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細(xì)胞是生命的基本單位。(除了病毒外。)細(xì)胞由細(xì)胞核組成和細(xì)胞膜還有線粒體等組成。(除個(gè)別生物)小到細(xì)菌大至鯨魚(yú)。都由細(xì)胞組成。
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)用技巧總括:
1. 買細(xì)胞要去正規(guī)的地方購(gòu)買,一般產(chǎn)品資料上面會(huì)有針對(duì)細(xì)胞的詳細(xì)介紹,這樣在培養(yǎng)之前可以了解細(xì)胞正常生長(zhǎng)的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類型等。
2. 不管是買的細(xì)胞,還是他人惠贈(zèng)的細(xì)胞,剛拿到手需要趕緊做的兩件事:一檢測(cè)是否有支原體污染;二迅速擴(kuò)增凍存,凍存細(xì)胞復(fù)蘇后第二天更換一次培養(yǎng)基。
3. 發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有污染迅速處理掉,特別是當(dāng)養(yǎng)了很多種細(xì)胞時(shí)。細(xì)菌污染、真菌污染很容易發(fā)現(xiàn),支原體污染,細(xì)胞會(huì)長(zhǎng)的慢,可以買支原體檢測(cè)的試劑盒定期檢測(cè)一下。
4. 不同細(xì)胞生長(zhǎng)周期不同。有的生長(zhǎng)很快,比如說(shuō) MDA-MB-231,傳代的時(shí)候取離心懸液的十分之一就足夠了。有的生長(zhǎng)周期又特別慢,比如 BT474,傳代是一分二,復(fù)蘇起始的時(shí)候兩周多才能長(zhǎng)滿。這就需要要在培養(yǎng)細(xì)胞的過(guò)程中多多摸索。
5. 對(duì)于嬌弱的細(xì)胞,就得細(xì)心呵護(hù)。yi酶消化不能過(guò)久,吹得時(shí)候要輕柔,離心時(shí)候也要注意轉(zhuǎn)速和時(shí)間。每天都要去觀察一下細(xì)胞,肉眼觀察培養(yǎng)基狀況、顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀況。重點(diǎn)每天觀察。
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