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          小鼠真皮成纖維細胞
          • 小鼠真皮成纖維細胞
          參考價面議
          具體成交價以合同協(xié)議為準

          參考價:¥ 面議

          具體成交價以合同協(xié)議為準
          • 其他品牌 品牌
          • SNP-M087 型號
          • 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
          • 武漢市 所在地
          規(guī)格

          屬性

          供貨周期:現(xiàn)貨 規(guī)格:T25瓶 貨號:SNP-M087 應(yīng)用領(lǐng)域:生物產(chǎn)業(yè) 主要用途:實驗

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          更新時間:2023-04-20 09:07:45瀏覽次數(shù):609評價

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          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 T25瓶
          貨號 SNP-M087 應(yīng)用領(lǐng)域 生物產(chǎn)業(yè)
          主要用途 實驗
          尚恩生物依托國際化的*技術(shù)及多年專業(yè)化的原代細胞分離培養(yǎng)經(jīng)驗,能夠為您提供高品質(zhì)的原代細胞、原代細胞提取物定制服務(wù)。集結(jié)豐富經(jīng)驗的人才,并配備了整套實驗設(shè)備,全程自主研發(fā),嚴控開發(fā)流程,保障產(chǎn)品質(zhì)量,緊抓售后服務(wù),可以提供高質(zhì)量的小鼠真皮成纖維細胞。已與國內(nèi)外多家科研單位、藥企、以及醫(yī)院等建立了良好的合作關(guān)系,成為生物醫(yī)藥行業(yè)的誠信伙伴和堅強后盾。

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          一、細胞基本屬性

          貨號:SNP-M087

          產(chǎn)品名稱:小鼠真皮成纖維細胞

          物種:小鼠

          組織來源:皮膚組織

          細胞簡介:細胞分離自真皮組織;真皮,位于表皮深層,向下與皮下組織相連,真皮結(jié)締組織的膠原纖維和彈性纖維互相交織在一起,埋于基質(zhì)內(nèi)。其內(nèi)分布著各種結(jié)締組織細胞和大量的膠原纖維彈性纖維,使皮膚既有彈性,又有韌性。其由兩層組成——乳頭層與網(wǎng)狀層。真皮的結(jié)構(gòu)組成是膠原蛋白、彈性纖維以及基質(zhì)。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的真皮成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細胞基本貼壁*,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質(zhì)透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。真皮成纖維細胞在生理條件下的主要功能包括:構(gòu)造和維持組織的正常形態(tài),合成和釋放細胞外基質(zhì)以及組織損傷后及時大量聚集修復(fù)損傷組織。

          方法簡介:采用先中性蛋白酶消化、后胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10^5cells/瓶。

          配套體系:成纖維體系

          發(fā)貨形式:T25瓶(1×106左右)

          規(guī)格:5×10^5cells/T25瓶

          培養(yǎng)條件:具體培養(yǎng)條件詳詢尚恩生物細胞培養(yǎng)技術(shù)專員

          培養(yǎng)環(huán)境:37℃,5%二氧化碳

          我們推薦使用尚恩生物小鼠真皮成纖維細胞專用*培養(yǎng)基(產(chǎn)品貨號:SNPM-M087)作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。


          二、細胞培養(yǎng)操作

          換液周期2-3天
          培養(yǎng)基體積T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
          傳代比例1:2-1:4(具體情況視細胞生長速度及密度決定)
          傳代方法1.盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基
          2.加3-4ml 常溫PBS輕輕潤洗細胞10-20s,吸走潤洗的PBS;
          3.T25瓶加1ml左右,輕輕晃動培養(yǎng)瓶以使鋪勻瓶底細胞層;
          4.將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化;
          5.消化到細胞間隙變大,但未*脫落時加2-3ml*培養(yǎng)基終止消化;
          6.混勻細胞,900rpm離心3-5min,棄上清;
          7.加新的*培養(yǎng)基輕輕重懸細胞,均勻分到新的培養(yǎng)瓶里;
          8.補足*培養(yǎng)基,將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);
          注意事項不同品牌消化時間差別較大,注意嚴格控制消化時間

          消化傳代細胞時吹打細胞注意盡量輕柔,不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細胞狀態(tài)。


          三、細胞凍存操作
          凍存液配方92%FBS+8%DMSO(新手推薦)或92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(高手推薦);
          凍存規(guī)格200-300萬/ml,1ml每管
          凍存方法1.消化并離心獲得細胞沉淀后,加配置好的凍存液輕輕重懸細胞;
          2.將細胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標記的凍存管;
          3.將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒,放入-80度冰箱過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存;沒有程序凍存盒的實驗室,加入細胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min,再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入-80度過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存

          注意事項凍存細胞轉(zhuǎn)入液氮后及時復(fù)蘇一管檢查細胞凍存活性,若有異常,及時調(diào)整實驗方案


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          等.....


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