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通用細(xì)胞凍存液(含血清)
保存條件 -20℃保存,有效期24個(gè)月。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一。對(duì)細(xì)胞的保種、引種、培養(yǎng)等細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)具有重要意義。在凍存細(xì)胞時(shí),為使細(xì)胞免受冷凍損傷,常常加入冷凍保護(hù)劑,目前使用較為廣泛的是滲透型保護(hù)劑為二甲基亞砜(DMSO),其保護(hù)機(jī)制是在細(xì)胞冷凍懸液*凝固之前滲透到細(xì)胞內(nèi),在細(xì)胞內(nèi)外達(dá)到一個(gè)平衡濃度,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成,從而減少由于冰晶形成造成的細(xì)胞損傷,同時(shí)細(xì)胞內(nèi)的水分也不會(huì)過(guò)分外滲,避免了細(xì)胞過(guò)分脫水皺縮。Bioss 生產(chǎn)的通用細(xì)胞凍存液(含血清)是由DMSO、進(jìn)口胎牛血清(FBS)和DMEM基礎(chǔ)培養(yǎng)基組成,經(jīng)過(guò)數(shù)百種細(xì)胞的凍存驗(yàn)證,證實(shí)該凍存液適用于各種哺乳動(dòng)物原代細(xì)胞,傳代細(xì)胞系和雜交瘤細(xì)胞等細(xì)胞的凍存,細(xì)胞存活率高,儲(chǔ)存穩(wěn)定,使用方便。
使用方法:
1. 培養(yǎng)細(xì)胞至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,顯微鏡觀察其外觀、形態(tài)、有無(wú)污染等,取狀態(tài)良好的細(xì)胞去除舊培養(yǎng)液,用PBS清洗。
2. 去除PBS,如為貼壁生長(zhǎng)細(xì)胞,需用胰蛋白酶消化并用*培養(yǎng)基終止消化,去除胰蛋白酶。
3. 加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液,用吸管輕輕吹打重懸細(xì)胞,使細(xì)胞均勻,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。調(diào)節(jié)凍存液中細(xì)胞的最終密度為5×10
6/ml~1×107/ml。
4. 將細(xì)胞分裝入凍存管中,密閉、不要擰的太緊,避免彎曲變形。
5. 凍存:標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序?yàn)榻禍厮俾?1~-2℃/ min;當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時(shí),可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃時(shí),則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細(xì)胞的凍存管放入-20℃冰箱2h ,然后放入-70℃冰箱中過(guò)夜,取出凍存管,移入液氮容器內(nèi)。
注意事項(xiàng):
1. 請(qǐng)?jiān)诔瑑艄ぷ髋_(tái)內(nèi)無(wú)菌操作,避免污染。
2. 細(xì)胞在凍存前24小時(shí)內(nèi)最好換一次培養(yǎng)液。
3. 初次使用融化后可在 4℃保存 1 個(gè)月,但應(yīng)減少反復(fù)凍融的次數(shù),以免失效。
4. 雜交瘤細(xì)胞凍存時(shí)應(yīng)定期復(fù)蘇,檢查細(xì)胞的活性和分泌抗體的穩(wěn)定性。
5. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。