詳細(xì)介紹
相對(duì)定量分析方法 :
2-ΔΔCt
前提:目標(biāo)序列和內(nèi)參序列的擴(kuò)增效率接近100%且偏差在5%以內(nèi)
1、用內(nèi)參基因的CT值歸一目標(biāo)基因的CT值:
ΔCT(test)= CT(target,test)-CT(ref,test)
ΔCT(calibrator)= CT(target,calibrator)-CT(ref, calibrator)
2、用校準(zhǔn)樣本的ΔCT值歸一試驗(yàn)樣本的ΔCT值:
ΔΔCT= ΔCT(test) - ΔCT(calibrator)
3、計(jì)算表達(dá)水平比率:
2 –ΔΔCT=表達(dá)量的比值
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:唾液乳酸桿菌PCR檢測(cè)試劑盒說明書
英文名稱:Lactobacillus salivariusPCR
貨號(hào):YS31004-R
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
使用方法:
一、稀釋 PCR 陽性對(duì)照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照,只提供可以直接使用的 DNA 段作為陽性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對(duì)照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。
具有下列特點(diǎn):
1.根據(jù) 指標(biāo)的保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
2.靈敏度比常規(guī) PCR 高 2-3 個(gè)數(shù)量級(jí),可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
3.即開即用,用戶只需要提供樣品模板,操作簡(jiǎn)單,定量準(zhǔn)確快速。
4.一管式熒光定量 PCR 檢測(cè),避免后續(xù)污染。
5.本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
6.本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
需要自備的器材:
1.儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水
處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。
HepG2 nuclear extract lysate原裝、分裝鹽胺
HepG2 nuclear extract lysate (acetaldehyde treated)原裝、分裝鹽胺
PDE5A/PDE5 antibody原裝、分裝鹽胺(標(biāo)準(zhǔn)品)
Punt antibody原裝、分裝阿莫曲普坦蘋果鹽
Baboon antibody原裝、分裝阿莫曲普坦蘋果鹽
Baboon antibody原裝、分裝阿莫曲普坦蘋果鹽
Glucose Transporter GLUT1 antibody原裝、分裝阿糖腺苷
SGLT1 antibody原裝、分裝阿糖腺苷
SGLT1 antibody原裝、分裝阿糖腺苷Recombinant human PKC epsilon protein原裝、分裝生物胞素
Recombinant human PKC zeta protein原裝、分裝生姜多糖
Recombinant human PKC eta protein原裝、分裝茶多糖
Recombinant human PKC iota protein原裝、分裝2,3-二呋喃
Recombinant human Eph receptor B2 protein原裝、分裝2,3-二呋喃
Recombinant human FAK protein原裝、分裝PU-H71
Recombinant human FGFR1 protein原裝、分裝PU-H71
Recombinant human FGFR1 protein原裝、分裝PU-H71
Recombinant human FGR protein原裝、分裝鳶尾多糖
唾液乳酸桿菌PCR檢測(cè)試劑盒說明書GLP2 antibody [EPR3073]原裝、分裝2,2-雙(4-羥基-3,5-二基苯基)(>98.0%(GC))
GLP2 antibody [EPR3073]原裝、分裝2,2-雙[4-(4-氨苯氧基)苯基](>98.0%(HPLC)(T))
GLP2 antibody [EPR3073]原裝、分裝2,2-雙[4-(4-氨苯氧基)苯基](>98.0%(HPLC)(T))
p23 antibody [EPR3846]原裝、分裝α,α'-雙(4-氨基苯基)-1,4-二異基苯(>98.0%(GC))
p23 antibody [EPR3846]原裝、分裝α,α'-雙(4-氨基苯基)-1,4-二異基苯(>98.0%(GC))
p23 antibody [EPR3846]原裝、分裝α,α'-雙(4-羥基苯基)-1,4-二異基苯(>98.0%(GC))
P2Y6 antibody [EPR3816]原裝、分裝α,α'-雙(4-羥基苯基)-1,4-二異基苯(>98.0%(GC))
P2Y6 antibody [EPR3816]原裝、分裝雙酚 C(>98.0%(GC))
P2Y6 antibody [EPR3816]原裝、分裝雙酚 C(>98.0%(GC))
注意事項(xiàng):
1. 建議使用新鮮采取的動(dòng)物組織,若為長(zhǎng)期冷凍組織,應(yīng)盡量避免反復(fù)凍融,否則會(huì)導(dǎo)致模板的降解,影響PCR效率。
2. 試劑Buffer AL若低溫保存,易產(chǎn)生沉淀。在使用前務(wù)必將其在室溫中放置一段時(shí)間,也可在37℃水浴中預(yù)熱10 min,以溶解沉淀,混勻后再使用。
3. 電泳檢測(cè)時(shí),切勿使用含有SDS的Loading Buffer。否則,電泳時(shí)會(huì)在泳道中出現(xiàn)一大團(tuán)拖尾亮帶,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
4. 建議擴(kuò)增片段長(zhǎng)度1 kb以內(nèi),以便擴(kuò)增效率佳。
?5. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。