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Semrock BrightLine單波段濾光片組-1
用于FISH和密集復(fù)用
Semrock BrightLine單波段濾光片組-1
幫助緩解與癌癥的上游斗爭(zhēng),有明亮的FISH熒光濾波裝置。
熒光原位雜交,或FISH,是一種令人興奮的熒光成像技術(shù),可以基于分子診斷學(xué)進(jìn)行臨床規(guī)模的遺傳篩選。開(kāi)創(chuàng)了硬鍍膜的BrightLine濾光片,它比舊的、軟鍍膜的熒光濾光片更亮有更好的對(duì)比度,從而提供更快更準(zhǔn)確的測(cè)量。獨(dú)立評(píng)估表明,使用BrightLine濾光片可以在短至一半曝光時(shí)間內(nèi)獲得FISH圖像。
換用BrightLine濾光片是來(lái)顯著增加,你的FISH圖像的質(zhì)量的簡(jiǎn)單和便宜的方式。
更好的熒光濾光片真的能起到作用嗎?
BrightLine“抗燒毀"濾光片在多年的研究和臨床領(lǐng)域都得到了廣泛的測(cè)試。BrightLine FISH濾光片組也進(jìn)行了廣泛的獨(dú)立測(cè)試。這里有一些結(jié)果的例子。無(wú)論你是否正在通過(guò)點(diǎn)數(shù)計(jì)數(shù)來(lái)發(fā)現(xiàn)和分析中期傳播或評(píng)分細(xì)胞,使用BrightLine濾光片組來(lái)可以顯著提升你的FISH分析的速度和準(zhǔn)確性。
使用競(jìng)爭(zhēng)對(duì)手濾光片組(左)和BrightLine濾光片組(右),與Spectrum Red中的CEP 3探針雜交的人類腫瘤(Vysis UroVysionTM分析的一部分,400X放大倍數(shù))使用相等的曝光時(shí)間進(jìn)行并行獨(dú)立比較)。 照片由Tina Bocker Edmonston博士提供。
BrightLine濾光片可縮短集成時(shí)間,從而加快成像速度 - 尤其適用于中期發(fā)現(xiàn)等自動(dòng)化任務(wù)。這個(gè)獨(dú)立的行業(yè)測(cè)試比較了BrightLine FISH濾光片組和競(jìng)爭(zhēng)對(duì)手濾光片組分別所需的集成時(shí)間。基于Zeiss Axio Imager顯微鏡的自動(dòng)化系統(tǒng),發(fā)現(xiàn)了具有相同圖像強(qiáng)度的中期擴(kuò)展。
BrightLine®單波段濾光片組用于FISH和密集復(fù)用
濾光片組/主要熒光 | 激發(fā)(CWL/BW) | 發(fā)射(CWL/BW) | 邊緣二向色 | 濾光片組零件號(hào)/零組零件編號(hào) |
SpAqua-C SpectrumAqua™, DEAC | 438/24 | 483/32 | 458 nm | SpAqua-C-000 SpAqua-C-000-ZERO |
SpGr-B SpectrumGreen™, FITC, Alexa Fluor® 488 | 494/20 | 527/20 | 506 nm | SpGr-B-000 SpGr-B-000-ZERO |
SpGold-B SpectrumGold™, Alexa Fluor® 532 | 534/20 | 572/28 | 552 nm | SpGold-B-000 SpGold-B-000-ZERO |
SpOr-B SpectrumOrange™, Cy3™, Rhodamine, Alexa Fluor® 555 | 543/22 | 586/20 | 562 nm | SpOr-B-000 pOr-B-000-ZERO |
