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          當前位置:目錄:武漢尚恩生物技術(shù)有限公司>>細胞系>>細胞>> SNL-129DU145細胞人前列腺癌細胞培養(yǎng)操作

          DU145細胞人前列腺癌細胞培養(yǎng)操作
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          參考價 1500
          訂貨量 ≥1
          具體成交價以合同協(xié)議為準
          1500
          ≥1
          具體成交價以合同協(xié)議為準
          • 品牌 其他品牌
          • 型號 SNL-129
          • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
          • 所在地 武漢市
          屬性

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          更新時間:2023-05-24 11:00:08瀏覽次數(shù):778評價

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          分子量 詳見說明書 分子式 詳見說明書
          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 T25瓶
          貨號 SNL-129 應用領域 化工,生物產(chǎn)業(yè),能源
          主要用途 實驗
          DU145細胞人前列腺癌細胞培養(yǎng)操作
          細胞名稱:人前列腺癌細胞
          細胞別稱:DU145; DU-145; Du-145; DU 145; DU_145; Duke University 145
          細胞貨號:SNL-129
          細胞種屬:人
          生長情況:貼壁

          637626500720363713959.jpg

          DU145細胞人前列腺癌細胞培養(yǎng)操作

          DU145細胞人前列腺癌細胞培養(yǎng)操作

          ---尚恩生物 186278592O3---

          一、細胞基本屬性
          細胞名稱:人前列腺癌細胞
          細胞別稱:DU145; DU-145; Du-145; DU 145; DU_145; Duke University 145
          細胞貨號:SNL-129
          細胞種屬:人
          生長情況:貼壁
          培養(yǎng)條件:F12K+10%FBS+1%雙抗

          培養(yǎng)環(huán)境:air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%


          二、細胞培養(yǎng)操作
          換液周期2-3天
          培養(yǎng)基體積T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
          傳代比例1:2-1:4(具體情況視細胞生長速度及密度決定)
          傳代方法1.盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基;
          2.加3-4ml 常溫PBS輕輕潤洗細胞10-20s,吸走潤洗的PBS;
          3.T25瓶加1ml左右胰m,輕輕晃動培養(yǎng)瓶以使胰m鋪勻瓶底細胞層;
          4.將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化;
          5.消化到細胞間隙變大,但未*脫落時加2-3ml*培養(yǎng)基終止胰m消化;
          6.混勻細胞,900rpm離心3-5min,棄上清;
          7.加新的*培養(yǎng)基輕輕重懸細胞,均勻分到新的培養(yǎng)瓶里;
          8.補足*培養(yǎng)基,將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);
          注意事項不同品牌胰m消化時間差別較大,注意嚴格控制消化時間

          消化傳代細胞時吹打細胞注意盡量輕柔,不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細胞狀態(tài)。


          三、細胞凍存操作
          凍存液配方92%FBS+8%DMSO(新手建議)或92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(高手建議);
          凍存規(guī)格200-300萬/ml,1ml每管
          凍存方法1.消化并離心獲得細胞沉淀后,加配置好的凍存液輕輕重懸細胞;
          2.將細胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標記的凍存管;
          3.將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒,放入-80度冰箱過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存;沒有程序凍存盒的實驗室,加入細胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min,再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入-80度過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存
          注意事項凍存細胞轉(zhuǎn)入液氮后及時復蘇一管檢查細胞凍存活性,若有異常,及時調(diào)整實驗方案


          收貨處理方式(T25瓶/凍存管)

          T25】

          ①快遞保存溫度:室溫

          ②初步平衡:T25瓶表面消毒后,放37度培養(yǎng)箱平衡復溫2h以上

          ③處理方式:吸走大部分培養(yǎng)基,留10-12ml培養(yǎng)基,拍照并觀察細胞。密度80%以上即可吸走培養(yǎng)基消化傳代,若密度低于80%可以留10-12 ml繼續(xù)培養(yǎng)至細胞密度80%以上

          ④接種方式:T25傳代第①次建議1:2傳代,即瓶T25傳成兩瓶

          ⑤注意事項:若細胞出現(xiàn)漂浮,T25瓶不開封,放至37度培養(yǎng)箱過夜,若細胞貼壁即說明活性正常,按正常操作消化傳代即可;若未貼壁,收集細胞培養(yǎng)基離心后,將細胞重懸接種到新的培養(yǎng)瓶中,同時原瓶還貼壁的細胞加培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)
          發(fā)貨T25瓶裝滿大約有75ml培養(yǎng)基,可以收集起來,1500rpm離心5min后,取上清4度保存,用于培養(yǎng)細胞,以平穩(wěn)過渡到客戶自己的培養(yǎng)基

          【凍存管】

          ①快遞保存溫度:液氮長期保存或-80度3天以內(nèi)

          ②初步平衡:無須平衡,直接放入-80冰箱或者液氮罐保存

          ③處理方式:37度水浴搖晃盡快融化細胞,直接在凍存管內(nèi)將細胞離心。離心轉(zhuǎn)速以離心力150g(約900rpm)左右,1min為宜,棄上清,沉淀用新鮮培養(yǎng)基重懸后接種到10cm培養(yǎng)皿,顯微鏡下觀察細胞并拍照,24h后換液一次

          ④接種方式:一管細胞建議接種到10cm培養(yǎng)皿或者T25瓶

          ⑤注意事項:收貨時若發(fā)現(xiàn)干冰化完,檢查凍存管是否融化,若已融化需直接離心細胞接種觀察,若未融化可以將細胞按正常步驟保存,以上情況及時反饋
          干冰發(fā)貨的細胞只能在-80保存3天左右,長時間保存會出現(xiàn)活性下降。干冰發(fā)貨均為兩支,客戶先復蘇一支,若復蘇失敗及時聯(lián)系我方并在我方指導下復蘇第二支。若客戶同時復蘇兩支均狀態(tài)不佳,我方將不提供免費售后服務

          特殊情況:

          1.若培養(yǎng)瓶或者凍存管出現(xiàn)破碎或漏液情況,及時拍照聯(lián)系銷售反饋,按指導進行進一步處理。若只是外包裝破損一般不影響培養(yǎng)瓶和凍存管,請放心使用。

          2.若無法觀察到細胞,建議收集細胞培養(yǎng)基,1200rpm離心5min,觀察細胞沉淀量,并用少量培養(yǎng)基重懸沉淀后,取部分懸液放到計數(shù)板或者載玻片上觀察細胞。

          3.部分細胞增殖較快,發(fā)貨細胞量較多時,培養(yǎng)基可能出現(xiàn)顏色變黃現(xiàn)象。繼續(xù)培養(yǎng)使用此類培養(yǎng)基時,需要及時觀察培養(yǎng)基顏色變化,縮短培養(yǎng)基換液周期,并每瓶多加2-3ml培養(yǎng)基。

          4.收貨當天不處理細胞時,T25瓶可以消毒拆封口膜后不擰開瓶蓋放37度培養(yǎng)箱靜置過夜,但不建議超過24h;凍存管可以直接放液氮長期保存或-80度3天以內(nèi),必須一周內(nèi)復蘇一只培養(yǎng)檢查,否則將超過一周售后期。


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