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“脫”穎而出 | AdvanceBio脫鹽產(chǎn)品重磅發(fā)布
為什么要脫鹽，有什么好處？
保護(hù)您的數(shù)據(jù)和質(zhì)譜儀（MS）
使用質(zhì)譜進(jìn)行完整蛋白和亞基分析時(shí)，非常希望在分析前去除不需要的成分。樣品前處理不僅可用于提高數(shù)據(jù)質(zhì)量，也是保護(hù)質(zhì)譜儀的一種方式。非揮發(fā)性樣品緩沖液會(huì)導(dǎo)致質(zhì)譜中出現(xiàn)鹽加合物以及分子量計(jì)算不準(zhǔn)確。這種鹽還會(huì)快速污染離子源，甚至在儀器內(nèi)部中進(jìn)一步降低靈敏度并造成儀器停機(jī)清潔?；ㄙM(fèi) 10–15 分鐘從樣品基質(zhì)中除去鹽，或?qū)悠方粨Q到 MS 兼容的揮發(fā)性緩沖液中，可以提高質(zhì)量準(zhǔn)確度并保護(hù)儀器。
對(duì)合成寡核苷酸快速脫鹽
對(duì)于詳細(xì)表征、配制或大分子寡核苷酸 HPLC，通過(guò)離子對(duì)反相或強(qiáng)陰離子交換進(jìn)行純化是獲得高純度樣品的關(guān)鍵。但對(duì)于某些應(yīng)用（如微陣列芯片、測(cè)序）中使用或作為 qPCR 引物中使用的小分子寡核苷酸（約 36 個(gè)堿基或更少），采用快速簡(jiǎn)單的脫鹽步驟，即合成、剪切和脫鹽保護(hù)步驟去除小分子副產(chǎn)物就已經(jīng)足夠。
確保使用 InstantPC 標(biāo)記的多聚糖實(shí)現(xiàn)靈敏的 N- 糖分析
使用 InstantPC 試劑盒的 Agilent AdvanceBio Gly-X N- 糖前處理可在最短一小時(shí)內(nèi)完成樣品釋放和 N- 糖標(biāo)記。為獲得這一多聚糖分析的理想分析靈敏度，需要將起始糖蛋白溶于相容緩沖液中。InstantPC 與伯胺反應(yīng)標(biāo)記游離 N- 糖，因此含有伯胺的任何緩沖液將與多聚糖發(fā)生競(jìng)爭(zhēng)標(biāo)記。將緩沖液快速交換為非伯胺緩沖液（如 HEPES），有助于確保用戶獲得盡可能高的靈敏度。
AdvanceBio 脫鹽產(chǎn)品有什么優(yōu)勢(shì)
在 10–15 分鐘內(nèi)完成樣品前處理
用于分子量超過(guò) 5 kDa 的蛋白質(zhì)、大于 10 個(gè)堿基對(duì)的寡核苷酸或核苷酸
有三種產(chǎn)品形式：樣品體積 < 100 µL 或 < 1000 µL 的單個(gè)離心柱，以及樣品體積 < 50 µL 的 96 孔板
< 100 µL 的樣品達(dá)到 99% 鹽去除，< 1000 µL 的樣品達(dá)到 > 95% 鹽去除，樣品回收率 > 90%
在 pH 2.0–13.0 范圍內(nèi)穩(wěn)定
兼容所有常用緩沖液，以及濃度高達(dá) 0.2 mol/L NaOH、0.2 mol/L HCl、1 mol/L 乙酸、8 mol/L 尿素、6 mol/L 鹽酸胍、1% SDS、24% 乙醇、30% 丙醇或 30% 乙腈的溶液
工作原理
凝膠過(guò)濾或體積排阻色譜法（SEC）是一種基于分子大小的分離方法。在這種情況下，使用凝膠過(guò)濾進(jìn)行組分分離，將高于截留分子量的樣品組分與低于截留分子量的所有組分分離。大于 5 kDa 的蛋白質(zhì)或長(zhǎng)度超過(guò) 10 nt 或 bp 的寡核苷酸太大，無(wú)法有效地進(jìn)入顆粒的孔隙結(jié)構(gòu)，因此作為一個(gè)組分首先洗脫。較小的基質(zhì)組分和緩沖液鹽可以更有效地進(jìn)入到顆粒的小孔中，從而保留在色譜柱上。
使用 AdvanceBio 離心柱（< 1000 µL）
部件號(hào) 1980-1105 中包含的半制備級(jí)離心柱旨在用于 50 mL 離心管：一個(gè)用于清洗步驟，另一個(gè)用于收集樣品。如圖所示，離心柱通過(guò)一個(gè)白色的塑料小適配器固定在樣品瓶頂部。部件號(hào) 1980-1105 每包包含四個(gè)可重復(fù)使用的適配器。還可通過(guò)部件號(hào) 1980-1106 額外訂購(gòu) 8 個(gè)適配器。如果您需要離心管，安捷倫提供兩種包裝規(guī)格，部件號(hào) 5610-2049，25/包和 190065200，500/包。
使用 AdvanceBio 離心 96 樣品板
高通量 96 樣品板需要單獨(dú)的 96 孔板進(jìn)行清洗和樣品收集步驟。對(duì)于清洗步驟，我們建議使用部件號(hào) 5043-9308；對(duì)于樣品收集步驟，我們建議使用 V 形 96 樣品板，如 5043-9312。離心期間，AdvanceBio 離心 96 樣品板將堆疊在清洗或樣品收集板的頂部，因此請(qǐng)確保離心機(jī)可以容納堆疊后的孔板（高 5.1 cm）。