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更新時(shí)間:2024-03-26 10:45:06瀏覽次數(shù):66次
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大小鼠動(dòng)物光遺傳學(xué)研究的方法
大小鼠動(dòng)物光遺傳學(xué)研究的方法是一種利用光刺激或抑制轉(zhuǎn)基因光敏神經(jīng)元的神經(jīng)元活動(dòng)的技術(shù),廣泛的垂直集成產(chǎn)品,用于體外、急性或自由移動(dòng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的光遺傳學(xué)光傳輸。
光遺傳學(xué)包括
光源、連接光纖跳線、分束器、光纖旋轉(zhuǎn)接頭和光纖插管。
光源
選擇合適的光源通過(guò)光纖將光傳輸?shù)缴锝M織取決于以下參數(shù):
l 波長(zhǎng)[納米]
l 光功率[mw]或光纖**的強(qiáng)度[mw/mm2]
l 光強(qiáng)度調(diào)制能力
l 功率穩(wěn)定性
光源波長(zhǎng)范圍應(yīng)適應(yīng)給定視蛋白的作用光譜。視蛋白之一是視紫紅質(zhì)通道蛋白(ChR2),它在 430 至 490 nm 范圍內(nèi)具有良好的光電流響應(yīng),峰值約為 470nm。
選擇光源和設(shè)置的其他部分時(shí)要考慮的其他方面包括:
l 光纖尺寸或目標(biāo)區(qū)域
l 站點(diǎn)數(shù)量:單邊、雙邊或多站點(diǎn)
l 多個(gè)站點(diǎn)的共同或獨(dú)立控制
l 慢性植入物或急性探針
l 自由移動(dòng)動(dòng)物的實(shí)驗(yàn)可能需要光纖旋轉(zhuǎn)接頭
光遺傳學(xué)的優(yōu)點(diǎn)主要體現(xiàn)在以下幾個(gè)方面:
非侵入性:光遺傳學(xué)技術(shù)通過(guò)使用光來(lái)控制細(xì)胞行為,不需要物理介入或添加外部物質(zhì),因此對(duì)實(shí)驗(yàn)對(duì)象的傷害極小。
時(shí)空特異性:光遺傳學(xué)技術(shù)可以在特定的時(shí)間和地點(diǎn)激活或抑制神經(jīng)元活動(dòng),實(shí)現(xiàn)對(duì)單一細(xì)胞或細(xì)胞亞群的控制。
可逆性:通過(guò)光刺激可以實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞行為的即時(shí)開(kāi)啟和關(guān)閉,這種控制是可逆的,可以在實(shí)驗(yàn)中多次重復(fù)使用。
高時(shí)效性:光作為刺激媒介,可以實(shí)現(xiàn)毫秒級(jí)別的時(shí)間準(zhǔn)確度,這對(duì)于研究快速發(fā)生的生物過(guò)程尤為重要。
低毒性:與藥物注射和電刺激等傳統(tǒng)方法相比,光遺傳學(xué)技術(shù)的毒性更低,對(duì)細(xì)胞的生理狀態(tài)影響較小。
操作性強(qiáng):實(shí)施光遺傳學(xué)技術(shù)通常只需要向細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)入一個(gè)光敏蛋白,操作簡(jiǎn)單且易于控制。
總的來(lái)說(shuō),光遺傳學(xué)技術(shù)為神經(jīng)科學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)以及相關(guān)醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域帶來(lái)了革命性的變革。它不僅推動(dòng)了基礎(chǔ)生物學(xué)研究的深入,也為未來(lái)的臨床治療提供了新的可能性。
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