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熒光定量PCR儀的通道分類與選購指南
隨著醫(yī)療器械與電子技術(shù)的深度結(jié)合，使得熒光定量PCR在各個領(lǐng)域，包括人類身份鑒定、病原體檢測、產(chǎn)前診斷、藥物療效考核、腫瘤基因檢驗都有廣泛應(yīng)用。各大醫(yī)院、科研機構(gòu)、實驗室等場所都隨處可見，但是，他們選購熒光定量PCR時可能會遇到這樣的問題：到底選購幾通道的合適呢？
先先帶大家了解一下什么是所謂的通道呢？
顧名思義，通道（channel）指的是針對每一種熒光的檢測器，比如你在一個管中做多個顏色，針對多個靶基因。每個顏色需要一個檢測器來檢測熒光信號的強弱，每一個針對不同顏色的檢測器，就是一個通道。
目前市面上大部分熒光定量PCR儀在設(shè)計時已經(jīng)固定了熒光通道數(shù)，因此大家在選擇儀器時會比較慎重，通道數(shù)選少了擔(dān)心無法滿足后續(xù)新的實驗應(yīng)用；通道數(shù)選多了一是擔(dān)心購置預(yù)算不足，二是擔(dān)心某些通道可能一直閑置，用不上，造成資源浪費。
正因為每個光學(xué)卡夾都是一套獨立的光路，因此您可以根據(jù)實驗室的當(dāng)前的購置預(yù)算以及實驗應(yīng)用需求選擇單、雙、三、四、五或六個熒光通道。如果未來有新的實驗應(yīng)用，也只需要添加相應(yīng)的卡夾即可實現(xiàn)升級，實驗室人員自己就可以進(jìn)行安裝。
除了在通道選擇上的靈活性，帶有卡夾式光路設(shè)計的熒光定量分析儀的好處還在于：每個卡夾都針對特定的波段進(jìn)行了優(yōu)化，因此針對特定的染料的檢測效果。
此外，每個卡夾有8個光源和檢測器，對應(yīng)96孔板的一列，檢測時以一列即8孔為單位進(jìn)行，相較于單孔檢測的方式，速度會更快?？▕A排列于卡夾盒中，檢測時所有卡夾在卡夾盒中移動完成對96孔板的信號收集，完成96孔板6個通道的一次信號采集時間小于3秒，因此也可以大大縮短多重PCR的時間。
目前市面上生產(chǎn)熒光定量PCR 的廠家非常多，如何選擇合適的熒光定量儀器也變得非常重要。面對性能不同的產(chǎn)品，選購商品時也變得眼花繚亂起來。這時，就有人一不下心走進(jìn)了“選購誤區(qū)”。
在使用有些廠家5通道的熒光定量儀時，為了確保實驗結(jié)果的精確性和準(zhǔn)確性都要在實驗中使用ROX（一種熒光染料）或的Referencedye，這些熒光染料都必須單獨使用一個檢測通道。
這樣以來，真正能檢測多重PCR熒光信號的有效通道只有4個，而且使用校正染料可能會增加后期的使用成本。有的熒光定量PCR的檢測通道是只為自已廠家的的熒光染料或試劑開放的，有效檢測通道也絕非像宣傳資料中宣稱的那么多。在購買前確認(rèn)熒光定量PCR儀器的有效檢測通道尤為重要，不能單單只聽宣傳。
考慮多重?zé)晒舛縋CR的通道數(shù)的時候也應(yīng)該從實驗室實際情況出發(fā)，多重PCR并非人人適用、人人可用，因為它使實驗復(fù)雜化了。
熒光定量pcr儀的使用也應(yīng)征求實驗科研人員的建議，畢竟真正使用器械做實驗的還是他們。