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一．產(chǎn)品介紹：植物ATP結(jié)合轉(zhuǎn)運蛋白酶(ABC)ELISA試劑盒

【產(chǎn)品規(guī)格】：96T/盒：可檢測90個樣；48T/盒：可檢測42個樣。

【準確性】：標準品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值，大于等于0.9900。

【靈敏度】：zui低檢測濃度小于10.0 U/L。

【特異性】：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。

【重復性】：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%

【適用范圍】：此試劑盒僅用于科學研究，禁止用于臨床。

二. 實驗需自備器材:
1、450nm酶標儀。
2、自動洗板機。
3、37℃恒溫箱。
4、系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭,一次檢測樣品較多時,用多通道移液器。
5、干凈的試管和Eppendof管。
6、用去離子水將25X洗滌緩沖液稀釋25倍,成1X洗滌緩沖液。

三. 樣品收集、處理及保存方法：

1.  樣本不能含疊氮鈉（NaN3），因為疊氮鈉（NaN3）是辣根過氧化物酶（HRP）的抑制劑。

2.  標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行。

3.  植物萃取液或其它相關(guān)樣本：請1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測。

（植物處理方案）

1、 新鮮植物組織請在液氮中充分研磨，如無液氮，剪碎，玻璃勻漿器研磨也可；

2、 加入樣品體積9倍（鮮重：勻漿液體積）的提取液（0.1mmol PH7.4 PBS ）, 4℃浸提2h；

3、 請于4℃ ，3000rpm，離心10min，收集上清；

4、 取上清檢測。

注：標本均應(yīng)密封保存，短期內(nèi)使用（1周左右），可4度保存；若樣本收集與實驗時間相隔較長，務(wù)必保存在-20或-80度，盡量不要超過半年，同時避免反復凍融。

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五.檢測原理：試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預(yù)先包被ATP 結(jié)合轉(zhuǎn)運蛋白酶（ABC）抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的ATP 結(jié)合轉(zhuǎn)運蛋白酶（ABC）呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品活性。

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