伴隨著以蛋白抗體類藥物、寡核苷酸藥物、mRNA疫苗、基因和細(xì)胞治療為代表的生物制藥領(lǐng)域的蓬勃發(fā)展，使我們在治療各種棘手疑難雜癥時有更多選擇的機(jī)會。其中每一款新藥的研發(fā)都伴隨著各種成功和失敗，而持之以恒的研究工作始終引領(lǐng)我們通往成功的彼岸，其中生物制劑中的輔料和生產(chǎn)工藝殘留，會直接影響藥物的安全性、有效性和穩(wěn)定性，因此我們著力從輔料、載體及工藝殘留三個方面去開發(fā)切合實(shí)際樣品分析的色譜方法，為生物藥品的質(zhì)控分析提供更多的參考和思路。  

安捷倫在2021年初推出了生物制藥中輔料及生產(chǎn)工藝殘留分析解決方案的版，重點(diǎn)關(guān)注蛋白抗體藥物和基因，以及細(xì)胞治療（CGT）方面相關(guān)的輔料和工藝殘留物分析，隨著近一年國內(nèi)在mRNA疫苗和寡核苷酸藥物領(lǐng)域的快速發(fā)展，我們應(yīng)用實(shí)驗(yàn)室也開發(fā)出更多的分析方法，增加了mRNA疫苗和寡核苷酸領(lǐng)域的新型遞送載體的分析，以及更多的工藝過程中帶入的殘留物分析方案。

生物制藥產(chǎn)品制劑中通用型輔料和常見工藝殘留分析

文集中涉及到大家比較關(guān)注的吐溫 20 和吐溫 80 的分析方案，可以采用衍生和熒光檢測方法對蛋白溶液中的吐溫 80 進(jìn)行分析，同時也可以采用混合基質(zhì)的色譜柱對蛋白溶液中的吐溫 80 分離后用 ELSD 進(jìn)行檢測。當(dāng)然對于新型的表面活性劑泊洛沙姆（P188）我們也有對應(yīng)的方案。進(jìn)一步為了滿足更多應(yīng)用需求，我們開發(fā)了一針進(jìn)樣同時分析吐溫 80（吐溫 20）和泊洛沙姆的方法（圖 1），將分析的效率大大提高。

圖 1. 同時分析實(shí)際蛋白制劑中的 P188 和吐溫 20 所得到的色譜圖

基因和細(xì)胞治療（CGT）藥物輔料和工藝殘留分析

在基因和細(xì)胞治療的產(chǎn)品中我們除了關(guān)注相關(guān)的輔料分析，還更多的考慮了整個生產(chǎn)工藝過程中的殘留對產(chǎn)品的影響，因?yàn)?CGT 的產(chǎn)品一般都是直接注射進(jìn)入人體內(nèi)，對制劑的質(zhì)量要求更高，產(chǎn)品中的殘留物種類和殘留量直接決定制劑的品質(zhì)，因此我們提供了多種殘留物分析的解決方案。包括令大家頭疼的聚乙烯亞胺（PEI）殘留分析，我們開發(fā)了 RP-LC 的方法，以 1290 Infinity II ELSD 作為檢測器，低可以檢測到 1mg/L 濃度的PEI殘留（圖 2）。同時我們還建立了吐溫 20、Triton X-100 和碘克沙醇等等殘留物的分析方法，可以為 CGT 產(chǎn)品的安全性提供更多的保障。

圖 2. 濃度為 1mg/L 的 PEI 的色譜圖（S/N=42）

mRNA 疫苗或核酸藥物遞送載體分析

文集第二版大的亮點(diǎn)是我們增加了 mRNA 疫苗和寡核苷酸藥物遞送載體的分析方案。載體一直是核酸類藥物成功遞送的關(guān)鍵，國外知名藥企持有這些遞送載體的專利權(quán)，當(dāng)然國內(nèi)的研發(fā)企業(yè)也在加緊布局這方面的技術(shù)，所以對于遞送載體的有效分析，可以讓大家的研究工作如虎添翼。我們建立了脂質(zhì)納米粒（LNP）的 HPLC-ELSD 分析方法，對其中的幾種脂質(zhì)能夠得到較好的分離（圖 3），而且在穩(wěn)定性和靈敏度方面也有非常出色的表現(xiàn)。同時基于安捷倫強(qiáng)有力的單桿質(zhì)譜的技術(shù)平臺，我們開發(fā)了 LC-ELSD-MSD 并聯(lián)的分析方法，為深入做脂質(zhì)體成分含量和雜質(zhì)定性研究的團(tuán)隊提供強(qiáng)大的分析技術(shù)。更進(jìn)一步開發(fā)了極具挑戰(zhàn)性的分析方案，包括吐溫、司盤、角鯊烯和陽離子納米脂質(zhì)同時分析的方法，適用于復(fù)雜遞送載體的分析。

圖 3. 脂質(zhì)納米粒（LNP）中四種物質(zhì)的對照品溶液色譜圖

結(jié)語

生物制藥領(lǐng)域的發(fā)展方興未艾，制劑中輔料、載體和相關(guān)工藝殘留分析的道路長且曲折，相信秉持至廣大而精細(xì)微的精神，我們一定可以不斷拓寬前行的道路，為生產(chǎn)高質(zhì)量的生物藥貢獻(xiàn)一份力量。