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DiI 細胞膜橙色熒光探針
產品貨號：D2210
儲存條件：-20℃
產品描述
DiI是一種親脂性的熒光染料，可以用來染細胞膜和其它脂溶性生物結構，進入細胞膜后，DiI在整個細胞膜上擴散，最jia濃度時可以使整個細胞膜染色。DiI在進入細胞膜之前熒光非常弱，當與細胞膜結合后其熒光強度大大增強，DiI被激發(fā)后可以發(fā)出橙紅色的熒光，具有很高的淬滅常數，中等強度的光量子和很短的激發(fā)態(tài)壽命。可以用標準的TRITC濾光片檢測。
DiI通常不會明顯影響細胞的生存力，因此被廣泛用于正向或逆向的，活的或固定的神經等細胞或組織的示蹤劑或長期示蹤劑（long-term tracer）。除了最jian單的細胞膜熒光標記外，還可以用于檢測細胞的融合和粘附，檢測發(fā)育或移植過程中細胞遷移，通過FRAP（Fluorescence Recovery After Photobleaching）檢測脂在細胞膜上的擴散，檢測細胞毒性和標記脂蛋白等。
產品性質
中文別名（Chinese synonym） | DiI熒光染料 |
英文別名（English synonym） | 1,1-Dioctadecyl-3,3,3, 3- tetramethylindocarbocyanine iodide |
CAS號（CAS NO.） | 41085-99-8 |
分子式（Formula） | C59H97ClN2O4 |
分子量（Molecular weight） | 933.87 |
溶解性（Solubility） | 溶于DMF，DMSO，甲醇 |
使用方法
1. DiD，DiO，DiI，DiR和DiS細胞膜染色液制備
（1）配置DMSO或EtOH 儲存液：儲存液用 DMSO或EtOH配置濃度1～5 mM。
注意：未使用的儲存液保存在-20°C，避免反復凍融。
（2）工作液制備：用合適的緩沖液（如：無血清培養(yǎng)基，HBSS或PBS）稀釋儲存液，配制濃度為1～5 µM的工作液。
注意：工作液的最終濃度是根據不同細胞和實驗的經驗來配制?？梢詮耐扑]濃度的十倍以上尋找最jia條件。
2. 懸浮細胞染色
（1）懸浮細胞密度為 1 × 106/mL加入到工作液中。
（2）在37 ℃培養(yǎng)細胞 2～20分鐘，不同的細胞最jia培養(yǎng)時間不同。
（3）染色細胞試管在1000～1500轉離心5分鐘。
（4）傾倒上清液，再次緩慢加入預溫37℃的培養(yǎng)液。
（5）重復（3），（4）步驟兩次以上。
3. 粘壁細胞的染色
（1）使粘壁的細胞在無菌實驗室培養(yǎng)。
（2）從培養(yǎng)基中移走蓋玻片，吸走過量培養(yǎng)液，將蓋玻片放在潮濕的環(huán)境中。
（3）在蓋玻片的一角加入100μL的染料工作液，輕輕晃動使染料均勻覆蓋所有細胞。
（4）在37 ℃培養(yǎng)細胞 2～20分鐘，不同的細胞最jia培養(yǎng)時間不同。
（5）吸干染料工作液，用培養(yǎng)液洗蓋玻片2～3次，每次用預溫的培養(yǎng)基覆蓋所有細胞，培養(yǎng)5～10分鐘，然后吸干培養(yǎng)基。
4. 顯微鏡檢測
（1）DiD，DiO，DiI，DiR和DiS濾光器的選擇參見表1。
（2）多色染料的同時檢測，濾光器按照以下設定：
a) DiI和DiO＝Omega XF52，Chroma 51004；
b) DiI和DiD＝Omega XF92，Chroma 51007；
c) DiI，DiO和DiD＝Omega XF93，Chroma 61005
5. 流式細胞儀的檢測
DiD，DiO，DiI，DiR和DiS 染色的細胞可以分別用經典的FL1，FL2，FL3和FL4流式細胞儀檢測。
注意事項
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
本品僅用于實驗研究。
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