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貨物所在地:北京北京市
更新時(shí)間:2023-11-28 09:39:56
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10%一步法AB液蛋白快速制膠試劑盒
貨號(hào):P0105
存儲(chǔ)條件:APS,-30~-15℃保存,≤0℃運(yùn)輸,可在2~8℃保存至少3個(gè)月;其他組分,2~8℃保存。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
10% AB液蛋白快速制膠試劑盒適用于蛋白聚丙烯酰胺凝膠的快速制備。本試劑盒采用上層膠和下層膠的預(yù)混配方,只需將試劑兩兩混合,加入促凝劑即可凝膠,簡(jiǎn)便快捷。所配的上層膠帶有顏色,方便點(diǎn)樣和區(qū)分不同凝膠。試劑盒提供的改良型促凝劑APS,具有良好的穩(wěn)定性和促凝效果,配膠過程中無需添加TEMED。本試劑盒可配制125塊mini PAGE膠(以 0.75 mm厚度膠計(jì)算)。
產(chǎn)品組分
組 分 | 貨號(hào) | P0105 |
上層膠 A液 | P0105-1 | 80 ml |
上層膠 B液 | P0105-2 | 80 ml |
下層膠 A液(10%) | P0105-3 | 250 ml |
下層膠 B液 | P0105-4 | 250 ml |
APS | P0105-5 | 8 ml |
凝膠濃度選擇參照
貨號(hào) | 試劑盒濃度 | 蛋白最佳分離范圍 |
P0065 | 6% | 50-150KD |
P0085 | 8% | 30-130KD |
P0105 | 10% | 20-100KD |
P0125 | 12% | 10-70KD |
P0155 | 15% | 10-55KD |
操作流程:
以制備一塊0.75/1.0/1.5 mm的PAGE膠為例。
下層膠配方
凝膠厚度 | 下層膠 A液 | 下層膠 B液 | APS |
0.75mm | 2.0ml | 2.0ml | 40ul |
1.0mm | 2.7ml | 2.7ml | 60ul |
1.5mm | 4.0ml | 4.0ml | 80ul |
上層膠配方
凝膠厚度 | 上層膠 A液 | 上層膠 B液 | APS |
0.75mm | 0.5ml | 0.5ml | 10ul |
1.0mm | 0.75ml | 0.75ml | 15ul |
1.5mm | 1.0ml | 1.0ml | 20ul |
1. 各組分在使用前請(qǐng)顛倒混勻6-8次。
2. 下層膠配制:取等體積下層膠A液和下層膠B液,各2.0/2.7/4.0 ml,混勻。
3. 上層膠配制:取等體積上層膠A液和上層膠B液,各0.5/0.75/1.0 ml,混勻。
4. 向步驟2的混合溶液中加入40/60/80 μl的APS,立即充分混勻,然后注入制膠玻璃板中,使液面距短玻璃板上沿約1.5cm。
注1:此溶液一般過量,請(qǐng)勿全部注入。
注2:混勻操作避免劇烈振蕩,在灌注的過程中避免將氣泡灌入制膠玻璃板中。
注3:灌注下層膠后用ddH2O或醇封閉,待下層膠凝固后再灌注上層膠。
5. 向步驟3的混合溶液中加入10/15/20μl的APS,立即充分混勻,無需等待下層膠凝固,即可將混勻后的溶液輕緩注入制膠玻璃板中,輕輕插入梳齒。
注:灌注上層膠溶液可沿著長(zhǎng)玻璃板輕緩注入,避免將下層膠沖散。
6. 待膠凝固后(室溫約20-30 min),拔去梳齒即可用于電泳。
注:請(qǐng)盡量使用新鮮配制的電泳緩沖液。
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