表達(dá)水平比率:
2 –ΔΔCT=表達(dá)量的比值
使用方法:
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
具有下列特點(diǎn):
1.根據(jù) 指標(biāo)的保守序列設(shè)計的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
2.靈敏度比常規(guī) PCR 高 2-3 個數(shù)量級,可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
3.即開即用,用戶只需要提供樣品模板,操作簡單,定量準(zhǔn)確快速。
4.一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續(xù)污染。
5.本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
6.本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
注意事項:
1. 建議使用新鮮采取的動物組織,若為長期冷凍組織,應(yīng)盡量避免反復(fù)凍融,否則會導(dǎo)致模板的降解,影響PCR效率。
2. 試劑Buffer AL若低溫保存,易產(chǎn)生沉淀。在使用前務(wù)必將其在室溫中放置一段時間,也可在37℃水浴中預(yù)熱10 min,以溶解沉淀,混勻后再使用。
3. 電泳檢測時,切勿使用含有SDS的Loading Buffer。否則,電泳時會在泳道中出現(xiàn)一大團(tuán)拖尾亮帶,影響實驗結(jié)果。
4. 建議擴(kuò)增片段長度1 kb以內(nèi),以便擴(kuò)增效率佳。
?5. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。 復(fù)
FEM 1B antibody原裝、分裝對基苯酯
IRS2 (phospho S731) antibody原裝、分裝tris-馬來緩沖液(各種PH值)
SOCS1 antibody原裝、分裝5-氮雜胞嘧啶核苷(科研)
SOCS2 antibody原裝、分裝中性樹膠(樹膠封片)
SOCS3 antibody原裝、分裝霍亂
SOX9 antibody - ChIP Grade原裝、分裝CAS:621-59-0,異香蘭素
AP3 antibody原裝、分裝活性碳顆粒(粉末)
AP-2 complex subunit alpha-1 antibody原裝、分裝biomatik 生物試
ING4 antibody原裝、分裝ProFoldin 生物試Human VCAM-1 ELISA Set (without plates)原裝、分裝亞油酯(>99.0%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì))
Human VCAM-1 ELISA Set (without plates)原裝、分裝亞油酯(>99.0%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì))
Human IL-5 ELISA Set (without plates)原裝、分裝1-戊烯(>99.5%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì))
Human IL-5 ELISA Set (without plates)原裝、分裝1-己烯(>99.5%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì))
Human IL-5 ELISA Set (without plates)原裝、分裝1-庚烯(>99.5%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì))
Human IL-7 ELISA Set (without plates)原裝、分裝1-辛烯(>99.5%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì))
Human IL-7 ELISA Set (without plates)原裝、分裝1-壬烯(>99.5%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì))
Human IL-7 ELISA Set (without plates)原裝、分裝1-癸烯(>99.5%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì))
Human Thrombomodulin ELISA Set (without plates)原裝、分裝1-十一烯(>99.5%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì))
牛肺線蟲PCR檢測試劑盒OCC1 antibody原裝、分裝二氧化硅包金納米粒子
KLRA1 antibody原裝、分裝金包四氧化三鐵刺狀納米粒子
ZIP-11 antibody原裝、分裝二氧化硅包銀納米粒子
GAPDH antibody - Loading Control原裝、分裝四氧化三鐵連30納米金納米粒子
GAPDH antibody - Loading Control原裝、分裝銀包金包三氧化二鐵納米粒子
PDCD5 antibody原裝、分裝金包四氧化三鐵納米粒子
CD41/Integrin alpha 2b antibody原裝、分裝四氧化三鐵納米粒子
NOL6 antibody原裝、分裝γ-三氧化二鐵納米粒子
Aurora A (phospho T288) antibody原裝、分裝金立方體納米粒子