詳細介紹
測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當時,即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實驗成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結(jié)果,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
產(chǎn)品名稱 | ALCAMElisaKit |
英文名稱 | Rat Activated Leukocyte Cell Adhesion Molecule, ALCAM Elisa Kit |
規(guī)格 | 48T/96T |
試劑和樣本的控制方法:
一、試劑
1.試劑的選擇:國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴格把關(guān),我司嚴格按照進行,已獲得國家承認的“三證”,每一個產(chǎn)品都有對應(yīng)的批號,只要客戶提前下單,我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品,不必擔心會有過期的試劑。我司的試劑,值得您選擇。
2.試劑的準備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來,在室溫下放置20-30 min后,再進行測定,使試劑盒在使用前與室溫平衡,這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達到所需的溫度,以滿足后面的測定需求。
二、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素:包括類風(fēng)濕因子、補體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等;
類風(fēng)濕因子的控制方法:
①用F(ab)2替代完整的IgG;
②標本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理;
③檢測抗原時,可用加入到標本稀釋液中使RF降解;
補體的控制方法:
①用EDTA稀釋標本;
②56℃ 30 min加熱血清使C1q滅活;
2.外源性干擾因素:包括標本溶血、細菌污染、保存時間過長或凝固不全等;
控制方法:采血時規(guī)范操作,采集的血液勿用力震蕩,以防溶血;收集標本時采用無菌試管,經(jīng)檢測后再低溫凍存;保存時間不宜過久,檢測時盡量采用新鮮標本;對于凝固不全的血標本可適當加入抗凝劑,并放入37℃水中1 h,待充分凝固后再離心分離血清。
操作步驟:
1)使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
2)根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。
3)加入稀釋好后的標準品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
4)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
5)每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
6)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
7)每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
8)取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。
9)在450nm波長處測定各孔的OD值。
具有如下優(yōu)點:
一、高效、靈敏、特異的抗體;
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型;
五、性價比非常好,節(jié)省實驗經(jīng)費。
地孕英文名(EN):Isobutylmethacrylate,規(guī)格(SP):250ML
地孕(標準品)英文名(EN):tertButylmethacrylate,98%規(guī)格(SP):25ML
鉑,吡鉑英文名(EN):DimethylTrisulfide,規(guī)格(SP):5G
芬(標準品)英文名(EN):Bis(2methylfuryl)disulfide,98%規(guī)格(SP):1G
砜素英文名(EN):Allylmethacrylate,98%規(guī)格(SP):100ML
砜素(標準品)英文名(EN):DipropylDisulfide,規(guī)格(SP):25G
砜素甘鹽鹽英文名(EN):Glycidylmethacrylate,97.0%規(guī)格(SP):100G
睪;睪素英文名(EN):Methyl5methylisoxazolecarboxylate...規(guī)格(SP):5G
睪;睪素(標準品)英文名(EN):εCaprolactone,規(guī)格(SP):100G
鈷英文名(EN):Diallylmaleate,≥95.0%規(guī)格(SP):25ML
鈷(標準品)英文名(EN):2,2′(Dithiodimethylene)difuran,≥規(guī)格(SP):1G
隆標準溶液(10μg/ml,u=4%)英文名(EN):Bis[3(triethoxysilyl)propyl]tetrasul...規(guī)格(SP):5ML
司特英文名(EN):Hexamethylenediisocyanate,規(guī)格(SP):25ML
地平(標準品)英文名(EN):Tetraethylthiuramdisulfide,≥97.0%規(guī)格(SP):25G
倍他司汀英文名(EN):Trimethylenesulfide規(guī)格(SP):5G
倍他司汀(標準品)英文名(EN):4,4′Dipyridyldisulfide,98%規(guī)格(SP):1G
達沙星英文名(EN):Diallyldisulfide,≥80%規(guī)格(SP):5G
達沙星(標準品)英文名(EN):(Diethylamino)sulfurtrifluoride,≥90%規(guī)格(SP):5ML
ALCAMElisaKit5Bromoisoquinoline5溴異34784048
Tryptic Soy Broth Wi10%胰酪胨大豆肉湯
3Bromo1,1,1trifluoroacetone3溴1,1,1三431356
HDALAOBZL PTOSYLATED氨芐對41036322
2Ethylfuran23208160
BENZO[C]CINNOLINE并[c]噌啉230171
P(METHYLTHIO)PHENYLACETONITRILE438746928
1,3Diphenylacetone二芐102045
N,N'DiBocLlysine hydroxysuccinimide esterN,N'二叔羰L賴氨 N二酰亞30189367
4FLUOROPHENYL ISOTHIOCYANATE4異1544689
(S)(+)2,2Dimethylcyclopropanecarboxamide(S)(+)2,2二環(huán)酰75885584
Chuanxiong rhizoMe oil川芎油
D(+)GlucoseD無水葡萄糖50997
Benzoyl cyanide酰613901
DIPHENYL DISULFIDE二二882337
鞘脂 訂購|咨詢 規(guī)格: 25mg/支
連錢草 訂購|咨詢 規(guī)格: 1g
旱蓮苷A 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
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表木栓 16844716 訂購|咨詢 規(guī)格: 10mg