SpRed-B SpectrumRed™, Texas Red, Alexa Fluor® 668 & 594 | 586/20 | 628/32 | 605 nm | SpRed-B-000 SpRed-B-000-ZERO |
BrightLine®多波段/組合用于FISH
濾光片組/主要熒光 | 單波段激發(fā) (CWL/BW) | 多波段激發(fā) (CWL/BW) | 多波段發(fā)射 (CWL/BW) | 多邊緣二向色 | 濾光片組編號(hào) |
DA/SpGr/SpRed-C (Combination set) Blue: DAPI | Ex1: 387/11 | Ex5: 407/14 | 457/22 | 436 nm | DA/SpGr/SpRed-C-000 |
Green: FITC, Spectrum Green | Ex2: 494/20 | Ex4: 494/20 Ex5: 494/20 | 530/20 | 514 nm | |
Red: Spectrum Red, Texas Red | Ex3: 575/25 | Ex4: 576/20 Ex5: 576/20 | 628/28 | 604 nm | |
濾光片組有3個(gè)單獨(dú)的激發(fā)器,一個(gè)雙頻激發(fā)器和一個(gè)三波段激發(fā)器,外加一個(gè)三波段發(fā)射器和一個(gè)多邊緣的二向色體。 | |||||
DA-SpAq/SpGr/SpOr-A (Combination set) Blue: DAPI | Ex1: 340/26 | 465/30 | 444 nm | DA-SpAq/SpGr/ SpOr-A-000 | |
Cyan: CFP, Spectrum Aqua | Ex2: 427/10 | Ex6: 422/30 | 465/30 | 444 nm | |
Green: FITC, Spectrum Green | Ex3: 504/12 | Ex5: 503/18 Ex6: 503/18 | 537/20 | 520 nm | |
Orange: Spectrum Orange | Ex4: 575/15 | Ex5: 572/18 Ex6: 572/18 | 623/50 | 590 nm | |
濾光片組有四個(gè)單獨(dú)的激發(fā)器,一個(gè)雙頻激發(fā)器和一個(gè)三波段激發(fā)器,外加一個(gè)三波段發(fā)射器和一個(gè)多邊緣的二向色體。 |
光學(xué)濾光片簡(jiǎn)介
濾光片選擇性地透射光譜的一部分,同時(shí)拒絕透射其余部分。愛(ài)特蒙特光學(xué)的光學(xué)濾光片常用于顯微鏡、光譜學(xué)、化學(xué)分析和機(jī)器視覺(jué),可提供各種過(guò)濾類型和精度等級(jí)。本應(yīng)用筆記介紹了用于制造愛(ài)特蒙特光學(xué)濾光片的不同技術(shù)、一些關(guān)鍵規(guī)范的定義以及愛(ài)特蒙特光學(xué)提供的各種濾光片的描述。
光學(xué)濾光片關(guān)鍵術(shù)語(yǔ)
雖然濾光片與其他光學(xué)組件有許多相同的規(guī)范,但是為了有效地了解并確定哪種濾光片適合您的應(yīng)用,應(yīng)該了解濾光片中的許多特定規(guī)范。
中心波長(zhǎng) (CWL)
用于定義帶通濾光片的中心波長(zhǎng)描述頻譜帶寬的中點(diǎn),濾光片在此之上傳輸。傳統(tǒng)的鍍膜光學(xué)濾光片傾向于在中心波長(zhǎng)附近達(dá)到大的透射率,而鍍加硬膜的光學(xué)濾光片往往在光譜帶寬上有相當(dāng)平坦的傳輸輪廓。
帶寬
帶寬是一個(gè)波長(zhǎng)范圍,用于表示頻譜通過(guò)入射能量穿過(guò)濾光片的特定部分。帶寬又稱為FWHM(圖1)。
圖 1: 中心波長(zhǎng)和半峰全寬說(shuō)明
半峰全寬 (FWHM)
FWHM
