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          當(dāng)前位置:目錄:武漢尚恩生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞系>>細(xì)胞>> SNL-027NRK 52E細(xì)胞大鼠腎細(xì)胞NRK 52E國(guó)內(nèi)廠家

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          參考價(jià) 1500
          訂貨量 ≥1
          具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
          1500
          ≥1
          具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
          • 品牌 其他品牌
          • 型號(hào) SNL-027
          • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
          • 所在地 武漢市
          屬性

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          更新時(shí)間:2023-05-31 10:39:29瀏覽次數(shù):739評(píng)價(jià)

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          分子量 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) 分子式 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)
          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 T25瓶
          貨號(hào) SNL-027 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè),能源
          主要用途 實(shí)驗(yàn)
          NRK 52E細(xì)胞大鼠腎細(xì)胞NRK 52E國(guó)內(nèi)廠家
          細(xì)胞名稱大鼠腎細(xì)胞
          細(xì)胞別稱NRK-52E; NRK 52E; NRK52E; NRK clone 52E; Normal Rat Kidney-52E; NRK-E52
          細(xì)胞貨號(hào)SNL-027
          細(xì)胞種屬大鼠
          生長(zhǎng)情況貼壁

          637626500720363713959.jpg

          NRK 52E細(xì)胞大鼠腎細(xì)胞NRK 52E國(guó)內(nèi)廠家

          NRK 52E細(xì)胞大鼠腎細(xì)胞NRK 52E國(guó)內(nèi)廠家

          ------尚恩生物 I8627859203-------

          一、細(xì)胞基本屬性
          細(xì)胞名稱大鼠腎細(xì)胞
          細(xì)胞別稱NRK-52E; NRK 52E; NRK52E; NRK clone 52E; Normal Rat Kidney-52E; NRK-E52
          細(xì)胞貨號(hào)SNL-027
          細(xì)胞種屬大鼠
          生長(zhǎng)情況貼壁
          培養(yǎng)條件H-DMEM+10%FBS+1%雙抗
          培養(yǎng)環(huán)境air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
          二、細(xì)胞培養(yǎng)操作
          換液周期2-3天
          培養(yǎng)基體積T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
          傳代比例1:2-1:4(具體情況視細(xì)胞生長(zhǎng)速度及密度決定)
          傳代方法1.盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基;
          2.加3-4ml 常溫PBS輕輕潤(rùn)洗細(xì)胞10-20s,吸走潤(rùn)洗的PBS;
          3.T25瓶加1ml左右胰m,輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶以使胰m鋪勻瓶底細(xì)胞層;
          4.將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化;
          5.消化到細(xì)胞間隙變大,但未*脫落時(shí)加2-3ml*培養(yǎng)基終止胰m消化;
          6.混勻細(xì)胞,900rpm離心3-5min,棄上清;
          7.加新的*培養(yǎng)基輕輕重懸細(xì)胞,均勻分到新的培養(yǎng)瓶里;
          8.補(bǔ)足*培養(yǎng)基,將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);
          注意事項(xiàng)不同品牌胰m消化時(shí)間差別較大,注意嚴(yán)格控制消化時(shí)間
          消化傳代細(xì)胞時(shí)吹打細(xì)胞注意盡量輕柔,不要產(chǎn)生過(guò)多氣泡以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
          三、細(xì)胞凍存操作
          凍存液配方92%FBS+8%DMSO(新手建議)或92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(高手建議);
          凍存規(guī)格200-300萬(wàn)/ml,1ml每管
          凍存方法1. 離心獲得細(xì)胞沉淀后,加配置好的凍存液輕輕重懸細(xì)胞;
          2. 將細(xì)胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標(biāo)記的凍存管;
          3. 將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒,放入-80度冰箱過(guò)夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存;沒(méi)有程序凍存盒的實(shí)驗(yàn)室,加入細(xì)胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min,再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入-80度過(guò)夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存
          注意事項(xiàng)凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮后及時(shí)復(fù)蘇一管檢查細(xì)胞凍存活性,若有異常,及時(shí)調(diào)整實(shí)驗(yàn)方案

          處理步驟T25瓶凍存管
          1快遞保存溫度室溫液氮長(zhǎng)期保存或-80度3天以內(nèi)
          2初步平衡T25瓶表面消毒后,放37度培養(yǎng)箱平衡復(fù)溫2h以上無(wú)須平衡,直接放入-80冰箱或者液氮罐保存
          3處理方式吸走大部分培養(yǎng)基,留10-12ml培養(yǎng)基,拍照并觀察細(xì)胞。密度80%以上即可吸走培養(yǎng)基消化傳代,若密度低于80%可以留10-12 ml繼續(xù)培養(yǎng)至細(xì)胞密度80%以上37度水浴搖晃盡快融化細(xì)胞,直接在凍存管內(nèi)將細(xì)胞離心。離心轉(zhuǎn)速以離心力150g(約900rpm)左右,1min為宜,棄上清,沉淀用新鮮培養(yǎng)基重懸后接種到10cm培養(yǎng)皿,顯微鏡下觀察細(xì)胞并拍照,24h后換液一次
          4接種方式T25傳代第①次建議1:2傳代,即瓶T25傳成兩瓶一管細(xì)胞建議接種到10cm培養(yǎng)皿或者T25瓶
          5注意事項(xiàng)若細(xì)胞出現(xiàn)漂浮,T25瓶不開(kāi)封,放至37度培養(yǎng)箱過(guò)夜,若細(xì)胞貼壁即說(shuō)明活性正常,按正常操作消化傳代即可;若未貼壁,收集細(xì)胞培養(yǎng)基離心后,將細(xì)胞重懸接種到新的培養(yǎng)瓶中,同時(shí)原瓶還貼壁的細(xì)胞加培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)
          發(fā)貨T25瓶裝滿大約有75ml培養(yǎng)基,可以收集起來(lái),1500rpm離心5min后,取上清4度保存,用于培養(yǎng)細(xì)胞,以平穩(wěn)過(guò)渡到客戶自己的培養(yǎng)基
          收貨時(shí)若發(fā)現(xiàn)干冰化完,檢查凍存管是否融化,若已融化需直接離心細(xì)胞接種觀察,若未融化可以將細(xì)胞按正常步驟保存,以上情況及時(shí)反饋
          干冰發(fā)貨的細(xì)胞只能在-80保存3天左右,長(zhǎng)時(shí)間保存會(huì)出現(xiàn)活性下降。干冰發(fā)貨均為兩支,客戶先復(fù)蘇一支,若復(fù)蘇失敗及時(shí)聯(lián)系我方并在我方指導(dǎo)下復(fù)蘇第二支。若客戶同時(shí)復(fù)蘇兩支均狀態(tài)不佳,我方將不提供免費(fèi)售后服務(wù)




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