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BD流式細(xì)胞儀的工作原理
閱讀：676 發(fā)布時(shí)間：2023-2-13
BD流式細(xì)胞儀采用流式細(xì)胞術(shù)是一種對(duì)處在液流中的細(xì)胞或其它生物微粒如細(xì)菌)逐個(gè)進(jìn)行多參數(shù)的快速定量分析和分選的技術(shù)。
工作原理是:將待測細(xì)胞經(jīng)特異性熒光染料染色后放入樣品管中，在氣體的壓力下進(jìn)入充滿勒液的流動(dòng)室。在鞘液的約束下細(xì)胞排成單列由流動(dòng)室的噴嘴噴出，形成細(xì)胞柱。該設(shè)備通常以激光作為發(fā)光源。經(jīng)過聚焦整形后的光束,垂直照射在樣品流上，被熒光染色的細(xì)胞在激光束的照射下，產(chǎn)生散射光和激發(fā)熒光。這兩種信號(hào)同時(shí)被前向光電二極管和90°方向的光電倍增管接收。光散射信號(hào)在前向小角度進(jìn)行檢測，這種信號(hào)基本上反映了細(xì)胞體積的大??；熒光信號(hào)的接受方向與激光束垂直，經(jīng)過一系列雙色性反射鏡和帶通濾光片的分離，形成多個(gè)不同波長的熒光信號(hào)。這些熒光信號(hào)的強(qiáng)度代表了所測細(xì)胞膜表面抗原的強(qiáng)度或其核內(nèi)物質(zhì)的濃度，經(jīng)光電倍增管接收后可轉(zhuǎn)換為電信號(hào)，再通過模/數(shù)轉(zhuǎn)換器，將連續(xù)的電信號(hào)轉(zhuǎn)換為可被計(jì)算機(jī)識(shí)別的數(shù)字信號(hào)。計(jì)算機(jī)把所測量到的各種信號(hào)進(jìn)行計(jì)算機(jī)處理，將分析結(jié)果顯示在計(jì)算機(jī)屏幕上，也可以打印出來，還可以數(shù)據(jù)文件的形式存儲(chǔ)在硬盤上以備日后的查詢或進(jìn)一步分析。
本公司提供的二手BD流式細(xì)胞儀具有高度的熒光測量靈敏度，一般以能檢測到單個(gè)微球上少標(biāo)有FITC或PE熒光分子數(shù)目來表示,一般現(xiàn)在FCM均可達(dá)到<600個(gè)熒光分子。