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          WB實驗詳細(xì)步驟及用到的相關(guān)試劑匯總

          時間:2024/6/17閱讀:875
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          以下是 WB 實驗的詳細(xì)步驟及相關(guān)試劑耗材匯總:


          一、實驗步驟

          1. 蛋白提取:使用適當(dāng)?shù)牧呀庖禾崛〉鞍住?br style="margin: 0px; padding: 0px; outline: 0px; max-width: 100%; color: rgba(0, 0, 0, 0.9); font-family: system-ui, -apple-system, BlinkMacSystemFont, " helvetica="" pingfang="" hiragino="" sans="" microsoft="" yahei="" font-size:="" letter-spacing:="" text-align:="" white-space:="" background-color:="" box-sizing:="" border-box="" overflow-wrap:="" break-word=""/>2. 蛋白定量:采用 Bradford 法或 BCA 法等測定蛋白濃度。
          3. SDS-PAGE 電泳:配制分離膠和濃縮膠,上樣進行電泳。
          4. 轉(zhuǎn)膜:將蛋白從凝膠轉(zhuǎn)移到 PVDF 或 NC 膜上。
          5. 封閉:用封閉液封閉膜。
          6. 一抗孵育:加入一抗,室溫或 4℃孵育。
          7. 洗滌:用洗滌液多次洗滌膜。
          8. 二抗孵育:加入相應(yīng)的二抗,孵育后洗滌。
          9. 顯色:使用化學(xué)發(fā)光試劑顯色,曝光并成像。

          二、試劑耗材

          1. 試劑:裂解液、PBS、蛋白上樣緩沖液、電泳緩沖液、轉(zhuǎn)膜緩沖液、封閉液、一抗、二抗、化學(xué)發(fā)光試劑等。
          2. 耗材:移液器及槍頭、離心管、培養(yǎng)皿、電泳槽、轉(zhuǎn)膜裝置、PVDF 膜或 NC 膜等。

          需要注意的是,具體的實驗步驟和試劑耗材可能因?qū)嶒灄l件和要求的不同而有所差異。在實驗過程中,要嚴(yán)格按照操作規(guī)范進行,以確保實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。


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