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Spot-Trap Affinity Reagents
Spot-Trap Affinity Reagents
Spot-Trap是高質(zhì)量的Spot-Tag結(jié)合蛋白與設(shè)計用于免疫沉淀或親和純化方案的樹脂基質(zhì)偶聯(lián)。它只會與Spot-Tag融合蛋白上的新型12個氨基酸序列相互作用。與其他短肽“標簽”系統(tǒng)相比,Spot-Tag具有許多特點。與所有Nanobody-Traps一樣,Spot-Trap結(jié)合蛋白是一種小的(14.7 kDa)單價高親和力單克隆羊駝抗體(“ nanobody”),可識別N端的Spot-Tag序列基序(PDRVRAVSHWSS)表達的融合蛋白的C末端或C末端。Spot-Trap與瓊脂糖或磁性瓊脂糖微珠表面共價偶聯(lián),可快速有效地進行免疫沉淀和親和純化。它針對斑點標記蛋白及其相互作用伙伴的生化分析進行了優(yōu)化。它已經(jīng)過多種應(yīng)用的測試,并且可以在各種系統(tǒng)(例如細菌,酵母,哺乳動物細胞系和昆蟲細胞)中高效運行。對于包括質(zhì)譜法和酶活性測量在內(nèi)的生化分析,可以使用Spot-Trap通過免疫沉淀快速有效地分離Spot-Tag-fusion蛋白及其相互作用因子。
右邊是蛋白質(zhì)印跡,證明了從全細胞提取物中得到的p53的有效性。在這種情況下,使用p53-Trap對HEK 293T細胞的蛋白質(zhì)提取物進行p53的免疫沉淀(IP)。通過SDS-PAGE和隨后的Western印跡分離對輸入(I),未結(jié)合的流通量(FT)和結(jié)合的(B)組分進行Western分析。