RIPA裂解液

產(chǎn)品貨號(hào)：T16003

產(chǎn)品規(guī)格：100ml

保存條件：運(yùn)輸4℃，長(zhǎng)期保存-20℃

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

    RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)是一種傳統(tǒng)的細(xì)胞組織快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白 樣品可以用于常規(guī)的Western、IP等。RIPA的本意是Radio Immunoprecipitation Assay。本產(chǎn)品RIPA裂解液的主要成分為50mM Tris(pH7.4)，150mM NaCl，1% Triton X-100，1% sodium deoxycholate，0.1% SDS等。

操作步驟：

• 對(duì)于培養(yǎng)細(xì)胞樣品：

• 對(duì)于貼壁細(xì)胞，去除培養(yǎng)液，用PBS、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血清中的蛋白沒(méi)有  干擾，可以不洗)。按照每10⁷細(xì)胞加入200微升裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸細(xì)胞1-2秒后，細(xì)胞就會(huì)被裂解。
• 對(duì)于懸浮細(xì)胞，離心收集細(xì)胞，用手指把細(xì)胞用力彈散。按照每10⁷細(xì)胞加入200微升裂解液  的比例加入裂解液。用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒(méi)有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多，可適量添加裂解液。
• 充分裂解后，10000-14000rpm離心5-10分鐘，取上清，即可進(jìn)行后續(xù)的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。

• 對(duì)于組織樣品：

• 把組織剪切成細(xì)小的碎片。
• 按照每20毫克組織加入100-200微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添 加更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品，可以適當(dāng)減少裂解液的用量。)
• 用玻璃勻漿器冰上勻漿，直至充分裂解。
• 充分裂解后，10000-14000rpm離心5-10分鐘，取上清，即可進(jìn)行后續(xù)的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
• 如果組織樣品本身非常細(xì)小，可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解，通過(guò)強(qiáng)烈vortex使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清，用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

注意事項(xiàng) ：

• 裂解得到的蛋白樣品，由于含有較高濃度的去垢劑干擾，不能用Bradford法測(cè)定蛋白濃度，可以選用本公司生產(chǎn)的BCA蛋白定量試劑盒測(cè)定蛋白濃度。
• 用戶(hù)使用前可根據(jù)需要加入蛋白酶抑制劑如PMSF或者根據(jù)需要再加入leupeptin，aprotinin等其它抑制劑。
• 裂解液中SDS 4℃保存易沉淀析出，使用前應(yīng)該37℃-60℃水浴重新溶解*后回復(fù)到室溫使用。
• 裂解蛋白的所有步驟都需在冰上或4℃進(jìn)行。

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尚寶主營(yíng)產(chǎn)品：

試劑盒

· 細(xì)胞活力/毒性檢測(cè)試劑盒

· 蛋白提取相關(guān)試劑盒

· 蛋白定量/濃度測(cè)定試劑盒

· 核酸純化/提取相關(guān)試劑盒

· 核酸檢測(cè)試劑盒

· 染色試劑盒

· 生化試劑盒檢測(cè)試劑盒

染色類(lèi)

染色液     固定液    脫鈣液     染色輔助試劑     指示劑     

熒光染料

通用Buffer      常規(guī)溶液  

核酸類(lèi)       蛋白與免疫   

生化試劑    病理常用染色試劑   

細(xì)胞類(lèi)      細(xì)胞培養(yǎng)基 

標(biāo)準(zhǔn)品      ELISA 試劑盒   

DNA Marker   耗材

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公司擁有一批專(zhuān)業(yè)的博士、碩士研發(fā)人員，專(zhuān)注于生物產(chǎn)品的不斷完善和創(chuàng)新。產(chǎn)品覆蓋面廣，品質(zhì)可靠。先后開(kāi)發(fā)了涵蓋分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、生物醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域的多種試劑及試劑盒。同時(shí)，尚寶生物公司提供各種常規(guī)生化試劑，可隨時(shí)為廣大科研工作者提供各類(lèi)專(zhuān)業(yè)試劑。在質(zhì)量方面，尚寶生物謹(jǐn)記公司信念：質(zhì)量高于一切。所有研發(fā)的產(chǎn)品都設(shè)有嚴(yán)謹(jǐn)?shù)纳a(chǎn)流程，科學(xué)的質(zhì)量檢測(cè)方法和成熟的質(zhì)量檢測(cè)程序，我們恪守對(duì)每一位用戶(hù)的承諾：用專(zhuān)業(yè)的態(tài)度做專(zhuān)業(yè)的品牌。同時(shí)，公司組建了一支專(zhuān)業(yè)的技術(shù)服務(wù)隊(duì)伍，能夠?yàn)榭蒲泄ぷ髡咛峁?zhuān)業(yè)的技術(shù)服務(wù)。每一位購(gòu)買(mǎi)尚寶生物產(chǎn)品的用戶(hù)都能夠得到專(zhuān)業(yè)的咨詢(xún)和售后服務(wù)。

尚寶生物公司堅(jiān)持與國(guó)際接軌，注重和*企業(yè)的合作與交流，目前已經(jīng)和Sigma、Thermo、Axygen、Merck、Roche、Amresco、Millipore、Whatman、Corning、Fluka、Serva等較有名企業(yè)結(jié)成緊密的合作伙伴關(guān)系，并提供產(chǎn)品代理、市場(chǎng)咨詢(xún)等多項(xiàng)服務(wù)。公司將一如既往與世界更多品牌合作，為廣大生物科研工作者提供優(yōu)質(zhì)、專(zhuān)業(yè)的服務(wù)。公司理念：“為科研服務(wù)，為生命盡責(zé)”。一個(gè)人能夠走多遠(yuǎn)，取決于與誰(shuí)同行。尚寶生物公司期待與各同行精誠(chéng)合作，為廣大科研工作者提供更加優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和服務(wù)。