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          多功能熒光酶標(biāo)儀與光吸收酶標(biāo)儀的不同之處

          閱讀:1607        發(fā)布時(shí)間:2019/4/9
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             多功能熒光酶標(biāo)儀與光吸收酶標(biāo)儀的不同之處
            酶標(biāo)儀是構(gòu)成酶免檢驗(yàn)工作站的其中一種醫(yī)療器械,還有一個(gè)比較重要的設(shè)備是洗板機(jī),酶標(biāo)儀有多功能熒光酶標(biāo)儀和光吸收酶標(biāo)儀之分,那么多功能熒光酶標(biāo)儀原理與光吸收酶標(biāo)儀原理有什么區(qū)別呢?具體內(nèi)容如下所示:
            多功能熒光酶標(biāo)儀原理
            由光源氙弧燈發(fā)出的光通過(guò)切光器使其變成斷續(xù)之光以及激發(fā)光單色器變成單色光后,此光即為熒光物質(zhì)的激發(fā)光,被測(cè)的熒光物質(zhì)在激發(fā)光照射下所發(fā)出的熒光,經(jīng)過(guò)單色器變成單色熒光后照射于測(cè)樣品用的光電倍增管上,由其所發(fā)生的光電流經(jīng)過(guò)放大器放大輸至記錄儀,激發(fā)光單色器和熒光單色器的光柵均由電動(dòng)機(jī)帶動(dòng)的凸輪所控制,當(dāng)測(cè)繪熒光發(fā)射光譜時(shí),將激發(fā)光單色器的光柵,固定在zui適當(dāng)?shù)募ぐl(fā)光波長(zhǎng)處,而讓熒光單色器凸輪轉(zhuǎn)動(dòng),將各波長(zhǎng)的熒光強(qiáng)度訊號(hào)輸出至記錄儀上,所記錄的光譜即發(fā)射光譜。
            當(dāng)測(cè)繪熒光激發(fā)光譜時(shí),將熒光單色器的光柵固定在zui適當(dāng)?shù)臒晒獠ㄩL(zhǎng)處,只讓激發(fā)光單色口的凸輪轉(zhuǎn)動(dòng),將各波長(zhǎng)的激發(fā)光的強(qiáng)度訊號(hào)輸出至記錄儀,所記錄的光譜即激發(fā)。
            當(dāng)進(jìn)行樣品溶液的定量分析時(shí),將激發(fā)光單色器固定在所選擇的激發(fā)光波長(zhǎng)處,將熒光單色器調(diào)節(jié)至所選擇的熒光波長(zhǎng)處,由記錄儀得出的信號(hào)是樣品溶液的熒光強(qiáng)度。
            光吸收酶標(biāo)儀原理
            光是電磁波,波長(zhǎng)100nm~400nm稱為紫外光,400nm~780nm之間的光可被人眼觀察到,大于780nm稱為紅外光。光吸收酶標(biāo)儀測(cè)定的原理是在特定波長(zhǎng)下,檢測(cè)被測(cè)物吸光值。jjymafwh
            光通過(guò)被檢測(cè)物,前后的能量差異即是被檢測(cè)物吸收掉的能量,特定波長(zhǎng)下,同一種被檢測(cè)物的濃度與被吸收的能量成定量關(guān)系。
            檢測(cè)單位用OD值表示,OD是opticaldelnsity(光密度)的縮寫,表示被檢測(cè)物吸收掉的光密度,OD=1og(1/trans),其中trans為檢測(cè)物的透光值。根據(jù)Bouger-amberT-beer法則,OD值與光強(qiáng)度成下述關(guān)系:E=OD=logΙ0/Ι其中E表示被吸收的光密度,Ι0為在檢測(cè)物之前的光強(qiáng)度,Ι為從被檢測(cè)物出來(lái)的光強(qiáng)度。
            OD值由下述公式計(jì)算:
            E=OD=C×D×E
            C為檢測(cè)物的濃度
            D為檢測(cè)物的厚度
            E為摩爾因子
            在特定波長(zhǎng)下測(cè)定每一種物質(zhì)都有其特定的波長(zhǎng),在此波長(zhǎng)下,此物質(zhì)能夠吸收zui多的光能量。如果選擇其它的波長(zhǎng)段,就會(huì)造成檢測(cè)結(jié)果的不準(zhǔn)確。因此,在測(cè)定檢測(cè)物時(shí),我們選擇特定的波長(zhǎng)進(jìn)行檢測(cè),稱為測(cè)量波長(zhǎng)。
            但是每一種物質(zhì)對(duì)光能量還存在一定的非特異性吸收,為了消除這種非特異性吸收,我們?cè)龠x取一個(gè)參照波長(zhǎng),以消除這個(gè)不準(zhǔn)確性。在參照波長(zhǎng)下,檢測(cè)物光的吸收zui小。酶標(biāo)儀檢測(cè)波長(zhǎng)和參照波長(zhǎng)的吸光值之差可以消除非特異性吸收。

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