描述帶通濾光片將傳輸?shù)念l譜帶寬。該帶寬的上限和下限是在濾光片達(dá)到大透射率的 50% 時(shí)的波長(zhǎng)下定義的。例如,如果濾光片的大透射率是 90%,那么濾光片達(dá)到透射率之 45% 時(shí)的波長(zhǎng)將定義 FWHM 的上限和下限。10 納米或更低的 FWHM 被認(rèn)為是窄帶,通常用于激光凈化和化學(xué)檢測(cè)。25-50 納米的 FWHM 經(jīng)常用于機(jī)器視覺(jué)應(yīng)用;超過(guò) 50 納米的 FHWM 被認(rèn)為是寬帶,通常用于熒光顯微鏡應(yīng)用。
截止范圍
阻斷范圍是用于表示通過(guò)濾光片衰減的能量光譜區(qū)域的波長(zhǎng)間隔(圖2)。阻斷程度通常會(huì)在光密度中定。
圖 2: 截止范圍說(shuō)明
斜率
斜率是通常在邊緣濾光片上定義的規(guī)范,如短波通或長(zhǎng)波通濾光片,用來(lái)描述濾光片從高截止轉(zhuǎn)換為高透射率的帶寬??梢詮母鞣N起點(diǎn)和終點(diǎn)定斜率,作為截止波長(zhǎng)的百分比。愛(ài)特蒙特光學(xué)有限公司通常將斜率定義為從 10% 傳輸點(diǎn)到 80% 傳輸點(diǎn)的距離。例如,將期望具有 1% 斜率的 500 納米長(zhǎng)波通濾光片在 5 納米(500 納米的 1%)帶寬上從 10% 的透射率轉(zhuǎn)換為 80% 的透射率。
光密度(OD)
光密度描述被濾光片阻斷或拒絕的能量量。高光密度值表示低透射率,低光密度則表示高透射率。6.0或更大的光密度用于兩端的阻斷需求,如拉曼光譜或熒光顯微鏡。3.0-4.0的光密度是激光分離和凈化、機(jī)器視覺(jué)和化學(xué)檢測(cè)的理想選擇,而 2.0 或更少的光密度是顏色排序和分離光譜順序的理想選擇。
圖3:光密度說(shuō)明
二向色性濾光片
二向色性濾光片是用于取決于波長(zhǎng)透射率或反射光的濾光片類型;特定波長(zhǎng)范圍透射的光則鑒于不同范圍的光線反射或吸收(圖4)。二向色性濾光片常用于長(zhǎng)波通和短波通應(yīng)用。
圖4:二向色性濾光片鍍膜說(shuō)明
起始波長(zhǎng)
起始波長(zhǎng)是用于表示在長(zhǎng)波通濾光片中透射率增加至50%波長(zhǎng)的術(shù)語(yǔ)。起始波長(zhǎng)由圖5中的λcut-on起始表示。
圖 5:起始波長(zhǎng)說(shuō)明
截止波長(zhǎng)
截止波長(zhǎng)是用于表示在短波通濾光片中透射率降低至50%波長(zhǎng)的術(shù)語(yǔ)。截止波長(zhǎng)由圖6中的λcut-off截止表示。
圖6:截止波長(zhǎng)說(shuō)明
Semrock成功地將穩(wěn)定先進(jìn)的濺射沉積系統(tǒng)與沉積控制技術(shù),不同的預(yù)測(cè)算法,工藝改進(jìn)和批量生產(chǎn)能力相結(jié)合。Semrock性能優(yōu)良的光學(xué)濾光片為生物技術(shù)和分析儀器行業(yè)樹(shù)立了標(biāo)準(zhǔn)。
Semrock濾光片全部由離子束濺射和專有的單基片結(jié)構(gòu)制成,可實(shí)現(xiàn)較高的透射率。更加陡峭的邊緣,準(zhǔn)確的波長(zhǎng)精度和精心優(yōu)化的遮擋意味著更好的對(duì)比度和更快的測(cè)量-即使在紫外線波長(zhǎng)下也是如此。
Semrock濾光片具有很長(zhǎng)的使用壽命和優(yōu)良的性能,可確保獲得優(yōu)良的圖像。與升級(jí)相機(jī)和物鏡的成本相比,它們可能是提高顯微鏡性能的簡(jiǎn)單經(jīng)濟(jì)的方法。
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