細胞培養(yǎng)技術對于生產(chǎn)病毒性疫苗和其他生物技術產(chǎn)品至關重要。細胞傳代是細胞培養(yǎng)bi不可少的過程,對于貼壁細胞,傳代時首先需進行細胞分離。胰蛋白酶(胰酶)是常用的消化酶,可使細胞間的蛋白質(zhì)水解從而使細胞離散。胰酶可在胰腺中大量獲得,且易提純,因此在各種細胞培養(yǎng)過程中得到廣泛應用。那么你知道中科百抗Neptry胰酶細胞消化液的應用與注意事項有什么嗎?讓我們一起來看看吧!
中科百抗NeptryTM消化液是一種胰蛋白酶類似物(Trypsin Like Enzyme),是一種通過生物工程制備的非動物源性重組蛋白酶,與胰蛋白酶有相似的解離動力學,穩(wěn)定性更高,純度更好,消化更溫和,細胞毒性更低。目前主要應用于細胞培養(yǎng)中,可以在賴氨酸和精氨酸的C末端切割肽鍵,可以替代豬或牛胰蛋白酶(Trypsin)對貼壁細胞的消化解離。生物制藥中,GMP級別的NeptryTM能夠為疫苗生產(chǎn)、病毒載體生產(chǎn)提供高質(zhì)量和高性價比的貼壁細胞消化解決方案。
NeptryTM消化液與胰蛋白酶具有類似的功能,由大腸桿菌(E.coli)重組表達,GMP條件生產(chǎn),在性能和儲存上可wan全替代傳統(tǒng)動物源胰酶,讓細胞消化更加高效便捷。產(chǎn)品主要應用方向:
1.用于組織塊的消化解離和原代細胞的獲?。?/p>
2.用于貼壁細胞的傳代消化和收獲;
3.用于微載體方法培養(yǎng)的細胞消化和收獲;
4.用于疫苗生產(chǎn)過程中一些貼壁宿主細胞的消化,低血清或無血清的環(huán)境下,弱貼壁細胞及干細胞在傳代過程中的消化。
使用Neptry消化液注意事項:
1.在使用過程中注意避免消化液被細菌污染;
2.消化的時間不宜過長,否則細胞鋪板后生長狀況會較差,做流式時的CD Marker也會下降;
3.消化液進行分裝時需分裝成多瓶,并遵守3次左右用完和只裝2/3體積的原則。;
4.在低血清或無血清的環(huán)境下,弱貼壁細胞及干細胞在傳代過程中的消化效果主要取決于pH值、溫度、消化液濃度、組織塊大小和硬度。
5.酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值的指示劑,中性時為紅色,酸性時為黃色,堿性時為紫色。研究表明酚紅可以模擬固醇類激素的作用,為避免固醇類反應,培養(yǎng)細胞特別是哺乳類細胞時,需用不加酚紅的培養(yǎng)基。
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